瓊脂糖酶

β-瓊脂糖酶切割瓊脂糖亞單位或未置換的新瓊脂乙糖（3,6-酐-α-L-吡喃型半乳糖基-1-3-D-半乳糖）生成新瓊脂-寡糖（1）。β-瓊脂糖酶 I 消化瓊脂糖，形成不能再成膠的碳水化合物分子，同時釋放所俘獲的 DNA。通常殘留的碳水化合物分子或 β-瓊脂糖酶 I 不會影響隨後的限制性內切酶消化、連線反應及轉化反應等 DNA 操作。

基本介紹

• 中文名：瓊脂糖酶
• 套用：海藻單細胞的製備等
• 來源：重組E. coli 菌株
• 領域：生物學

類型

海洋及其他環境中可以分離出能夠降解瓊脂的瓊脂糖酶.按照作用方式的不同，可將瓊脂糖酶分為α-瓊脂糖酶和β-瓊脂糖酶兩種類型。不同的瓊脂糖酶具有不同的生物學特性。瓊脂糖酶在海藻單細胞的製備、海藻原生質體的製備、瓊脂寡糖的製備、?>海藻多糖結構的研究及分子生物學研究方面具有重要的套用價值。

來源

重組E. coli 菌株，此菌株的質粒上攜帶有β-瓊脂糖酶I的基因編碼。

反應條件

1X β-瓊脂糖酶I反應緩衝液

[10 mM Bis Tris-HCl (pH 6.5), 1 mM Na2EDTA]。42°C溫育。

使用注意

瓊脂糖：由於在反應溫度42°C條件下，溶液必需要呈液態，所以僅低熔點瓊脂糖適合於用β-瓊脂糖酶I消化。

pH值的敏感性：β-瓊脂糖酶I在pH 6.5時有最適酶活力，在pH 5.0-8.5範圍內可以保持>75%的酶活力。

對鹽的敏感性：NaCl或Na2EDTA濃度在50到500 mM之間不影響β-瓊脂糖酶I活性。