細菌誘變試驗

常用的誘變方法

1、溫度

溫度誘發基因突變的機制似乎是專一對GC鹼基對的作用。包括使C脫氨基轉換為尿嘧啶（U），在複製中造成GG向AT轉換；以及引起G-脫氧核糖鍵的移動，從而在DNA複製過程中出現包括兩個G的鹼基對，在再一次複製中造成GG向CG轉換。

2、輻射

輻射的誘變作用一般認為有直接作用和間接作用兩個方面。

前者是指輻射直接作用於染色體，包括引起DNA骨架斷裂所造成的染色體畸變和引起複製差錯。

間接作用是使染色體以外的細胞物質發生變化，再由這些物質作用於染色體引起突變；包括鹼基類似物的形成及其突變誘發作用，和電離輻射引起過氧化氫和游離基的產生以及誘發突變。

常用的化學誘變劑有5-溴脫氧尿苷、5-氟脫氧尿苷、2-氨基嘌呤、8-氮鳥嘌呤、亞硝酸、羥胺、烷化劑（B丙酸內酯和芥子氣等）、亞硝酸胍、吖啶橙燃料（吖啶黃、吖啶橙、原黃素等）、一系列烷化劑和吖啶類結合的化合物、溴化乙啶等。它們的作用機制複雜而各有差異，主要有以下幾個方面。

1、取代鹼基參入DNA，從而使DNA的某些鹼基對發生置換。例如5-溴脫氧尿苷是T的結構類似物，它通常以酮式出現，能代替T與A形成氫鍵而配對。

2、使鹼基發生化學變構，從而引起DNA的某些鹼基對發生置換。例如亞硝酸對鹼基有氧化脫氨基作用，可以變C成為U與A配對，或A成為次黃嘌呤（H）與C配對，從而引起DNA的某些鹼基對發生置換突變。

3、插入DNA相鄰的鹼基之間，引起移碼突變。在臨近的兩個嘌呤鹼基之間插入吖啶染料分子，可引起DNA複製時鹼基增添或缺失的錯誤，造成密碼子的移碼，出現基因突變。

4、引起DNA分子斷裂而誘發染色體畸變。例如許多烷化劑（氮芥、硫芥、環氧乙烷等）除能誘發點突變以外，還能誘發染色體畸變。

利用各種生物學的方法可誘使微生物發生變異，使細菌發生毒力等性狀的改變，獲得性能良好的菌株。

1、增強毒力

連續通過易感動物，可使病原菌毒力增強。有的細菌與其他微生物共生，或被溫和噬菌體感染，也可增強毒力。例如產氣莢膜梭菌與八疊球菌共生時毒力增強；肉毒梭菌被溫和噬菌體感染時，方產生毒素。

2、減弱毒力

病原菌毒力自發減弱的現象，常見於傳染病流行末期所分得的病原菌株。人工減弱病原微生物的毒力通常使用病原菌通過非易感動物、雞胚等方法。如將禽霍亂強毒菌株通過豚鼠190代後，再經雞胚傳40代，育成禽霍亂弱毒菌株。無論自然變異弱毒菌株或人工培育的變異弱毒菌株，均由於DNA上核苷酸鹼基順序的改變的結果。