《牛病毒性腹瀉/黏膜病反轉錄聚合酶鏈 反應操作規程(SN/T 1905-2007)》的附錄A為規範性附錄，附錄B為資料性附錄。本標準由國家認證認可監督管理委員會提出並歸口。本標準起草單位：中華人民共和國吉林出入境檢驗檢疫局、深圳市匹基生物工程股份有限公司。本標準主要起草人：王偉利、王振國、劉金華、孟日增、肖成蕊、石建平、牟峻、逄奎春、楊偉、賴少梅。本標準系首次發布的檢驗檢疫行業標準。
基本介紹
- 書名：牛病毒性腹瀉/黏膜病反轉錄聚合酶鏈 反應操作規程
- 作者：中華人民共和國 國家質量監督檢驗檢疫總局
- 出版日期：2007年9月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：155066218049
- 外文名：Protocol of Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction for Bovine Viral Diarrhea/mucosal Disease
- 出版社：中國標準出版社
- 頁數：6頁
- 開本：16
- 品牌：北京勁松建達科技圖書有限公司
內容簡介,文摘,
內容簡介
《牛病毒性腹瀉/黏膜病反轉錄聚合酶鏈 反應操作規程(SN/T 1905-2007)》由中國標準出版社出版。
文摘
著作權頁：
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1 範圍
本標準規定了牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒反轉錄聚合酶鏈式反應檢測方法。
本標準適用於牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒的檢測。
2 規範性引用檔案
下列檔案中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用檔案，其隨後所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用於本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協定的各方研究是否可使用這些檔案的最新版本。凡是不注日期的引用檔案，其最新版本適用於本標準。
GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法
3 原理
根據牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒基因組5’端非編碼區最保守的核苷酸序列，設計合成一對特異性引物，利用反轉錄聚合酶鏈式反應技術分別採用一步法和兩步法從各種樣品中擴增牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒的特異性片段，該片段既可用於病毒性腹瀉/黏膜病病毒基因分型又可以區別於其他瘟病毒屬成員。
4 設備和試劑
4.1 主要儀器和設備
4.1.1 PCR擴增儀。
4.1.2 低溫高速離心機、微量高速離心機。
4.1.3 電泳儀、電泳槽。
4.1.4 凝膠成像分析系統。
4.1.5 冰櫃。
4.1.6 超淨工作檯。
4.1.7 組織勻漿器。
4.1.8 二氧化碳培養箱。
4.2 試劑和耗材
4.2.1 水：所用水應符合GB/T 6682中三級水（三蒸水）的規格。用於PCR（尤其核酸提取）的水要用DEPC處理以除掉RNA酶，配製方法見第A.1章。
4.2.2 營養液：配製方法見第A.2章。
4.2.3 維持液：配製方法見第A.3章。
4.2.4 細胞分散液：配製方法見第A.4章。
