索森DNA吸印雜交技術根據毛細管作用的原理，使在電泳凝膠中分離的DNA片段轉移並結合在適當的濾膜上，然後通過同DNA或RNA探針的雜交作用，檢測這些被吸印的DNA片段。這種方法由索森(E.Southern)於1975年首先提出並設計，故叫索森吸印雜交技術。
基本介紹
- 中文名：索森DNA吸印技術
- 外文名：Soson DNA blotting technology
- 原理：根據毛細管作用的原理
- 方法：分離的DNA轉移結合在適當的濾膜
- 提出：索森(E.Southern)
- 年份：1975年
簡介,操作,套用,
簡介
索森DNA吸印雜交技術根據毛細管作用的原理，使在電泳凝膠中分離的DNA片段轉移並結合在適當的濾膜上，然後通過同DNA或RNA探針的雜交作用，檢測這些被吸印的DNA片段。這種方法由索森(E.Southern)於1975年首先提出並設計，故叫索森吸印雜交技術。
操作
套用硝酸纖維素濾膜進行索森吸印實驗，只要當該濾膜結合上兩種互補鏈之一，便能夠成功地發生核酸的雜交作用。瓊脂糖凝膠電泳分離的DNA片段，經過鹼變性作用之後，平鋪在已用電泳緩衝液飽和了的兩張濾膜上，在凝膠上部覆蓋一張硝酸纖維素濾膜，其上加一疊乾濾紙，最後再載入一重物。這樣由於乾濾紙的吸引作用，凝膠中的單鏈DNA便隨著電泳緩衝液一道轉移，而一旦同硝酸纖維素濾膜接觸，就會牢固地縛結在它上面。這些DNA片段(單鏈)系嚴格按照它們在凝膠中的譜帶模式原位吸印於濾膜上的，在80℃下烘烤2小時，DNA片段就會固定在硝酸纖維素濾膜上。然後，將此濾膜移放在加有放射性同位素標記探針的溶液中，進行核酸雜交。這些探針是同被吸印的單鏈核酸互補的RNA或DNA，一旦它們同硝酸纖維素濾膜上的單鏈互補DNA雜交後，就很難再解鏈。用漂洗法洗去沒有雜交的游離探針分子，用X光底片所得的放射自顯影圖片，同溴化乙錠染色的凝膠譜帶作對照，便可檢出同探針的核苷酸序列同源的限制片段。
套用
薩瑟恩吸引雜交方法幾乎可以同時構建出DNA分子的物理圖和遺傳圖，在分子生物學及基因克隆實驗中的套用極為普遍。
