《溶藻弧菌外膜耐藥功能蛋白組的研究》是依託中山大學，由李惠擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：溶藻弧菌外膜耐藥功能蛋白組的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李惠
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
抗生素濫用導致水產品藥物殘留等食品安全問題，直接或間接影響人類健康和生態環境。因此，積極開展水產動物病原菌耐藥分子機制的研究，對減少和避免抗生素的使用具有非常重要的意義。本課題擬以嚴重危害水產養殖動物的溶藻弧菌為研究對象，在前期對卡那黴素、紅黴素、四環素、萘啶酮酸、鏈黴素、氯黴素耐藥菌外膜差異蛋白質研究的基礎上，採用基於native-SDS/PAGE的蛋白質組學技術路線結合蛋白質-蛋白質相互作用技術方法，開展溶藻弧菌外膜耐藥功能蛋白質複合物組的研究,發現和鑑定相關耐藥功能蛋白質。進一步採用基因敲除和高表達方法對關鍵外膜耐藥蛋白複合物的耐藥功能進行功能研究。同時研究這些關鍵蛋白質複合物組對不同抗生素反應的規律，初步闡明外膜耐藥蛋白質複合物組的耐藥作用機制。在此基礎上，優選抗體作用靶點，探討抗體靶向配合低濃度抗生素抑制耐藥菌的可行性。
結題摘要
抗生素濫用導致水產品藥物殘留等食品安全問題，直接或間接影響人類健康和生態環境。因此，積極開展水產動物病原菌耐藥分子機制的研究，對減少和避免抗生素的使用具有非常重要的意義。項目以模式大腸桿菌和嚴重危害水產養殖動物的溶藻弧菌為研究對象，採用基於native-SDS/PAGE的蛋白質組學技術路線結合蛋白質-蛋白質相互作用技術方法，開展溶藻弧菌和大腸桿菌外膜耐藥功能蛋白質複合物組的研究。結果發現，溶藻弧菌巴洛沙星耐藥菌、四環素耐藥菌、鏈黴素耐藥菌、頭孢他啶耐藥菌、氯黴素耐藥菌發生變化的蛋白複合物依次有6、4、4、4、5種，主要與能量代謝相關的蛋白質複合物，其中溶藻弧菌Na+-NQR系統複合物極為重要。為確認這些發現，採用基因克隆、原核表達、重組蛋白純化和抗體製備，對這些差異蛋白及其複合物進行了驗證。進一步採用缺失菌株和高表達菌株對這些重要複合物進行功能研究，結果發現能量代謝相關複合物組功能下調，導致質子動力勢下降，使抗生素進入細胞減少。這一機制闡明對理解細菌耐藥特性與能量代謝代償的關係具有重要意義。項目發表論文9篇，其中SCI論文8篇，影響因子均大於3 (大約5的2篇); 部分內容獲省科技進步一等獎1項。
