福氏志賀菌sRNA識別及功能研究

《福氏志賀菌sRNA識別及功能研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由王立貴擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：福氏志賀菌sRNA識別及功能研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：王立貴
• 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院

中文摘要

目前的實驗與生物信息學研究表明，細菌基因組中存在著許多小的非編碼RNA(sRNA)，它們通過多種方式調控靶基因的表達，從而在細菌與環境的相互作用中發揮重要作用，因此，開展福氏志賀菌sRNA識別及功能研究可以發現與福氏志賀菌致病相關的調控sRNA,有助於深入了解福氏志賀菌的致病機理，同時細菌的毒力是細菌致病的關鍵，通過與志賀菌毒力相關mRNA與sRNA的相互作用研究，找出具有重要調控作用的sRNA，探討作為潛在的藥物靶標的可能性，從而避免志賀菌新的耐藥性的產生。因此，開展此項研究對充分了解細菌的毒力調控機制和抗細菌感染研究有著重要的意義。

結題摘要

small RNA（sRNA）是一類廣泛存在於細菌中的非編碼RNA，在細菌的基因表達調控中發揮著重要作用，然而福氏志賀菌中sRNA的毒力和致病等相關功能卻較少報導。在本次研究中，首先運用生物信息學方法預測福氏志賀菌sRNA，然後通過RT-PCR，northern blot, RACE等一系列實驗方法驗證sRNA的存在，經實驗驗證在福氏志賀菌2a 301中新發現4條sRNA。肺侵襲和豚鼠角膜等毒力實驗表明其中兩條sRNA（sRNA1 和sRNA54）與毒力相關，sRNA1 與福氏志賀菌的毒力升高有關，sRNA54與福氏志賀菌的毒力減弱有關。 　　 Hfq是細菌小RNA的分子伴侶蛋白，在細菌的毒力和耐受環境壓力發揮著重要作用。它的主要作用方式是通過形成六聚體與RNA作用來影響RNA的穩定性或者通過影響RNA與mRNA結合來調節靶基因的表達。本課題中我們研究Hfq在福氏志賀菌中的毒力和環境壓力的作用。結果表明Hfq在抵抗酸性、鹼性及滲透壓等環境壓力條件下發揮著重要作用，同時，HeLa細胞侵襲實驗及小鼠肺侵襲實驗均表明Hfq與福氏志賀菌的毒力有關。該研究首次表明Hfq在環境壓力中發揮的作用，以及通過體內和體外毒力實驗均證實了Hfq與毒力的相關性。