《研究Netrin-1基因對骨髓幹細胞移植治療心肌梗死的改善作用》是依託南開大學，由張鈞擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：研究Netrin-1基因對骨髓幹細胞移植治療心肌梗死的改善作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張鈞
- 依託單位：南開大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
骨髓間充質幹細胞(MSCs)是修復損傷心肌的常用幹細胞，但其在缺血缺氧微環境下的低存活率已成為MSCs臨床套用的瓶頸。Netrin-1是一種神經介導蛋白，近年申請人研究其在心血管方面的重要作用, 發現Netrin-1可以促進心肌和內皮細胞NO的分泌,在體外心肌梗塞模型中保護心臟，而且還發現Netrin-1對MSCs的增殖和遷移有促進效果。本項目擬在前期研究的基礎上，使MSCs過表達Netrin-1基因，檢測Netrin-1的表達含量以及MSCs的增殖和遷移能力，評估Netrin-1對MSCs的影響。注射Netrin-1-MSCs到大鼠心肌梗塞部位，檢測MSCs的定位分布及體內分化情況。對過表達的Netrin-1對改善MSCs的存活率，提高其增殖量、NO分泌量、改善心肌壞死面積及心臟功能等方面進行研究。可為臨床套用MSCs治療缺血性心臟病提供依據。
結題摘要
骨髓間充質幹細胞（MSCs）是修復損傷心肌的理想幹細胞，但其在缺血缺氧微環境下的低存活率已成為MSCs臨床套用的瓶頸。Netrin-1是一種神經介導蛋白，近年來發現其在心血管方面的重要作用，Netrin-1可以促進心肌和內皮細胞一氧化氮（NO）的分泌，在心肌梗死中保護心臟，而且Netrin-1對MSCs的增殖和遷移有促進效果。本研究通過逆轉錄病毒轉導使MSCs過表達Netrin-1基因，在RNA和蛋白水平上檢測Netrin-1基因的表達，NO的分泌量以及Netrin-1-MSCs的增殖和遷移能力，評估Netrin-1對MSCs的影響。注射Netrin-1-MSCs到大鼠心肌梗死部位，完成心肌壞死面積，膠原含量及心臟功能等方面的研究。 用貼壁法得到較純的MSCs。Netrin-1基因轉導百分率，可達到60%以上。發現Netrin-1-MSCs的NO分泌水平較MSCs有顯著提高（P＜0.05），通過MTT實驗和損傷分析實驗，發現Netrin-1-MSCs的增殖速度和遷移能力與MSCs相比有明顯提高。大鼠心梗實驗發現Netrin-1-MSCs組較之鹽水組心肌損傷面積和膠原含量得到顯著改善，通過vWF和isolectin免疫染色，發現Netrin-1-MSCs組較之鹽水組血管再生的情況顯著改善，與MSCs組相比也有一定程度的改善，通過WGA免疫染色發現Netrin-1-MSCs組較之鹽水組和MSCs組心肌肥大的情況均得到顯著改善。 在心血管領域，首次引入Netrin-1基因，將其套用於心臟疾病的治療研究。本研究將轉基因技術與幹細胞技術相結合，利用骨髓幹細胞取材方便，又可以分化成心肌細胞幫助心肌修復的功能，同時結合Netrin-1可以促進細胞增殖遷移，減少細胞凋亡，釋放NO保護心肌等特點，為心肌梗死的治療開闢新途徑。相信隨著研究的深入，Netrin-1在心臟中的保護作用和相關調節將會逐漸變得清晰，為疾病臨床治療提供新的思路與希望。
