《神經母細胞瘤中ALK基因異常的分子機制及其作用》是依託四川大學，由馬志貴擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：神經母細胞瘤中ALK基因異常的分子機制及其作用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：馬志貴
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
神經母細胞瘤（NB）是嬰幼兒期常見的實體腫瘤，臨床上疾病進展快，治療效果差，預後多不佳，其分子發病機制尚未完全闡明。在NB中，常有 ALK基因的異常表達和N-MYC基因的擴增。我們採用免疫組化的方法對85例NB患者標本進行分析，發現32（38%）例有ALK蛋白的異常表達。本研究進一步採用FISH和DNA測序方法對ALK和N-MYC基因擴增和ALK基因融合及其點突變進行分析，同時用免疫組化的方法對ALK蛋白激酶的配體PTN和MK表達水平進行研究，試圖在分子水平闡明ALK基因異常表達的機制，同時在體外細胞水平進一步深入研究ALK基因異常和NB發病之間的關係，以及它和N-MYC基因擴增在NB發生髮展中的相互作用。最終目的是要證明，不同因素引起的ALK 蛋白激酶異常表達是否是NB發病的原因，其意義在於為將來ALK激酶的靶向藥物-ALK蛋白激酶抑制劑，在NB中的臨床套用提供分子生物學的機理。
結題摘要
神經母細胞瘤（NB）是兒童最為常見的顱外實體腫瘤之一，通常在嬰兒期發病。診斷時多數屬高危患者患者，對化療耐受，死亡率高。ALK基因是近幾年發現與NB發病相關的重要基因。本研究對84例NB患者ALK基因異常的分子機制進行了深入的探討，同時對ALK基因活化與N-myc基因擴增和Akt/mTOR通路活化的關係進行了相關性分析。我們採用了直接DNA -PCR擴增和測序檢測了ALK激酶區域點突變，採用了FISH方法檢測ALK和N-myc基因擴增，同時採用了免疫組化方法檢測了ALK，磷酸化ALK，磷酸化mTOR，磷酸化4E-BP1以及磷酸化 p70S6K的表達。我們的研究結果提示ALK基因點突變導致ALK和磷酸化ALK蛋白的高表達，並激活下游的Akt/mTOR信號通路。在１５例同時有ALK 和N-myc基因擴增的患者，他們預後很差，提示ALK和N-myc基因之間可能有協同作用。生存期分析發現高表達的ALK，磷酸化ALK，磷酸化，磷酸化Akt， p70S6K蛋白，以及N-myc基因的擴增具有預後意義，其中磷酸化ALK，磷酸化Akt和N-myc基因擴增具有獨立的預後意義。我們的結果發現ALK和磷酸化ALK蛋白的高表達是ＮＢ中新的預後因素。免疫組化方法檢測ALK蛋白異常有助於評價ＮＢ的預後，ALK激酶抑制劑能夠成為ＮＢ的有效治療手段。目前此研究已經圓滿完成，研究結果已經多次在學術會議中交流，已經發表SCI 論文篇。
