《滋養細胞通過分泌TSLP介導蛻膜γδT細胞免疫調節功能》是依託復旦大學，由金莉萍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：滋養細胞通過分泌TSLP介導蛻膜γδT細胞免疫調節功能
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：金莉萍
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們新近研究發現，人滋養細胞通過分泌TSLP調節蛻膜γδT細胞功能，那么受調控的γδT細胞在母-胎界面又發揮怎樣的免疫調節功能？本項目通過構建體外細胞共培養體系，分析滋養細胞分泌的TSLP對蛻膜γδT細胞凋亡、增殖、活化表型、趨化因子受體表達、殺傷抑制性受體表達、細胞因子分泌及細胞毒效應的調節作用及信號通路；探討被TSLP調控的γδT細胞能否誘導CD4+CD25-T 細胞向CD4+CD25+Foxp3+調節性T細胞分化，以期解析妊娠期調節性T細胞擴增的機制；藉助小鼠妊娠模型，通過早孕期過繼轉輸γδT細胞，觀察其在宿主鼠體內的歸巢，及對宿主鼠外周和母-胎界面局部細胞因子表達、免疫耐受狀態、免疫細胞比例變化的影響，以進一步驗證TSLP通過調節γδT細胞從而誘導母-胎免疫耐受的體內調節機制，為TSLP改善妊娠預後的臨床潛在套用提供科學依據，並對防治一系列妊娠併發症具有重要的理論意義及套用價值。
結題摘要
生理妊娠類似於同種異體移植，作為同種移植物的胚胎在母體記憶體活直至分娩，反映母體對胚胎的免疫耐受，母體對胚胎產生免疫排斥則導致妊娠失敗。胚胎來源的滋養細胞與母體來源的蛻膜基質細胞和免疫活性細胞是母胎界面主要功能細胞，這些細胞之間的協調對話可能在正常妊娠的建立和維持中發揮重要的作用。本研究通過建立人早孕蛻膜γδT細胞和滋養細胞共培養體系，以闡明蛻膜γδT細胞與滋養細胞之間的相互調節機制。結果表明：（1）正常早孕婦女外周血與蛻膜局部γδT細胞數量比正常未孕婦女及自然流產患者均明顯增多，並且蛻膜γδT細胞比例明顯高於外周血。蛻膜γδT細胞是CD4- 和CD8- 雙陰性細胞。γδT細胞高水平表達TGF-β和IL-10，低水平表達TNF-α和INF-γ，幾乎不表達IL-2和IL-4。這些結果提示，孕婦體內γδ T細胞數量增多，且蛻膜γδT細胞產生大量調節性細胞因子，在蛻膜局部形成Th2型優勢的免疫微環境，從而有利於母-胎耐受的形成。（2）蛻膜γδT細胞主要通過分泌IL-10促進滋養細胞增殖和侵襲，以及抑制滋養細胞凋亡。因此，γδT細胞可改善滋養細胞的生物學行為，有利於胎盤的形成。（3） 人早孕期，滋養細胞通過分泌CXCL16促進蛻膜γδT細胞增殖，並產生TGF-β和IL-10增多，形成一個利於妊娠的良性循環；滋養細胞通過分泌CXCL16下調蛻膜γδT細胞顆粒酶B的水平，降調節γδT細胞對胚胎組織的損傷作用，從而維持正常妊娠。（4）蛻膜T細胞表達TSLPR和IL7Rα。相比較CD4+ 和CD8+ T細胞，早孕期蛻膜γδT細胞較高表達TSLP受體。這些結果提示TSLP可能對蛻膜局部γδT 細胞發揮調節作用。（5）胚胎來源的滋養層細胞分泌TSLP，通過活化STAT3途徑而下調Caspase 3表達，進而抑制蛻膜γδT細胞凋亡。（6）TSLP誘導人滋養細胞侵襲。TSLP明顯下調滋養細胞中NME1的表達，State3途徑，而不是Stat5途徑，參與TSLP調控的NME1表達。TIMP1的表達明顯下降在knockdown of NME1細胞株。結果提示TSLP通過活化STAT3途徑而下調NME1表達，進而影響TIMP1的表達，從而促進滋養細胞侵襲。（7）TSLP通過STAT3途徑介導c-Myc表達上調，從而促進滋養細胞增殖。本項目為TSLP 改善妊娠預後的臨床潛在套用提供科學依據。
