《特異溶瘤腺病毒干預NKG2D信號治療前列腺癌的實驗研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由胡澤斌擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：特異溶瘤腺病毒干預NKG2D信號治療前列腺癌的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：胡澤斌
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
轉移或激素非依賴型前列腺癌目前仍然缺乏有效治療手段。免疫治療可能是該類腫瘤晚期的最佳選擇之一。NK細胞作為天然免疫的重要效應細胞和CD4+細胞非依賴性CTLs誘導的中心環節，是腫瘤免疫治療的重要靶標。前列腺癌患者腫瘤細胞高表達的ADAM10/17可導致可溶性NKG2DL產生，而分泌的TGF-β則可下調NK細胞NKG2D受體，進而影響NKG2D信號和NK細胞的激活。本研究擬採用前列腺癌特異溶瘤腺病毒為載體，採用雙shRNA干涉腫瘤細胞ADAM10/17和TGF-β的表達，研究其體外特異性溶瘤功能，NK細胞、DC、T淋巴細胞的免疫激活作用及機制；建立完全免疫系統和NK細胞功能缺失的荷瘤小鼠模型，評價體內溶瘤、免疫激活、抗腫瘤效應及機制，明確NK細胞在NKG2DL介導抗腫瘤免疫中的作用；探討ADAM10/17干涉和TGF-β干涉的協同效應及機制。預期為前列腺癌免疫基因治療提供新的、更有效的策略。
結題摘要
轉移或激素非依賴型前列腺癌仍缺乏有效治療手段，近年來，腫瘤免疫基因治療的快速發展，為晚期腫瘤治療帶來了希望。NK細胞，不僅是天然免疫的重要效應細胞，也是CD4+T細胞非依賴型CTLs誘導的中心環節，因此，NK細胞是腫瘤免疫治療的重要靶標。研究表明，前列腺癌細胞高表達的ADAM10/17可導致可溶性NKG2DL產生；同時，前列腺癌細胞分泌的TGF-β則可下調NK細胞NKG2D受體，進而影響NKG2D信號和NK細胞的激活。本課題採用前列腺癌特異性溶瘤腺病毒為載體，通過干預ADAM10/17介導的NKG2D-NKG2DL信號和TGF-β信號，評價其對腫瘤生長和轉移的影響。取得的主要研究成果包括：（1）建立NK細胞體外培養體系和體外功能評價體系，並證實：增強NKG2D信號可促進小鼠NK細胞和T淋巴細胞對前列腺癌細胞的殺傷作用。（2）在多種腫瘤模型中證實，阻斷TGF-β信號可抑制腫瘤生長和轉移：①攜帶sTGFβRII的溶瘤腺病毒(rAd.sT)可有效殺傷多種腫瘤細胞（前列腺癌、乳腺癌等）並表達目的基因；②在免疫完全小鼠模型中，rAd.sT可有效抑制腎癌和乳腺癌的生長，抑制腫瘤骨轉移相關指標並激活機體抗腫瘤免疫反應。（3）成功製備可同時抑制NKG2D-NKG2DL信號和TGF-β信號的溶瘤腺病毒CRAD-sh-AT，並完成體外功能研究。（4）製備了lyp1修飾的肝臟低毒性溶瘤腺病毒，為腫瘤骨轉移治療提供了理想的載體系統。此外，我們還開展了聯合免疫治療，包括將rAd.sT與靶向Mesothelin的CART聯合套用，其在乳腺癌模型中，可增強對局部腫瘤的抑制效應，並減少肝轉移的發生。而在前列腺癌骨轉移的機制研究方面，我們證實SENP1可通過TGFβ信號通路影響前列腺癌細胞的EMT和轉移。綜上所述，本課題明確了NKG2D-NKG2DL信號在淋巴細胞激活中的作用，明確了抑制TGF-β信號可有效抑制多種腫瘤的生長和轉移；成功製備了ADAM10/17和TGF-β雙干涉的溶瘤腺病毒CRAD-sh-AT，為最終的療效評價打下基礎。此外，肝臟低毒性溶瘤腺病毒的成功製備，為腫瘤骨轉移提供了理想的載體系統；而前列腺癌骨轉移的機制研究，為前列腺癌骨轉移的治療提供了新的靶標。
