《特異溶瘤腺病毒對前列腺癌免疫治療的實驗研究與機制》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由胡澤斌擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：特異溶瘤腺病毒對前列腺癌免疫治療的實驗研究與機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：胡澤斌
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我國前列腺癌發病率逐年上升，目前，對於晚期、轉移及激素非依賴型患者仍缺乏有效手段。DC是啟動、調控和維持機體免疫應答的中心環節，近年來，以DC作為靶標的腫瘤免疫治療取得了令人鼓舞的結果。DC表面高表達CD40分子，腫瘤抗原與CD40L融合表達，能通過CD40L的靶向作用，將腫瘤抗原帶到DC表面，進而有效激活機體特異性抗腫瘤免疫反應。而GM-CSF對於促進DC的成熟分化具有重要作用。本研究將這種靶向免疫激活作用與溶瘤腺病毒相結合，製備攜帶GM-CSF和PSA-IZ-CD40L融合蛋白基因、且能在前列腺癌細胞中特異性複製的免疫溶瘤雙功能腺病毒。研究該免疫溶瘤雙功能腺病毒的體外溶瘤及免疫激活作用；建立人前列腺癌的裸鼠模型，評價體內溶瘤作用；建立鼠前列腺癌動物模型，製備攜帶鼠源性基因的免疫溶瘤雙功能腺病毒，評價體內抗腫瘤效應，探討其可能機制。從而為前列腺癌的治療提供一種更加有效的治療手段。
結題摘要
本研究將免疫治療的最新成果與溶瘤腺病毒有效結合，成功構建並製備了攜帶GM-CSF和PSA-IZ-CD40L融合蛋白基因（PL）、且能在前列腺癌細胞中特異性複製的免疫溶瘤雙功能腺病毒Ad-PL-GM-PPT-E1A，然後在體內外對其功能進行了評價，取得了以下結果：（1）體外溶瘤功能進行評價：Ad-PL-GM-PPT-E1A感染前列腺癌細胞後，可出現明顯的細胞完全病變；進一步的TCID50檢測表明，該病毒能夠在前列腺癌細胞中有效並特異地複製；結晶紫和MTT法檢測的結果表明，Ad-PL-GM-PPT-E1A能夠有效並特異殺傷前列腺癌細胞。（2）體外免疫激活效應：Ad-PL-GM-PPT-E1A感染前列腺癌細胞後獲得的上清或裂解液，不僅能夠激活人外周血單個核細胞的增殖和特異性殺傷效應，還能夠促進人外周血單個核細胞來源的DC細胞的成熟及細胞因子的分泌。（3）成功建立前列腺癌細胞PC3的移植瘤模型，評價體內溶瘤作用：TCID50檢測表明其能夠在移植瘤中有效複製，同時能夠有效抑制移植瘤的生長及轉移。（4）成功構建了攜帶鼠源性基因的重組質粒pUDK-PmL-IR-GM，評價體內免疫激活效應： pUDK-PmL-IR-GM能夠有效促進小鼠脾臟T淋巴細胞的增殖和特異性殺傷效應。綜上所述，我們成功研製了前列腺癌特異性免疫溶瘤雙功能腺病毒Ad-PL-GM-PPT-E1A，其能夠在體內外有效發揮特異性溶瘤和免疫效應，為進一步臨床前研究提供了實驗基礎和依據，希望最終為前列腺癌的治療提供一種更加有效的治療手段。本項目共發表學術論文六篇，待發表兩篇；申請國家發明專利兩項，其中授權一項（ZL2008101826884），公開一項（201010154620.2）；協助培養碩士研究生兩名，博士研究生兩名。
