現代生物技術前沿：基因免疫的原理和方法》共分十四章，系統介紹基因免疫的基本原理、研究方法和套用現狀。
基本介紹
- 書名：現代生物技術前沿：基因免疫的原理和方法
- 頁數：225頁
- 出版社：科學出版社
- 出版時間：2004年1月1日
基本信息,內容簡介,目錄,序言,
基本信息
出版社: 科學出版社; 第1版 (2004年1月1日)平裝: 225頁
正文語種: 簡體中文
開本: 16
ISBN: 7030125886, 9787030125880
條形碼: 9787030125880
商品尺寸: 25.6 x 18.6 x 1 cm
商品重量: 381 g
ASIN: B00116NCDY
內容簡介
《主要有以下方面的內容：基因疫苗工作原理、基因疫苗抗原基因的篩選與克隆、基因疫苗的構建、基因疫苗製備、基因疫苗免疫方法、基因疫苗免疫效果檢測、影響基因疫苗免疫效果的因素、基因疫苗的安全性、細菌病基因疫苗、病毒病基因疫苗、寄生蟲病基因疫苗、腫瘤基因疫苗和控制動物生產性能的基因疫苗等。《現代生物技術前沿：基因免疫的原理和方法》反映了當前國際上基因免疫研究的前沿進展和我國學者的研究成就。
目錄
前言
1 概論
1.1 基因疫苗發展概況
1.2 基因疫苗的特點
1.2.1 抗原性強
1.2.2 保護時間長
1.2.3 改造方便
1.2.4 製備和儲運方便
2 基因疫苗工作原理
2.1 天然免疫機制
2.2 基因疫苗經肌肉組織免疫的抗原呈遞
2.3 基因疫苗經黏膜和皮膚組織免疫的抗原呈遞
2.3.1 直接免疫
2.3.2 用重組減毒胞內菌系統
2.3.2.1 胞內菌的胞內定位及其對基因疫苗的呈送
2.3.2.2 攜帶基因疫苗重組減毒沙門氏菌誘發機體免疫應答的機制
3 基因疫苗抗原基因的篩選與克隆
3.1 疾病有關基因疫苗的候選基因篩選
3.1.1 將亞單位疫苗的編碼基因作為候選基因
3.1.1.1 細菌病亞單位疫苗的編碼基因作為基因疫苗候選基因
3.1.1.2 病毒病亞單位疫苗編碼基因作為基因疫苗的候選基因
3.1.1.3 寄生蟲基因疫苗的候選基因
3.1.2 從病原體中篩選保護性抗原基因
3.1.2.1 表達文庫篩選候選基因
3.1.2.2 免疫篩選法
3.1.2.3 化學分解法
3.1.3 定位克隆
3.1.3.1 家系連鎖分析法
3.1.3.2 等位基因共享法
3.1.3.3 群體相關分析法
3.1.3.4 dDNA篩選
3.1.4 mRNA差異顯示技術篩選候選基因
3.1.4.1 酶降解減數cDNA文庫法
3.1.4.2 減數cDNA文庫篩選法
3.1.4.3 PCR放大差異法
3.1.4.4 差異反轉錄PCR法和差異消減顯示法
3.1.4.5 基因組錯配掃描法
3.1.4.6 限制性標記cDNA掃描
3.1.4.7 消減雜交
3.1.4.8 mRNA差異顯示技術改進
3.2 候選抗原基因克隆
3.2.1 克隆已知多肽的基因
3.2.1.1 多肽N端序列指導PCR引物合成法
3.2.1.2 特異性抗體篩選表達文庫法
3.2.1.3 人工合成候選基因
3.2.2 克隆已知序列基因家族新成員
3.2.2.1 同源探針篩選法
3.2.2.2 PCR放大建庫法
3.2.3 功能性篩選
3.2.4 常用的克隆載體
3.2.4.1 質粒特性
3.2.4.2 質粒載體必須具備的條件
3.2.4.3 常用的克隆質粒
4 基因疫苗的構建
4.1 構建基因疫苗的載體
4.1.1 真核表達載體的結構特點
4.1.1.1 增強子一啟動子元件
4.1.1.2 載體的選擇標記
4.1.1.3 哺乳動物細胞和大腸桿菌的複製起始點
4.1.1.4 轉錄終止信號和多聚腺苷酸化信號
4.1.2 影響外源基因表達的因素
4.1.3 常用於構建基因疫苗的載體
4.1.3.1 pcDNA3.1 /Zeo(+/-)
4.1.3.2 pBudCE4
4.1.3.3 pRc/CMV2
4.1.3.4 pRc/RSV
4.2 基因疫苗構建方法
4.2.1 抗原基因和載體的製備
4.2.2 抗原基因和載體的連線
4.2.2.1 連線方式
4.2.2.2 連線反應條件
4.2.3 重組質粒轉化受體菌
4.2.3.1 氯化鈣共沉澱法
4.2.3.2 電穿孔法
4.2.4 重組質粒的篩選與鑑定
4.2.4.1 插入片段長度鑑定
4.2.4.2 插入片段方向性鑑定
4.2.4.3 DNA序列測定
4.3 重組質粒在真核細胞中表達與檢測
4.3.1 重組質粒導入真核細胞的方法
4.3.1.1 脂質體介導的基因轉移
4.3.1.2 磷酸鈣共沉澱法
4.3.1.3 電穿孔法
4.3.2 抗原基因在真核細胞中表達的檢測
4.3.2.1 蛋白水平的檢測
4.3.2.2 核酸水平的檢測
5 基因疫苗製備
5.1 基因疫苗小量製備
5.1.1 受體菌篩選
5.1.2 培養條件最佳化
5.1.3 基因疫苗提取純化
5.2 基因疫苗中量製備
5.2.1 基因疫苗中量提取
5.2.2 基因疫苗中量純化
5.2.2.1 細菌的裂解和基因疫苗初步提取
5.2.2.2 質粒純化
5.2.2.3 重組質粒濃縮
5.2.3 基因疫苗質量監控
5.2.3.1 濃度測定
5.2.3.2 純度測定
5.2.3.3 分子質量鑑定
5.2.3.4 限制性內切核酸酶圖譜分析
5.2.3.5 內毒素
5.3 基因疫苗大量製備
5.3.1 中試規模
5.3.2 工程菌的發酵條件
5.3.2.1 發酵監測參數
5.3.2.2 發酵方式
5.3.2.3 基質濃度
5.3.2.4 溫度
5.3.2.5 pH
5.3.2.6 溶解氧濃度
5.3.2.7 二氧化碳
5.3.2.8 泡沫控制
5.3.3 基因疫苗大量純化工藝
5.3.3.1 細胞破碎
5.3.3.2 重組質粒粗提
5.3.3.3 粗提物純化
5.3.4 大量製備的質量控制
5.3.4.1 原料質量控制
5.3.4.2 培養過程質量控制
5.3.4.3 純化過程質量控制
5.3.4.4 成品質量控制
6 基因疫苗免疫方法
6.1 基因疫苗接種方法
6.1.1 肌肉注射法
6.1.1.1 肌肉組織預處理
6.1.1.2 肌肉注射操作實例
6.1.1.3 影響重組質粒進入肌細胞的因素
6.1.2 基因槍導入法
6.1.2.1 皮下基因免疫的組織學基礎
6.1.2.2 基因槍工作原理
6.1.2.3 重組質粒包被方法
6.1.3 黏膜表面塗布法
6.1.4 靜脈注射法
6.1.5 腹腔注射法
6.1.6 不同免疫途徑的免疫效果比較
6.2 免疫劑量和加強免疫
6.2.1 免疫劑量
6.2.2 加強免疫
7 基因疫苗免疫效果檢測
7.1 體液免疫檢測
7.1.1 酶聯免疫吸附試驗
7.1.1.1 夾心ELISA
7.1.1.2 競爭法測抗原或抗體
7.1.1.3 間接法測抗體
7.1.2 生物素一抗生物素蛋白系統
7.1.2.1 標記抗生物素蛋白一生物素檢測法
7.1.2.2 橋聯抗生物素蛋白一生物素檢測法
7.1.2.3 抗生物素蛋白一生物素化酶複合物檢測法
7.1.3 生物素一鏈霉抗生物素蛋白系統
……
8 影響基因疫苗免疫效果的因素
9 基因疫苗的安全性
10 細菌病基因疫苗
11 病毒病基因疫苗
12 寄生蟲基因疫苗
13 腫瘤基因疫苗
14 控制動物生產性能的基因疫苗
主要參考文獻
序言
基因免疫（gene immunization）是20世紀90年代初開始研究的免疫新技術。將抗原基因重組到真核表達載體上，經過一定的方法轉染到動物機體細胞內，表達的抗原經過抗原呈遞激活機體免疫系統，誘導產生特異性的體液免疫和（或）細胞免疫應答，這種新的免疫方法叫作基因免疫，又稱為核酸免疫或者.DNA免疫。這類新的重組質粒疫苗稱為基因疫苗（gene vaccine），是第三代疫苗。
