熱激活蛋白，蛋白質，P）的表達質粒pTAP503F進行了隨機誘變，用菌落原位顯色法從約5000個轉化子中篩選到4個耐熱性下降的突變型克隆，並對其中1個克隆（TAPM3）進行了部分酶學性質、DNA和胺基酸序列的研究。
熱激活蛋白
蛋白質
為了進一步揭示蛋白質的耐熱機制，對含有耐熱鹼性磷酸酯酶（FD-TAP）的表達質粒pTAP503F進行了隨機誘變，用菌落原位顯色法從約5000個轉化子中篩選到4個耐熱性下降的突變型克隆，並對其中1個克隆（TAPM3）進行了部分酶學性質、DNA和胺基酸序列的研究。酶學性質研究表明，與野生型相比，該突變型酶的耐熱性有較大幅度的下降，而熱激活性無明顯改變。DNA序列分析表明在1239位TAPM3發生GA轉換，導致427位的甘氨酸變為絲氨酸（G427S），這種突變對酶的耐熱性、米氏常數、活化能影響較為明顯。這說明只須1個胺基酸置換就會對蛋白質耐熱性變化起巨大作用，並且胺基酸殘基側鏈的大小、電荷等能使蛋白質結構鬆散的性質，會導致蛋白質耐熱性下降。
熱激活蛋白
為了進一步揭示蛋白質的耐熱機制，對含有耐熱鹼性磷酸酯酶（FD-TAP）的表達質粒pTAP503F進行了隨機誘變，用菌落原位顯色法從約5000個轉化子中篩選到4個耐熱性下降的突變型克隆，並對其中1個克隆（TAPM3）進行了部分酶學性質、DNA和胺基酸序列的研究。酶學性質研究表明，與野生型相比，該突變型酶的耐熱性有較大幅度的下降，而熱激活性無明顯改變。DNA序列分析表明在1239位TAPM3發生GA轉換，導致427位的甘氨酸變為絲氨酸（G427S），這種突變對酶的耐熱性、米氏常數、活化能影響較為明顯。這說明只須1個胺基酸置換就會對蛋白質耐熱性變化起巨大作用，並且胺基酸殘基側鏈的大小、電荷等能使蛋白質結構鬆散的性質，會導致蛋白質耐熱性下降。
熱激活蛋白