《磷酸酶通過Mps1對SAC及卵子發生的調控研究》是依託同濟大學，由楊曉梅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：磷酸酶通過Mps1對SAC及卵子發生的調控研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊曉梅
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
Mps1是調節有絲分裂和減數分裂紡錘體組裝檢驗點(SAC)的重要激酶，功能與其磷酸化狀態有關。申請人在前期工作中鑑定了兩種Mps1特異性磷酸酶，PPM1A和PPM1B，發現二者可使Mps1自身磷酸化及募集底物必需的S821位點去磷酸化。為了驗證PPM1A和PPM1B是否通過對Mps1的去磷酸化作用對其功能進行調控，本項目擬在原有基礎上分別在體外、細胞和個體水平上開展PPM1A/1B對Mps1相關功能調控的機制研究：體外將研究PPM1A/1B對Mps1的生化調控並探明二者的亞細胞定位及運動過程；在細胞水平上採取過表達及調低表達的方法，研究PPM1A/1B對有絲分裂SAC及其相關的細胞周期進程和染色體穩定性的影響及機制；分別製備PPM1A和PPM1B條件基因敲除小鼠，在個體水平上初步研究二者通過調控Mps1活性對減數分裂SAC以及卵子發生的影響。研究將為惡性腫瘤和生殖相關疾病防治提供理論參考。
結題摘要
Mps1是調節細胞分裂紡錘體組裝檢驗點(SAC)的重要激酶。在前期工作中鑑定了兩種Mps1特異性磷酸酶PPM1A和PPM1B。為驗證二者是否通過對Mps1的去磷酸化作用對其進行調控，本項目開展了PPM1A/1B和Mps1體外相互作用研究。在細胞水平採取調低磷酸酶表達的方法，研究了PPM1A/1B對Mps1在細胞中定位的影響。研究結果顯示，PPM1A和PPM1B可以在體內和體外分別與Mps1產生結合，從而初步證明PPM1A/1B是通過對Mps1的去磷酸化作用對其功能進行調控。細胞水平上研究顯示，在敲低表達PPM1A/1B的細胞中，Mps1在有絲分裂前期發生磷酸化結合到著絲粒並形成SAC以後，因為沒有受到PPM1A/1B的去磷酸化作用，在有絲分裂中期依然保持磷酸化狀態，因而在有絲分裂中期依然定位在著絲粒上。這一結果說明，PPM1A/1B具有通過控制Mps1的磷酸化狀態來達到控制有絲分裂SAC活性的作用。為了進一步驗證磷酸酶對Mps1功能的調節作用，還進行了相關基因敲除小鼠的製備。目前已經得到Mps1基因敲除小鼠，為後續的Mps1在不同組織中的功能研究，尤其為卵子發生的減數分裂細胞周期研究提供了重要的動物模型。
