《神經膠質瘤相關miRNA的鑑定及功能分析》是依託浙江大學，由林標揚擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：神經膠質瘤相關miRNA的鑑定及功能分析
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：林標揚
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
神經膠質瘤是最常見的顱內惡性腫瘤，占顱腦腫瘤的40-50%，由於發生、發展機制不清，無較好的治療手段，病人的存活期（中值）一般為1年，五年存活期不到5%近幾年,發現 miRNA與癌症的發生、發展有著密切的關係，而且改變miRNA的表達能在體內抑制腫瘤的增長。因此，本課題組將進行以下研究：（1）利用第二代高通量測序技術(Illumina)比較腦膠質瘤和正常腦組織的miRNA表達譜差異，重點分析新的小RNA；（2）對上一步中找到和驗證過的在腦膠質瘤和正常腦組織有差異的小RNA miR127 和miR433,構建病毒載體，建立穩定高表達細胞系，在體外細胞和小鼠模型中確定其在神經膠質瘤中的作用。（3）研究小RNA miR127 和miR433的靶基因（如BCL6）在神經膠質瘤中的作用,從而發現miR127 和miR433在神經膠質瘤的作用機理。
結題摘要
MicroRNA (miRNA)是長度為20-25個核苷酸的小非編碼RNA,它們可以通過與靶基因3’UTR區的序列特異性結合轉錄後調控基因的表達。MiRNA參與多種病理生理過程,是調節細胞信號通路包括腫瘤細胞遷移和擴增的重要因子。神經膠質瘤是最常見的顱內腫瘤之一,雖然診斷和治療技術飛速發展,惡性神經膠質瘤的預後仍然很差,其中神經膠質母細胞瘤的平均生存期只有12-15個月。神經膠質母細胞瘤的發生和發展是一個多步驟的過程,期間受到很多因子的調控。最近幾年miRNA在神經膠質母細胞瘤的發生髮展中的潛在作用被深入的研究。 我們通過第二代高通量測序以及螢光定量PCR發現與正常腦組織相比miR-127-3p在神經膠質母細胞瘤組織中表達量下調。進一步研究顯示DNA的甲基化和組蛋白去乙醯基化造成了miR-127-3p表達量的下調。我們通過體內外實驗證實了miR-127-3p通過誘導G1期阻滯抑制了神經膠質母細胞瘤細胞的生長。另外我們證實了miR-127-3p的五個靶基因SKI,RGMA,ZWINT,SERPINB9和SFRP1,最後我們發現miR-127-3p通過抑制腫瘤抑制因子SKI激活起到腫瘤抑制作用的TGF-β信號通路抑制神經膠質母細胞瘤細胞的增殖。據我們所知,SKI在神經膠質瘤中的作用還沒有被報導過,我們的研究首次提出了SKI在神經膠質母細胞瘤中發揮作用的證據。 我們發現在幾個人類神經膠質母細胞瘤細胞系miR-127-3p的表達量與細胞的遷移和侵襲能力正相關。經體外細胞系和裸鼠體內實驗均證實miR-127-3p促進神經膠質母細胞瘤細胞的遷移和侵襲。證實了已被報導抑制神經膠質母細胞瘤遷移和侵襲的腫瘤抑制因子SEPT7是miR-127-3p的靶基因,並且SEPT7能夠部分抵消miR-127-3p對細胞遷移和侵襲的作用。另根據晶片數據顯示miR-127-3p能夠調控更多與細胞遷移和侵襲相關的基因。進而我們證實了在神經膠質母細胞瘤細胞miR-127-3p通過調節SEPT7影響actin細胞骨架的重塑。 我們的研究表明，miR-127-3p在神經膠質母細胞瘤中是一個關鍵的因子，也是一個潛在的神經膠質母細胞瘤治療靶點。
