研究單分子蛋白質螢光問題的新方法

《研究單分子蛋白質螢光問題的新方法》是依託復旦大學,由譚硯文擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

  • 中文名:研究單分子蛋白質螢光問題的新方法
  • 依託單位:復旦大學
  • 項目類別:青年科學基金項目
  • 項目負責人:譚硯文
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

生物單分子螢光探測為一個新興且具有發展潛力的研究領域。然而傳統上製備蛋白質單分子觀測樣品的方法大幅限制了此種手段在工業化和自動化方面的發展。本項目將探索在不干擾蛋白質原生結構和功能的前提下,將單個蛋白分子固定牽製成為一組納米尺度陣列的方法。此方法能夠奠定蛋白質單分子實驗全自動化的基礎。更進一步,利用表面電漿螢光增強的原理,配合著已經成熟的納米製程技術,可以將特定形狀的納米金屬結構以及待測蛋白分子置於最優螢光增強的位點。這種技術可以大幅提升單分子螢光實驗的訊號強度,從而突破目前單分子實驗的時間解析度。在此實驗基礎上,我們可以探索結合生物分子與表面電漿光子學的套用潛力。

結題摘要

單分子研究手段可以幫助我們得到原本湮沒在多體信號系綜平均的動態過程中變化等細節。但是單分子實驗有一個明顯的弊端,即單個分子螢光信號較弱,難以檢測。在本項研究中,我們採用納米金屬天線受激後的表面等離激元共振產生局域場增強效應,進一步增強目標分子的螢光信號。項目內容包含金納米結構陣列的製作過程、目標螢光蛋白分子與金表面的連線策略、通過全內反射螢光顯微鏡技術觀測螢光增強效應等。截至目前,我們已經探究得到了有效可用的螢光蛋白分子改造方法及連線條件;利用多分子聚合物或單層石墨烯禁止非特異性螢光信號的方法;利用納米金結構陣列;以及特殊設計過的螢光蛋白分子IPF1.4,我們,通過全內反射螢光顯微鏡觀測到了6 ~7倍螢光信號增強效應。

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