《組蛋白去甲基化酶JMJD2B調控胃癌侵襲轉移的機制研究》是依託山東大學，由李汶娟擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：組蛋白去甲基化酶JMJD2B調控胃癌侵襲轉移的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李汶娟
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
侵襲轉移是導致胃癌患者死亡的首要因素，其中上皮-間質轉化（EMT）是上皮來源腫瘤侵襲轉移的重要機制。表觀遺傳學調控是EMT和侵襲轉移研究領域的重要科學問題。本課題組研究發現表觀遺傳分子組蛋白去甲基化酶JMJD2B在胃癌細胞中影響EMT關鍵分子的表達，干擾JMJD2B的表達顯著抑制胃癌細胞的遷移能力並誘導細胞形態的轉變,提示JMJD2B在EMT和胃癌侵襲轉移中的潛在作用。在此基礎上，課題組將進一步研究：（1）細胞和分子水平上JMJD2B對胃癌侵襲轉移和胃癌幹細胞活性的作用及其對EMT的調控機制；（2）體內水平上裸鼠轉移模型中JMJD2B對EMT和胃癌侵襲轉移的作用；（3）人體組織標本上JMJD2B和EMT關鍵分子表達的相關性及其與胃癌侵襲轉移的相關性。從而闡明JMJD2B作為表觀遺傳分子在EMT和胃癌侵襲轉移中的作用機制，為干預EMT控制胃癌侵襲轉移提供理論依據。
結題摘要
胃癌是世界範圍內最常見的惡性腫瘤之一，位居全球癌症相關死亡率第二位。胃癌早期診斷率低，多數患者就診時已進入中晚期，五年生存率很低。因此，揭示胃癌發生髮展的致病機理，闡明胃癌發生侵襲轉移的機製成為當務之急。 EMT是上皮細胞來源的惡性腫瘤細胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學過程。我們在高侵襲能力的HGC27和MGC803胃癌細胞中轉染JMJD2B特異性小干擾RNA抑制JMJD2B的表達，發現細胞由疏鬆的長梭形間質樣表型向緊密的鵝卵石樣的上皮表型轉變。繼而WB和QRT-PCR檢測發現胃癌細胞抑制JMJD2B表達後間質化標記分子vimentin和Snail1的表達下降而上皮化標記E-cadherin的表達上調，而過表達JMJD2B後vimentin和Snail1的表達上調，E-cadherin表達下降。雙螢光素酶實驗檢測發現抑制JMJD2B表達，vimentin啟動子螢光素酶活性下降，而過表達JMJD2B後vimentin啟動子螢光素酶活性升高。轉染β-catenin/TCF結合位點失活的vimentin啟動子突變質粒後， 抑制JMJD2B表達突變質粒螢光素酶活性不再降低，而過表達JMJD2B後其活性也未升高，這表明JMJD2B對vimentin的轉錄調控依賴於β-catenin。接著免疫共沉澱實驗證實JMJD2B與β-catenin存在物理性相互作用。染色質免疫共沉澱實驗（ChIP）顯示JMJD2B結合於vimentin啟動子區，干擾JMJD2B後vimentin啟動子區β-catenin結合減少，vimentin啟動子區的H3K9me3累積而 H3K9me2減少。此外，我們通過細胞免疫螢光實驗發現胃癌細胞中抑制JMJD2B，TGF-β1介導的β-catenin的核轉位和vimentin的表達也減少。細胞劃痕實驗、Transwell基質膠侵襲實驗和裸鼠尾靜脈注射肺轉移實驗從體內外水平表明干擾JMJD2B後胃癌細胞遷移和侵襲能力明顯下降。最後臨床組織樣本免疫組化檢測顯示JMJD2B的表達與胃癌的侵襲轉移呈正相關。 該研究闡明了JMJD2B在胃癌侵襲轉移中的作用，為其作為干預胃癌進展的藥物靶點的開發提供了理論依據。
