《穿孔素的粒酶B非依賴凋亡誘導活性及其機制的研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由王立鋒擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：穿孔素的粒酶B非依賴凋亡誘導活性及其機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王立鋒
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
穿孔素蛋白是抗腫瘤細胞免疫反應中重要的效應分子，但是對它的認識僅僅局限於在細胞膜表面聚合成孔上，而穿孔素在細胞毒作用中的具體功能以及與顆粒酶之間的協同作用機制仍不十分明確。本研究組在哺乳動物細胞中成功異位表達穿孔素的同時，發現穿孔素可以進入靶細胞內獨立引發細胞凋亡，本研究擬通過蛋白分子的亞細胞定位分析以及多種凋亡檢測手段對穿孔素蛋白殺傷靶細胞的機制進行進一步的研究。再運用細胞分泌殺傷模型和效靶細胞間免疫突觸介導的細胞殺傷模型，明確穿孔素分子在獨立發揮作用時，對靶細胞的殺傷活性和細胞毒效應。本項目的結果有望對穿孔素的新功能有更進一步的認識，並為其抗腫瘤套用奠定基礎。
結題摘要
全長和截短型穿孔素基因克隆自細胞因子IL-2刺激的Jurkat細胞，這兩種基因的異位表達都能夠引起細胞凋亡，但全長型穿孔素同時促進細胞壞死。細胞凋亡可能是穿孔素對亞細胞器（如線粒體）的破壞所導致，而且能夠被廣譜caspases抑制劑Z-VAD-FMK或者線粒體的膜電位的保護劑Bcl-XL BH44-23逆轉。異位表達的策略暗示了穿孔素潛在的凋亡誘導活性，而靶細胞的凋亡有助於機體的免疫監視和免疫防禦，也提示穿孔素可以作為潛在的藥物用於治療。本研究將為深入闡明穿孔素在免疫活性細胞殺傷靶細胞中的作用及其誘導細胞凋亡的機理提供實驗依據。
