色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水（23：77）為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按斑蝥素峰計算應不低於3000。
基本介紹
- 中文名：米斑蝥高效液相色譜儀含量測定方法
- 檢測波長：230nm
- 填充劑：十八烷基矽烷鍵合矽膠
- 流動相：甲醇-水（23：77）
- 頻率：40kHz
含量測定,炮製,製備,測定法,單泵配置,
含量測定
照高效液相色譜法（附錄 VI D）測定。
對照品溶液的製備 取斑蝥素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每1ml 含1mg 的溶液，即得。
供試品溶液的製備 取本品粗粉約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，用三氯甲烷作溶劑，超聲處理（功率400W，頻率40kHz）2次（每次30ml，15分鐘），濾過，用少量三氯甲烷分次洗滌容器，濾液和洗滌液一併回收至乾，殘渣用甲醇溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻,即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含斑蝥素(C10H12O4)不得少於0.35%。
炮製
生斑蝥 除去雜質。
南方大斑蝥 體型較大，頭足翅偶有殘留。頭部去除後的斷面不整齊，邊緣黑色，中心土黃色。有特殊的臭氣。
黃黑小斑蝥 體型較小。
[鑑別]、[含量測定]應符合藥材項下的規定。
米斑蝥 取淨斑蝥與米拌炒，至米呈黃棕色，取出，除去頭、翅、足。
每10kg斑蝥，用米2kg。
南方大斑蝥 體型較大，頭足翅偶有殘留。色烏黑髮亮，頭部去除後的斷面不整齊，邊緣黑色，中心灰黃色。質脆易碎，有米炒後的焦香氣。
黃黑小斑蝥 體型較小。
含量測定 斑蝥素 照上述[含量測定]項下的方法測定，含斑蝥素應為0.25%～0.65%。
總斑蝥素 照高效液相色譜法（附錄 VI D）測定。
對照品溶液的製備 取斑蝥素對照品適量，精密稱定，加少量甲醇超聲使溶解，再加甲醇至刻度，製成每1ml 含1mg 的溶液，即得。
製備
供試品溶液的製備
取本品粗粉約0.3g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加三氯甲烷10ml,再加鹽酸溶液（pH=1）10ml，超聲處理（功率400W，頻率40kHz）15分鐘，置分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷振搖提取5次（10ml,10ml,5ml,3ml,3ml），殘渣和容器用三氯甲烷洗滌5次，每次3ml，合併三氯甲烷液，抽濾，容器用三氯甲烷洗滌5次，每次3ml，濾液和洗液置同一蒸發皿中，揮乾，殘渣用甲醇適量溶解，轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
測定法
[鑑別]應符合藥材項下的規定。
單泵配置
賽爾泰Syltech500型高效液相色譜儀
賽爾泰Syltech500型高效液相色譜儀（單泵配置）
1 泵 P501型恆流高壓輸液泵
1.1 液體輸送原理： 雙柱塞串聯往複方式，自動脈衝抑制系統，另配有溶劑壓縮因子程式，能自動補償流量，液體輸送更精準
1.2 最大輸送壓力： 大於等於6000PSI（約42MPa以上）
1.3 流速精度： 0.1%
1.4 流速範圍： (0.001-10.000)mL/min最小增量0.001mL/min
1.5 柱塞桿清洗： 不需另配設備即可自動柱塞桿清洗，保護柱塞桿
1.6 安全性： 配有開機自檢，高低壓報警和保護功能
1.7 梯度系統：
1.7.1 混合範圍： 0到100%
1.7.2 混合原理： 高壓混合
1.7.3 混合液體數： 大於等於2元
1.7.4 脫氣裝置： 內外置脫氣均可
2 紫外檢測器 UV501型紫外可變波長檢測器
2.1 光源： 氘燈（鎢燈可選）
2.2 波長範圍： 190到720nm
2.3 波長準確度： <±1nm
2.4 波長重現性： <±0.5nm
2.5 頻寬： 小於5nm
2.6 噪音： <±2.5*10-5AU（特定條件下）
2.7 漂移： <±2.5*10-4AU（特定條件下）
2.8 流通池體積： 10ul
2.9 吸收量程： 0.01AU/V-10AU/V（共十檔）
2.10 功能： 具有定點波長測量，數據處理硬體嵌入檢測器，數位訊號直接採集處理功能
3 色譜柱： C18柱、配保護柱
4 柱溫箱： 室溫上10度到100度（0.1度增量）
5 工作站： 中文操作軟體，支持WIN9X/XP/2000/2003等作業系統，硬體嵌入檢測器，數位訊號直接採集處理
6 進樣器： 7725i手動進樣閥（帶遠程觸發開關），自帶20UL定量
