《細胞內鈣信號與平滑肌細胞增殖及去分化》是依託北京師範大學，由王友軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：細胞內鈣信號與平滑肌細胞增殖及去分化
- 依託單位：北京師範大學
- 項目負責人：王友軍
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
作為內質網膜上的鈣感受器，STIM蛋白（包括STIM1及STIM2）會感受內質網內鈣水平的降低,結合併激活細胞膜上鈣離子通道，Orai1。對STIM1的生理功能以及其耦合併激活Orai1的分子機制的研究一直是個前沿熱點領域。但目前對STIM1在平滑肌細胞增殖及表型變化中作用的分子機制還不很清楚,對其同源蛋白STIM2的了解也不多。我們以前的工作表明STIM1在激活Orai1的同時還會耦合抑制L型鈣通道。STIM2和L型鈣通道在平滑肌內大量存在，他們在上述細胞變化過程中的作用還不清楚。因此本工作的目的是研究（1）STIM1，特別是STIM2激活及與它們的靶蛋白（Orai1，特別是LTCC）的相互作用的分子機理；（2）STIM和LTCC在平滑肌增殖和表型變化中的作用。我們的研究將提高領域內對內對STIM-Orai1耦合機制的理解，並進一步探索平滑肌損傷修復的機理。
結題摘要
鈣池操縱鈣內流（SOCE）是一種由STIM蛋白和Orai鈣離子通道共同介導的一種鈣內流。它在分泌、基因轉錄、酶活調節、細胞生死等過程中發揮重要的作用，並與眾多疾病，特別是心血管病及免疫相關疾病密切相關。為探究STIM介導的鈣池操縱鈣內流（SOCE）的激活及調控機理，我們利用一組原創的可以在納米尺度原位實時監測STIM構象變化的螢光探針，闡釋了STIM1及STIM2特異性激活的分子機制；鑑定了決定STIM1及STIM2蛋白特異性結合Orai1鈣通道，引發SOCE的關鍵胺基酸位點。還運用一種新型無損原位活體生物素標記技術，結合質譜分析獲得了內質網-質膜連線處與STIM1互作的蛋白質組，並進一步鑑定了其中一個候選蛋白STIMATE調控STIM1激活的分子機制。最後我們還製備了一個光遺傳學工具，用它實現了對STIM1靶蛋白L型鈣通道（LTCC）的可逆光抑制。這些研究進一步闡明了SOCE激活及調控機制，並將為後續研究提供優秀的分子生物學工具或蛋白質組學信息。
