基本介紹
- 中文名：清胃黃連蜜丸
- 製法：粉碎成細粉，過篩，混勻
- 性狀：棕褐色的大蜜丸；味微甜後苦
- 套用範圍：清胃黃連丸中鹽酸小檗鹼含量測定
藥品說明,實驗室分析,方法名稱：,套用範圍：,方法原理：,試劑：,儀器設備：,試樣製備：,操作步驟：,
藥品說明
【鑑別】 (1)取本品，置顯微鏡下觀察：薄壁組織灰棕色至黑棕色，細胞多皺縮，內含棕色核狀物。纖維束鮮黃色，周圍細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維，含晶細胞壁木化增厚。纖維束鮮黃色，壁稍厚，紋孔明顯。纖維淡黃色，梭形，壁厚，孔溝細。纖維束幾無色，周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維。內果皮纖維上下層縱橫交錯，纖維短梭形。草酸鈣針晶成束或散在，長26～110μm。種皮石細胞黃色或淡棕色，多破碎，完整者長多角形、長方形或形狀不規則，壁厚，有大的圓形紋孔，胞腔棕紅色。石細胞黃棕色或淡棕色，類長方形、類圓形或形狀不規則，直徑約至94μm。不規則片狀結晶無色，有平直紋理。
(2)取本品5g，剪碎，加甲醇50ml，浸泡過夜，研磨使溶散，超聲處理30分鐘，濾過，揮去甲醇，加水5ml，加到D<[101]>大孔吸附樹脂柱（內徑1.5cm，長20cm）上，用水100ml洗脫,棄去洗脫液，再用乙醇100ml洗脫，收集乙醇洗脫液，揮去乙醇，加甲醇2ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。另取梔子對照藥材1.2g，加甲醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液。再取梔子苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB)試驗，吸取上述三種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水（15:40:22:10）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5香草醛硫酸溶液（必要時加熱至斑點顯色清晰）。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本品5g，剪碎，置具塞錐形瓶中，加甲醇25ml，浸漬片刻，迅速搗碎，濾過，棄去濾液，藥渣再加甲醇25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮盡甲醇，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取供試品溶液3μl、對照品溶液4μl，分別點於同一以含4醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的矽膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1）為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本品9g，剪碎，加甲醇50ml，浸泡過夜，研磨使溶散，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮去甲醇,加水10ml使溶解，加到D<[101]>大孔吸附樹脂柱（內徑2.5cm，長28cm）上，用水洗脫至洗液無色，棄去水洗脫液，繼用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液的帶色部分80ml,加鹽酸8ml，加熱回流1小時，用40氫氧化鈉溶液調節PH至中性，濃縮至約10ml，加水10ml，用苯25ml振搖提取，分取苯層，蒸乾，殘渣加苯0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取菝葜皂苷元對照品，加苯製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯-丙酮（9:1）為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5香草醛硫酸溶液，於80℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
【檢查】 應符合丸劑項下有關的各項規定（附錄ⅠA）。
【含量測定】 取重量差異項下的本品，剪碎，取約0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加鹽酸-甲醇(1:100）的混合液25ml，稱定重量，浸漬過夜，振搖使溶散，超聲處理45分鐘。
實驗室分析
方法名稱：
清胃黃連丸（大蜜丸）－鹽酸小檗鹼的測定－薄層掃描法
套用範圍：
本方法採用薄層掃描法測定清胃黃連丸（大蜜丸）中鹽酸小檗鹼的含量。
本方法適用於清胃黃連丸（大蜜丸）中鹽酸小檗鹼含量的測定。
方法原理：
供試品置具塞錐形瓶中，加鹽酸－甲醇25mL，浸漬，振搖使溶散，超聲處理，放冷，用甲醇補足重量，搖勻，濾過，取續濾液製成供試液，點樣、展開，用薄層掃瞄器進行掃描，于波長λs=340nm測量鹽酸小檗鹼（C20H18ClNO4）吸收度積分值，計算其含量。
試劑：
1. 鹽酸
2 .甲醇
3 .醋酸乙酯
4 .異丙醇
5 .濃氨試液
6 .苯
儀器設備：
1 儀器
1.1 超聲提取器
1.2 薄層掃瞄器
1.3 塗布器 （應能使吸附劑在玻璃板上手工或自動塗成一層符合厚度要求的均勻薄層）
1.4 點樣器 （一般採用微升毛細管或與之相應的點樣器材）
1.5 展開室 （可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉）
2 材料
2.1 玻板 （用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規格，要求光滑、平整，洗淨後不附水珠，晾乾）
2.2吸附劑 （矽膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm）
試樣製備：
1. 對照品溶液的製備
精密稱取鹽酸小檗鹼對照品適量，加鹽酸－甲醇（1：100）的混合液製成每 1mL含0.06mg的溶液，作為對照品溶液。
2. 供試品溶液的製備
取供試品，剪碎，精密稱取約0.8g，置具塞錐形瓶中，精密加鹽酸－甲醇（1：100）的混合液25mL，稱定重量，浸漬過夜，振搖使溶散，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。
（註：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。）
操作步驟：
1 薄層板製備
將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡後，倒入塗布器中，在玻板上平穩地移動塗布器進行塗布（厚度為0.25～0.5mm）取下塗好薄層的玻板，於室溫下，置水平台上晾乾，在反射光及透射光下檢視，表面應均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，於110℃烘30分鐘，冷卻後立即使用或置乾燥箱中備用，或用商品預製板。
2. 點樣
精密吸取供試品溶液 4μL、對照品溶液 2μL與 4μL，分別交叉點於同一矽膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大於2mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
3. 展開
將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以苯－醋酸乙酯－甲醇－異丙醇－濃氨試液（12：6：3：3：1）為展開劑，另槽加入等體積的濃氨試液，預平衡數分鐘後，展開，取出，晾乾。
4. 含量測定
在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，採用吸收法，進行掃描，波長：λs=340nm， 測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。
用外標法測定時，若對照品各數據點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜採用二點法校正，必要時用多點法校正。
