紫外分析儀

紫外分析儀的原理及其套用

紫外分析儀是螢光技術的套用，螢光技術是什麼呢？　首先了解一下什麼是螢光，螢光又作“螢光”，是指一種光致發光的冷發光現象。當某種常溫物質經某種波長的入射光（通常是紫外線或X射線）照射，吸收光能後進入激發態，並且立即退激發並發出比入射光的的波長長的出射光（通常波長在可見光波段）；而且一旦停止入射光，發光現象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為螢光。　知道了什麼是螢光，顧名思義就能想到什麼是螢光技術。螢光技術是某些物質受一定波長的光激發後，在極短時間內（10-8秒）會發射出波長大於激發波長的光，這種光稱為螢光。這一發光現象在各方面的套用及有關的方法稱為螢光技術（fluorescent technique）。
物質經過紫外線照射後發出螢光的現象可分為兩種情況，第一種是自發螢光，如葉綠素、血紅素等經紫外線照射後，能發出紅色的螢光，稱為自發螢光；第二種是誘發螢光，即物體經螢光染料染色後再通過紫外線照射發出螢光，稱為誘發螢光。　
螢光技術在生物化學及分子生物學研究中套用主要包括以下幾個方面：　
1、物質的定性：不同的螢光物質有不同的激發光譜和發射光譜，因此可用螢光進行物質的鑑別。與吸收光譜法相比，螢光法具有更高的選擇性。　
2、定量測定：利用在較低濃度下螢光強度與樣品濃度成正比這一關係可以定量分析樣品中螢光組分的含量，常用於測定胺基酸、蛋白質、核酸的含量。螢光定量測定的一個優點是靈敏度高，例如維生素B2的測定限量可達1毫微克/毫升，這一優點使測定時所需要樣品量大大減少。　這種定量測定方法還可套用於酶催化的反應，只要反應前後有螢光強度的變化，就可用來測定酶的含量及酶反應的速率等。　
3、研究生物大分子的物理化學特性及其分子的結構和構象：螢光的激發光譜、發射光譜、量子產率和螢光壽命等參數不僅和分子內螢光發色基團的本身結構有關，而且還強烈地依賴於發色團周圍的環境，即對周圍環境十分敏感。利用此特點可通過測定上述有關螢光參數的變化來研究螢光發色團所在部位的微環境的特徵及其變化。在此研究中，除了利用生物大分子本身具有的螢光發色團（如色氨酸、酪氨酸、鳥苷酸等，此類螢光稱為內源螢光）以外，可將一些特殊的螢光染料分子共價地結合或吸附在生物大分子的某一部位，通過測定該染料分子的螢光特性變化來研究生物大分子，這種染料分子被稱為“螢光探針”，它們發出的螢光一般稱為外源螢光。螢光探針的套用，大大地開拓了螢光技術在分子生物學中的套用範圍。　　
4、利用螢光壽命、量子產率等參數可以研究生物大分子中的能量轉移現象：通過該現象的研究，可以獲得生物大分子內部的許多信息。
以往人們常用螢光偏振做指標來研究生物大分子動力學。人們趨於用螢光偏振隨時間的衰減來研究這些問題。在這種方法中，激發光不是一連續的面偏振光，而是一偏振的光脈衝，因此測得的F∥和F是在兩個不同方向上偏振的螢光隨時間的衰減，它既和螢光壽命τ有關，又與分子在溶液中的運動有關，因此常表示為F∥（t）和F⊥（t）。由它們可得一相當重要的物理量——各向異性參數A（t）。由A（t）可推測生物大分子的形狀、分子轉動弛豫時間（即從一個定向的狀態到一個無定向狀態所要的時間），進而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉動角度和時間之間的函式關係。由這些結果可以研究分子之間的相互作用、分子間結合的緊密程度、蛋白質、核酸分子的解聚程度等等。　
另外，螢光技術在免疫學中亦有廣泛的套用。最重要的就是螢光抗體法。將某些螢光染料與血清抗體相結合，這種標記的抗體仍可專一地與相應抗原發生結合，形成的複合體具有螢光特性，從而可以確定抗原或抗體的存在及其含量。　
利用螢光技術設計的紫外分析儀主要是物質的定性方面的套用，包括：
⑴在科學實驗工作中檢測，許多主要物質如蛋白質、核苷酸等。
⑵在藥物生產和研究中，可用來檢查激素生物鹼，維生素等各種能；產生螢光藥品質量，特別適宜作薄層分析和紙層分析斑點和檢測。
⑶在染料塗料橡膠、石油等化學行業中，測定各種螢光材料，螢光指示劑及添加劑，鑑別不同種類的原油和橡膠製品。
⑷紡織化學纖維中可測定不同種類的原材料。如羊毛，真絲人造纖維，棉花，合成纖維，並可檢查成品質量。
⑸在糧油，蔬菜，食品部門，可用於檢查毒素(如黃麴黴素等)，食品添加劑，變質的蔬菜、水果、可可豆、朱古力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的質量。
⑹在地質、考古等部門，可起到發現各種礦物質，判別文物化石的真偽。
⑺在公安部門可檢查指紋、測定密寫字跡等。

型號項目	ZW-3型	ZW-7型（暗箱式）
紫外線波長	254nm、365nm
色片	200×50（mm）
功率	25W

紫外分析儀

基本介紹