基於單分子定位的超分辨螢光壽命成像研究

基於單分子定位的超分辨螢光壽命成像研究

《基於單分子定位的超分辨螢光壽命成像研究》是依託深圳大學,由屈軍樂擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

  • 中文名:基於單分子定位的超分辨螢光壽命成像研究
  • 項目類別:面上項目
  • 項目負責人:屈軍樂
  • 依託單位:深圳大學
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

基於螢光壽命成像(FLIM)的螢光共振能量轉移技術是研究蛋白質分子之間相互作用的重要工具,但螢光壽命成像技術的空間解析度受衍射極限的限制,無法精確測量蛋白質分子的螢光壽命,也不能在分子尺度獲取蛋白質分子之間相互作用的信息。本項目在已有螢光壽命成像和超分辨成像研究工作的基礎上,提出並發展一種可以突破光學衍射極限限制的螢光壽命成像新技術。在開關分子激活特性研究的基礎上,利用全場照明的方法,對樣品中的開光分子進行稀疏激活;利用脈衝光對樣品進行掃描激發成像。將單分子定位與時間相關單光子計數(TCSPC)探測相結合,利用隨機光學重建顯微技術獲取各個螢光分子的納米定位信息,採用TCSPC-FLIM,獲取各個激活分子螢光發射的衰減特性。將納米定位信息與TCSPC-FLIM結合,實現超分辨螢光壽命成像。利用超分辨螢光壽命成像技術,有望在活細胞研究中發現新現象和揭示新機制,將有力推動我國在生命科學領域的發展

結題摘要

隨著生命科學和生物醫學研究的發展,對螢光顯微成像技術也提出了越來越高的要求,雷射技術、螢光探針標記技術、新型螢光探測技術和成像手段的不斷完善,極大地促進了螢光顯微成像技術的發展,成為推動生命科學研究的重要動力。本項目在已有螢光壽命成像以及超分辨成像研究工作的基礎上,提出並發展了一種可以突破光學衍射極限限制的螢光壽命成像新技術。在開關分子激活特性研究的基礎上,利用全場照明的方法,對樣品中的開光分子進行稀疏激活;利用脈衝光對樣品進行掃描激發成像。將單分子定位與時間相關單光子計數探測相結合,利用隨機光學重建顯微(STORM)技術獲取樣品的超分辨圖像,得到各個螢光分子的納米定位信息。採用TCSPC-FLIM,獲取各個激活分子的螢光發射的衰減特性。將納米定位和TCSPC-FLIM 結合,實現超分辨螢光壽命成像,並開展了生物醫學套用研究,均取得了很好的結果,研究成果發表在高水平專業雜誌上。

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