《紫杉醇脂質組合物及其製備方法》是南京振中生物工程有限公司於2000年10月19日申請的專利，該專利的申請號為001190393，公布號為CN1291474，授權公布日為2001年4月18日，發明人是翁幗英、周衛、程光、程培元。
《紫杉醇脂質組合物及其製備方法》公開了具有良好抗癌作用的紫杉醇脂質體製劑，其毒性小、病人耐受性好、水溶性及穩定性提高、相對成本較低；並公開了該製劑的可工業化實施的方法，用膽固醇及胺基酸作穩定劑，用甘露醇或葡萄糖作凍乾保護劑，用異丙醇或乙醇作溶劑。
2013年，《紫杉醇脂質組合物及其製備方法》獲得第八屆江蘇省專利項目獎金獎。
基本介紹
- 中文名：紫杉醇脂質組合物及其製備方法
- 公布號：CN1291474
- 公布日：2001年4月18日
- 申請號：001190393
- 申請日：2000年10月19日
- 申請人：南京振中生物工程有限公司
- 地址：江蘇省南京市高新技術產業開發區
- 發明人：翁幗英、周衛、程光、程培元
- Int.Cl.：A61K31/337、A61K9/127、A61P35/00
- 代理機構：江蘇省專利事務所
- 代理人：周和平、徐冬濤
- 類別：發明專利
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,有益效果,權利要求,實施方式,榮譽表彰,
專利背景
紫杉醇是二十世紀六十年代美國國立癌症研究所從數千種植物中篩選發現的抗癌藥，治療卵巢癌、乳腺癌及非小細胞肺癌。由於紫杉醇難溶於水及許多藥用溶劑，2000年10月前中國國內外市售的紫杉醇注射劑均是用聚氧乙基代蓖麻油與無水乙醇的複合溶媒製備注射劑的。複合溶媒中的聚氧乙基代蓖麻油在體內降解時能釋放組織胺，從而發生嚴重的過敏反應。美國布邁施貴寶公司在中國註冊的紫杉醇注射劑（商品名為泰素），其說明書中指出“為防止出現嚴重過敏反應，所有接受該藥病人應預先給予皮質類固醇（如地塞米松）苯海拉明和H2受體拮抗劑（如西米替丁、雷尼替丁）”，還告之“注射前用生理鹽水或5％葡萄糖稀釋後會析出沉澱（結晶），故還需接0.22微米微孔過濾器過濾，以保用藥安全”。紫杉醇本身亦有血液學毒性、骨髓抑制、白細胞減少、血小板減少、貧血及其它毒性。這樣就迫切需要改變紫杉醇的劑型，以增加其溶解度，提高其穩定性，避免由於上述複合溶媒帶來的過敏反應及其它的毒副作用。從90年代初進行的紫杉醇脂質體的基礎研究至2000年10月前臨床前研究取得有實用價值的進展，實驗表明紫杉醇脂質體製劑與注射劑相比，療效相似，但毒性降低，耐受性提高。Sharma-A在《Int-J-Cancer》1997，71，103～107中報導用三種合成磷脂製成的紫杉醇脂質體（代號TTL），其穩定性大於用單純卵磷脂製成的紫杉醇脂質體（代號ETL），但未說兩者穩定性有多大差別，僅提到ETL製劑加水溶解後24小時穩定，並提及製備時所用於溶劑為苯或丁醇。苯作溶劑毒性很大。美國專利USPatent5，415，869（1995）中，提到用單純卵磷脂製備紫杉醇脂質體製劑有聚集現象，故加入負電性物質或正電性物質，如磷脂醯甘油酯（PG）。該專利採用卵磷脂：PG比例為9:1或3:7，用氯仿作溶劑時，紫杉醇脂質體不聚集，當比例為5:5時就有紫杉醇結晶析出。PG在卵磷脂中含量極少，不易得到，中國國外也只有試劑規格的，價格昂貴，用氯仿作溶劑毒性太大。
發明內容
專利目的
《紫杉醇脂質組合物及其製備方法》的目的是提供一種不含聚氧乙基代蓖麻油的紫杉醇脂質組合物凍乾劑，具良好的水溶性，可直接溶於5％葡萄糖後靜脈滴注。其毒性小、穩定性提高、相對成本較低。
該發明的目的還在於提供一種製備毒性小、具有良好水溶性、穩定性提高的紫杉醇脂質體製劑的可工業化實施的方法，用無毒溶媒及易得到的輔料替代有毒溶媒及昂貴的輔料。
技術方案
《紫杉醇脂質組合物及其製備方法》的技術方案是一種治療癌症的紫杉醇脂質體製劑，其特徵是以下述重量配比藥物為原料：紫杉醇2～5份，磷脂20～200份，膽固醇2～30份，胺基酸0.4～4份，甘露醇或葡萄糖10～75份。
所述胺基酸可以是賴氨酸、蘇氨酸或蛋氨酸。
所述磷脂是卵黃磷脂或大豆磷脂。
該發明技術方案還涉及一種治療癌症的製劑的製備方法，其特徵是以下述重量配比藥物為原料：
紫杉醇2～5份，磷脂20～200份，膽固醇2～30份，胺基酸0.4～4份，甘露醇或葡萄糖10～75份。
將紫杉醇、磷脂、膽固醇按上述比例，溶於異丙醇或乙醇溶劑中，恆溫除去溶劑，加入溶有按上述比例計算的胺基酸和甘露醇或葡萄糖的水溶液，使溶解，可用超音波或高壓勻漿泵處理使粒徑變小至0.1～5微米，分裝入安瓿或西林瓶等容器內，冷凍乾燥，即得白色塊狀的紫杉醇脂質體，封口或壓蓋時可通氮氣、氦氣或氬氣。
所述胺基酸可以是賴氨酸、蘇氨酸或蛋氨酸。
所述磷脂是卵黃磷脂或大豆磷脂。
所述恆溫除去溶劑的溫度是50～60℃。
有益效果
按《紫杉醇脂質組合物及其製備方法》技術方案製備的紫杉醇脂質體製劑，抗癌療效與市售紫杉醇注射液相似，參見表1。該發明採用單純卵磷脂加膽固醇、胺基酸作穩定劑。胺基酸系兩性物質，在一定pH條件下，如本技術方案條件下，可以產生帶電性，從而防止聚集，且不會有紫杉醇結晶析出。比文獻報導的加負電性物質如PG或帶正電性物質，成本低，原料易得；比僅用單純卵磷脂穩定，不會產生聚集現象，所得紫杉醇脂質體加水溶解後放置無結晶析出（表2）。該發明製備的紫杉醇脂質體製劑具有良好的水溶性，所得製劑中紫杉醇含量為4～8毫克/毫升，此濃度可適合於臨床用藥要求，可與市售紫杉醇注射液的相同量用於臨床治療。如按體表面積計算，每平方米175毫克靜脈滴注。
組別 | 劑量（毫克/千克） | 動物數（只） | 瘤重（克） | 抑瘤率（%） | |
|---|---|---|---|---|---|
藥前 | 藥後 | ||||
紫杉醇脂質體 | 20.0 | 10 | 10 | 0.826±0.204** | 48.79 |
紫杉醇脂質體 | 14.0 | 10 | 10 | 0.896±0.293** | 44.44 |
紫杉醇脂質體 | 9.8 | 10 | 10 | 1.114±0.425 | 30.89 |
紫杉醇注射液 | 14.0 | 10 | 10 | 0.860±0.177** | 46.65 |
紫杉醇注射液 | 9.8 | 10 | 9 | 1.180±0.299 | 26.80 |
對照 | / | 10 | 10 | 1.612±0.705 | / |
批號 | 時（月） | 外觀 | 顯微鏡檢測 |
|---|---|---|---|
No1 | 0 | 類白色疏鬆塊狀物 | 溶解後無結晶析出，不聚集 |
1 | 類白色疏鬆塊狀物 | 溶解後無結晶析出，不聚集 | |
6 | 類白色疏鬆塊狀物 | 溶解後無結晶析出，不聚集 | |
12 | 類白色疏鬆塊狀物 | 溶解後無結晶析出，不聚集 | |
No2 | 0 | 類白色疏鬆塊狀物 | 溶解後無結晶析出，不聚集 |
1 | 類白色疏鬆塊狀物 | 溶解後無結晶析出，不聚集 | |
6 | 類白色疏鬆塊狀物 | 溶解後無結晶析出，不聚集 | |
12 | 類白色疏鬆塊狀物 | 溶解後無結晶析出，不聚集 |
權利要求
2.根據權利要求1的紫杉醇脂質體製劑，其特徵是所述胺基酸可以是賴氨酸、蘇氨酸或蛋氨酸。
3.根據權利要求1的紫杉醇脂質體製劑，其特徵是所述磷脂是卵磷脂或大豆磷脂。
4.一種治療癌症的紫杉醇脂質體製劑的製備方法，其特徵是以下重量配比藥物為原料：
紫杉醇2～5份，磷脂20～200份，膽固醇2～30份，胺基酸0.4～4份，甘露醇或葡萄糖10～75份；
將紫杉醇、磷脂、膽固醇按上述比例溶於異丙醇或乙醇中，恆溫除去溶劑，加入溶有按上述比例計算的胺基酸和甘露醇或葡萄糖的水溶液，溶解後，分裝入容器內，冷凍乾燥，得紫杉醇脂質體製劑。
5.根據權利要求4的一種治療癌症的紫杉醇脂質體製劑的製備方法，其特徵是所述胺基酸可以是賴氨酸、蘇氨酸或蛋氨酸。
6.根據權利要求4的一種治療癌症的紫杉醇脂質體製劑的製備方法，其特徵是所述磷脂是卵磷脂或大豆磷脂。
7.根據權利要求4的一種治療癌症的紫杉醇脂質體製劑的製備方法，其特徵是恆溫除去溶劑的溫度是50～60℃。
8.根據權利要求4，冷凍乾燥後通入氮氣、氦氣或氬氣。
實施方式
實施例
取注射用紫杉醇6.0克，精製卵磷脂72克及膽固醇10.8克置圓底燒瓶內，加適量乙醇至上述混合物中使完全溶解成澄明溶液，置恆溫水浴（50℃）減壓乾燥成膜，加含賴氨酸1.4克的5％甘露醇溶液溶解膜，用超音波儀超聲粉碎或高壓勻漿泵進行勻漿，再用0.22微米濾膜過濾除菌，分裝於安瓿內（或西林瓶），使每瓶含紫杉醇30毫克。進行冷凍乾燥，通惰性氣體封口即得白色塊狀紫杉醇脂質體製劑。
榮譽表彰
2013年，《紫杉醇脂質組合物及其製備方法》獲得第八屆江蘇省專利項目獎金獎。
