《熱應激對公兔精子生成的影響及分子機制》是依託中國農業大學,由吳英傑擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名:熱應激對公兔精子生成的影響及分子機制
- 依託單位:中國農業大學
- 項目負責人:吳英傑
- 項目類別:青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本項目重點研究熱應激對公兔精子發生的影響及其分子機制。首先,通過免疫組織化學方法檢測公兔睪丸和精子中各亞型熱休克蛋白(HSPs)的表達情況。其次,通過睪丸水浴的方法給予公兔一定熱應激,分別檢測精液品質、睪丸組織中各級生精細胞凋亡,以及睪丸中熱休克蛋白轉錄因子(HSFs)表達的變化。在此基礎上,利用螢光素酶報告基因和染色質免疫共沉澱(Chip)的方法研究HSFs對於睪丸特異性表達的HSPs基因的轉錄調節作用,同時通過GST融合蛋白和蛋白免疫共沉澱技術探討HSPs和精子生成相關周期蛋白或周期蛋白激酶之間的相互作用關係,以此來闡述熱應激對生精過程影響的分子機理。.本研究結果對認識熱應激調控精子生成機制以及減少熱應激在畜禽生產上的危害提供新的理論依據和實驗基礎。
結題摘要
本項目重點研究了熱應激對公兔精子發生的影響及其分子機制。首先通過免疫組織化學方法檢測了兔睪丸和精子中各亞型熱休克蛋白(HSPs)的表達情況,檢測了公兔熱應激後精液品質、睪丸組織中各級生精細胞凋亡,以及睪丸中HSPs和熱休克蛋白轉錄因子(HSFs)表達的變化。成功構建了兔HSF1基因的真核表達載體,並證明轉染了兔HSF1基因後,家兔細胞中HSP70和HSP90的蛋白表達水平明顯增加。蛋白質免疫共沉澱的結果顯示,HSP70與cyclinD1存在相互作用,提示一種可能的熱休克蛋白參與精子發生過程的機制。部分研究結果已經整理並發表了3篇SCI收錄論文,分別發表在《Cell and Tissue Research》,《Cell Stress and Chaperones》和《Livestock Science》雜誌上。