基本介紹
- 中文名：索氏抽提法
- 外文名：Soxhlet extractor method
- 用途：粗脂肪含量的測定
- 材料：油料作物種子、中速濾紙等
- 方法：如抽提法、酸水解法等
- 試劑：無水乙醚或低沸點石油醚
實驗總結,實驗原理,實驗材料,儀器裝置,試劑,實驗步驟,計算結果,注意事項,細節解析,基本附註,
實驗總結
實驗原理
採用索氏抽提法中的殘餘法，即用低沸點有機溶劑（乙醚或石油醚）回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘渣重量之差，計算粗脂肪含量。由於有機溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質，因而抽提法測定的結果只能是粗脂肪。
實驗準備
實驗材料
油料作物種子、中速濾紙
儀器裝置
（1）索氏脂肪抽提器（圖1）或YG-Ⅱ型油分測定器
（2）乾燥器(直徑15～18cm，盛變色矽膠)
（3）不鏽鋼鑷子（長20cm）
（4）培養皿
（5）分析天平（感量0.001g）
（6）稱量瓶
（7）恆溫水浴
（8）烘箱
（9）樣品篩（60目）
試劑
無水乙醚或低沸點石油醚（A.R.）
實驗步驟
切片
將濾紙切成8cm×8cm，疊成一邊不封口的紙包，用硬鉛筆編寫順序號，按順序排列在培養皿中。將盛有濾紙包的培養皿移入105±2℃烘箱中乾燥2h，取出放入乾燥器中，冷卻至室溫。按順序將各濾紙包放人同一稱量瓶中稱重（記作a）、稱量時室內相對濕度必須低於70%。
包裝乾燥
在上述已稱重的濾紙包中裝入3g左右研細的樣品，封好包口，放入105±2℃的烘箱中乾燥3h，移至乾燥器中冷卻至室溫。按順序號依次放入稱量瓶中稱重（記作b）。
抽提
將裝有樣品的濾紙包用長鑷子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的1.67倍的無水乙醚，使樣品包完全浸沒在乙醚中。連線好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恆溫水浴中進行抽提，調節水溫在70～80℃之間，使冷凝下滴的乙醚成連珠狀（120～150滴/min或回流7次/h以上），抽提至抽取筒內的乙醚用濾紙點滴檢查無油跡為止（約需6～12h）。抽提完畢後，用長鑷子取出濾紙包，在通風處使乙醚揮發（抽提室溫以12～25℃為宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。
稱重
待乙醚揮發之後，將濾紙包置於105±2℃烘箱中乾燥2h，放入乾燥器冷卻至恆重為止（記作c）。
計算結果
粗脂肪含量（%）=（ b－c）/（b－a） ×100
式中：a：稱量瓶加濾紙包重（g）
b：稱量瓶加濾紙包和烘乾樣重（g）
c：稱量瓶加濾紙包和抽提後烘乾殘渣重（g）
注意事項
測定用樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都需要進行脫水處理。
試樣粗細度要適宜。
索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長，如能將?>樣品先回流1～2次，然後浸泡在溶劑中過夜，次日再繼續抽提，則可明顯縮短抽提時間。
YG-Ⅱ型油分測定器容量大，適合於樣品較多的選種鑑定工作使用，溫度控制在70℃左右，8h可提取完畢。
必須十分注意乙醚的安全使用。
乙醚中過氧化物的檢查方法是：取適量乙醚，加入碘化鉀溶液，用力搖動，放置1min，若出現黃色則表明存在過氧化物，應進行處理後方可使用。處理的方法是：將乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗滌2～3次，以除去乙醇；然後用鹽酸酸化，加入1/5乙醚量的FeSO4或Na2SO3溶液，振搖，靜置，分層後棄去下層水溶液，以除去過氧化物；最後用水洗至中性，用無水CaCl2或無水Na2SO4脫水，並進行重蒸餾。
細節解析
如何利用殘餘法測定油料作物種子中的粗脂肪含量？
測定過程中為什麼需要對樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都要進行脫水處理？
進行脫水處理的原因有三：第一，抽提體系中有水，會使樣品中的水溶性物質溶出，導致測定結果偏高；第二，抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚，可飽和約2%的水），從而影響抽提效率；第三，樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細胞組織內部，結果不易將脂肪抽提乾淨。
在實驗過程中安全使用乙醚應注意哪些問題？
抽提室內嚴禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過氧化物，保持抽提室內良好通風，以防燃爆。
測定樣品粒子粗細有什麼要求？
試樣粗細度要適宜。試樣粉末過粗，脂肪不易抽提乾淨；試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結果。
基本附註
測定用樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都需要進行脫水處理。
這是因為：第一，抽提體系中有水，會使樣品中的水溶性物質溶出，導致測定結果偏高；第二，抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚，可飽和約2%的水），從而影響抽提效率；第三，樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細胞組織內部，結果不易將脂肪抽提乾淨。
試樣粗細度要適宜。
試樣粉末過粗，脂肪不易抽提乾淨；試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結果。
索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長，如能將樣品先回流1～2次，然後浸泡在溶劑中過夜，次日再繼續抽提，則可明顯縮短抽提時間。
YG-Ⅱ型油分測定器容量大，適合於樣品較多的選種鑑定工作使用，溫度控制在70℃左右，8h可提取完畢。
必須十分注意乙醚的安全使用。
抽提室內嚴禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過氧化物，保持抽提室內良好通風，以防燃爆。乙醚中過氧化物的檢查方法是：取適量乙醚，加入碘化鉀溶液，用力搖動，放置1min，若出現黃色則表明存在過氧化物，應進行處理後方可使用。處理的方法是：將乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗滌2～3次，以除去乙醇；然後用鹽酸酸化，加入1/5乙醚量的FeSO4或Na2SO3溶液，振搖，靜置，分層後棄去下層水溶液，以除去過氧化物；最後用水洗至中性，用無水CaCl2或無水Na2SO4脫水，並進行重蒸餾。
