《瞬時受體電位M8在前列腺癌骨轉移中作用及其機制的研究》是依託武漢大學，由楊中華擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：瞬時受體電位M8在前列腺癌骨轉移中作用及其機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊中華
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
約80%前列腺癌患者最終會出現骨轉移並死於骨相關事件。目前治療骨轉移藥物大多因作用機制缺乏特異性可引起嚴重的副作用，探索新的靶向治療方法已成當務之急。瞬時受體電位M8（TRPM8）是新近發現的前列腺特異性鈣通道，申請人前期研究表明TRPM8通過調節細胞內Ca2+穩態而調控前列腺癌細胞增殖及遷移，可作為腫瘤治療的新靶點。最新的研究表明TRPM8及其激動劑PSA參與前列腺癌骨轉移調控，我們推測其與PSA激活TRPM8相關。本課題擬在前期基礎上，採用基因調控及使用TRPM8通道激動劑和（或）阻斷劑的方法，結合荷瘤裸鼠動物模型，揭示TRPM8對前列腺癌細胞與骨微環境相互作用的影響及TRPM8在成骨/破骨細胞定向趨化前列腺癌細胞中的作用。通過體內、體外實驗相結合，探討通過TRPM8這一靶點干預前列腺癌與骨微環境之間惡性循環，從而抑制前列腺癌骨轉移的可能性，為前列腺癌的基因靶向治療奠定理論基礎。
結題摘要
約80%前列腺癌患者最終會出現骨轉移並死於骨相關事件，目前治療骨轉移藥物大多因作用機制缺乏特異性可引起嚴重的副作用。瞬時受體電位M8（TRPM8）是新近發現的前列腺特異性鈣通道，申請人前期研究表明TRPM8 通過調節細胞內Ca2+穩態而調控前列腺癌細胞增殖及遷移，可作為腫瘤治療的新靶點。研究內容包括：RT-PCR，Western blot檢測trpm8在MC3T3-E1及Raw264.7細胞中的表達、電生理證實小鼠MC3T3-E1及Raw264.7細胞中Trpm8通道活性、 完成小鼠trpm8基因干擾慢病毒載體vshRNA構建及鑑定、trpm8在成骨細胞誘導前列腺癌細胞遷移中的作用研究、前列腺癌細胞中trpm8表達水平對MC-3T3-E1(成骨細胞)成熟及礦化的影響。結果：(1) 成功構建了LNCaP-shTRPM8、DU145-shTRPM8及PC3-TRPM8穩轉細胞株，並通過Western blot檢測LNCaP、LNCaP-shTRPM8、LNCaP-vector，以及PC3、PC3-vector、PC3-TRPM8中遷移通路相關蛋白的變化水平。(2) 外源性表達trpm8可增強PC-3細胞誘導MC-3T3-E1(成骨細胞)成熟及礦化。(3) 通過MC-3T3-E1(成骨細胞)分別與LNCaP、LNCaP-shTRPM8、 PC3及PC3-TRPM8共培養，結果發現成骨細胞對TRPM8表達水平高的LNCaP及PC3-TRPM8細胞，相對於LNCaP-shTRPM8 及PC3，具有更強的趨化作用。科學意義：前列腺癌骨轉移是前列腺癌-骨微環境之間相互作用的結果，尋找在前列腺癌細胞及骨微環境中特異性表達並發揮重要作用的靶點是干預前列腺癌-微環境間“惡性循環”，抑制骨轉移的理想治療方法。trpm8表達於前列腺癌細胞及成骨、破骨細胞，促進前列腺癌細胞增殖和遷移、增強成骨和破骨細胞趨化前列腺癌細胞，並促進成骨細胞分化成熟，因而是靶向干預前列腺癌骨轉移的理想靶點。本研究揭示了TRPM8通道在前列腺癌骨轉移中的作用，為靶向干預前列腺癌骨轉移提供了理論基礎。
