磷酸鈣沉澱

磷酸鈣沉澱因為試劑易取得、價格便宜而被廣泛用於瞬時轉染和穩定轉染的研究。它是先將DNA和CaCl2混合,然後加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸鈣沉澱,最後把含有沉澱的混懸液加到培養的細胞上,通過細胞胞膜的內吞作用攝入DNA。磷酸鈣似乎還通過抑制血清中和細胞內的核酸酶活性而保護外源DNA免受降解。

核酸以磷酸鈣-DNA共沉澱物的形成出現時,可使DNA黏附在細胞表面,利於細胞吞入攝取,或通過細胞膜脂相收縮時裂開的空隙進入細胞內,進入細胞的DNA僅有1%-5%可以進入細胞核中,其中僅有不到1%的DNA可以與細胞DNA整合,在細胞中進行穩定表達,基因轉導的頻率大約為10,這項技術能用於任何DNA導入哺乳動物細胞進行暫時性表達或長期轉化的研究。

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