《瘢痕疙瘩中TIEG1對Smad7轉錄調控的研究》是依託中山大學，由唐冰擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：瘢痕疙瘩中TIEG1對Smad7轉錄調控的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：唐冰
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
TGF-β1/Smads信號轉導通路的持續激活是瘢痕疙瘩形成的重要機制。目前研究發現這條通路最重要的負反饋調節信號分子Smad7表達明顯下調，但是，Smad7下調的機制尚不清楚。我們的研究發現：Smad7基因的啟動子上有明確的TIEG1 調控位點；轉錄抑制因子TIEG1在瘢痕疙瘩中表達明顯上調；治療瘢痕的有效藥物積雪草甙抑制了瘢痕疙瘩成纖維細胞TIEG1的上調。由此，我們首次提出了Smad7下調的新機制：瘢痕疙瘩發生時，TIEG1誘導表達並直接調控下調了Smad7，從而導致TGF-β1/Smads通路的持續激活。本項目擬進一步採用siRNA、腺病毒表達技術以及啟動子5'末端序列續減、啟動子定點突變和EMSA方法,旨在獲得TIEG1直接調控Smad7基因的可靠證據。本項目將闡明TIEG1對Smad7的調控作用和機制，為確立TIEG1作為瘢痕疙瘩治療的新靶點提供更充分的科學依據。
結題摘要
瘢痕疙瘩的發病機制目前仍不清楚。TGF-β1/Smads信號轉導通路的持續激活是瘢痕疙瘩形成的重要機制，而這條通路最重要的負反饋調節信號分子Smad7表達明顯下調。我們的研究證實了：1. 轉錄抑制因子TIEG1在瘢痕疙瘩中表達明顯上調，積雪草甙降低了TIEG1的表達，同時上調了Smad7的表達。2.體內、體外實驗證實TIEG1沉默可以下調Smad7的表達，抑制I、Ⅲ型膠原生成和成纖維細胞增殖。3. 5'末端序列續減方法構建Smad7啟動子質粒： -408/112bp，-283/112bp， -124/112bp，轉染到瘢痕疙瘩成纖維細胞，確定了Smad7啟動子的核心區域-124/112bp。4. 構建了突變型報導基因質粒pmt-Smad7-Luc（-124/112bp中的Sp1位點： GGCGG→TTCGG），確定這一突變消除Smad7啟動子在成纖維細胞的反應。目前實驗還在正進行，即用EMSA證實Smad7啟動子核心區的SP1 結合序列是否能夠與TIEG1結合。所以，我們的研究初步證實了瘢痕疙瘩中TIEG1直接調控Smad7基因表達。同時，我們也發現了瘢痕疙瘩中TIEG1的降解是由泛素系統決定的，而SIAH1蛋白在瘢痕疙瘩中表達減少。提示我們瘢痕疙瘩中TIEF1 的高表達，可能是由於SIAH1蛋白表達減少所導致的；完成瘢痕疙瘩，增生性瘢痕與正常皮膚的蛋白組學研究。發現：瘢痕疙瘩和增生性瘢痕表達相同的16種蛋白；只在瘢痕疙瘩中表達的有11種不同蛋白；只在增生性瘢痕中表達的有9種不同蛋白。
