《組蛋白翻譯後修飾及其結合蛋白系統鑑定新方法的研究》是依託天津醫科大學，由張鍇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：組蛋白翻譯後修飾及其結合蛋白系統鑑定新方法的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張鍇
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
組蛋白通過翻譯後修飾及其結合蛋白改變了與DNA的纏繞狀態，參與了DNA複製、修復和轉錄等重要的生物過程，對細胞分化、組織發育具有極為重要的影響，與癌症的發生、發展密切聯繫，具有腫瘤標誌物和藥物作用靶標等重要的生物學意義。然而，由於組蛋白修飾種類繁多、修飾位點複雜（至少80個），且隨著生理過程發生動態變化，因此組蛋白修飾及其結合蛋白的鑑定一直缺乏高靈敏、系統、準確的分析手段。本課題擬以組蛋白各種修飾及其結合蛋白為目標，聯契約位素標記、胺基酸殘基化學衍生、蛋白分離和質譜分析，以及新的蛋白修飾專門軟體，建立組蛋白各種修飾的系統檢測和定量分析新方法；分析不同侵襲程度食淚盛地汗管癌細胞組蛋白修飾圖譜，搜尋新的、未知的組蛋白修飾形式；針整章捉對新的修飾位點和重要的差異性修飾，構建並製備新的多肽分子探針，結合定量蛋白質組學技術，分析組蛋白特定修飾位點的相關結合蛋白，探索食管癌侵襲轉移與組蛋白修飾及結合蛋白的相關性。
結題摘要
組蛋白翻譯後修飾及其結合蛋白參與DNA複製、修復和轉錄等重要的調控，對細胞分化、組織發育具有極為重要的影響，與腫瘤等催紙鞏重大疾病的發生、發展密切聯繫，具有腫瘤標誌物和藥物作用靶標等重要的生物學意義。然而由於組蛋白修飾種類繁多、修飾位點複雜，且隨著生理過程發生動態變化，因此組蛋白修飾及其結合蛋白的鑑定缺乏高靈敏、系統、準確的分析手段。基於此本課題開章慨展了組蛋白修飾、結合蛋白以及相關蛋白的分析新方法和套用研究，主要取得如下研究結果：（1）聯合穩定同位素標記、賴氨酸殘基化學衍生、組蛋白分離和質譜分析，以及蛋白修飾專門軟體，建立了組蛋白修飾的系統鑑定和定量分析新方法，並套用於生物醫學。鑑定了高、低侵襲性食管癌細胞組蛋白修飾圖譜，發現了與侵襲性相關的組蛋白異常修飾H4K79me2，並得到臨床樣本驗證；鑑定了胚胎幹細胞分化為神經前體細胞組蛋白修飾圖譜，包括賴氨酸丁醯化、琥珀醯化等新修飾，並發現了多個修飾組合形式的變化規律；鑑定了新型抗腫瘤試劑largazole-7對組蛋白修飾各修飾位點的調控規律；（2）構建了藥物小分子探針，鑑定了組蛋白去乙醯化酶抑制劑SAHA未見報導的多個作用底物蛋白，並探討了其中ENO1的作用方式；（3）建立了賴氨酸乙醯化大規模分析的新方法，在大腸桿菌中發現了大量未束閥棕見報導的修飾位點，拓展了乙醯化修飾的數量；（4）發展了愚匙戲欠基於質譜鑑定和生物信息學分析解析蛋白修飾的新方法，並發現了兩種色氨酸新修飾形式和多個未見報導的羥基化斷只照修飾位點；（5）構建了基於DNA自組裝和親和光交聯的新型探針，建立了組蛋白修飾結合蛋白分析新方法，研究了腫瘤細胞組蛋白H3K4三甲基化修飾介導的結合蛋白複合物，發現了多個未見報導具有特徵結構域的作用蛋白。本項目針對組蛋白修飾、結合蛋白等建立的分析新方法，在食管癌等研究中展現了靈敏、精確的分析效果，在生物醫學中具有良好的套用前景。
