基本介紹
- 中文學名：淡紫擬青黴
- 拉丁學名：Paecilomyces lilacinus(Thom.)Samson
- 界：真菌界
- 綱：半知菌綱
- 目：絲孢菌目
- 科：絲孢菌科
- 屬：擬青黴屬
- 種：淡紫擬青黴
基本信息,形態特徵,培養特性,培養條件,營養條件,控害效能,生理功效,淡紫擬青黴菌,生物防治,防治根結線蟲,寄生作用,寄生機制,有效成分,使用方法,
基本信息
該屬主要特徵是分生孢子梗呈瓶狀或近球形(瓶梗),在菌絲端或短枝上輪生,分生孢子單孢鏈狀,至今該屬報導有近50個種,皆為昆蟲病原菌和線蟲病原菌。此菌廣泛分布於世界各地，具有功效高、寄主廣、易培養等優點，特別在控制植物病原線蟲方面功效卓著。半個多世紀以來，國內外許多專家學者對此菌進行了廣泛而深入的研究，在生物學、生態學、大量培養、控害效能與田間套用等方面取得了一系列研究成果。
形態特徵
淡紫擬青黴在 28℃、黑 暗條件 下 ，PDA平板培養3d後長出白色菌落 ，產孢後逐漸變成淺粉紅色 ，培養 7d後 ，菌落呈紫紅色 、圓形 、隆起 、粉狀 ，表面沒有分泌物，產孢量越多，菌落顏色越深。淡紫擬青黴的分生孢子梗末端膨大。分生孢子為單細胞 ，橢圓形至紡錘形 ，呈鏈狀 、平滑 、無 色至黃色 ，2 μm～4μm 寬 ，孢梗上具有瓶頸狀不規則的分枝或輪生分枝 ，瓶梗基部較寬 。輪生分枝由圓柱形的部分組成 ，有 時分枝向遠離主軸 方向彎曲 。
培養特性
培養條件
溫度 、光照是影響其生長的最主要因素。Cab．anillasE、王 明祖、劉 杏忠 、李 芳 研究 了淡紫擬青黴的生長和產孢條件 ，結果表明：生長溫度範圍可 以從 8℃～38℃，生長和產孢的最適溫度範圍是25℃-30℃，10℃和 40℃時停止生長，35℃時停止產孢 。全黑暗條件有利生長和產孢 ，半光照次之 ，全光照最差 。周 靖研究結果表 明 ：以蔗糖為碳源 (60g/L)，硝酸銨為氮源(1.5g/L)。pH5～pH6，培養溫度為 30℃時最適合該菌的生長。
營養條件
淡紫擬青黴對營養條件要求不高，不僅能在多種常規培養基上生長，而且能在多種自然基質，如農副產品廢料、廢渣與植物葉片或植物浸提液中生長。王明祖等研究表明認為馬鈴薯、蛋白腖、蔗糖、硝酸鈣、磷酸氫二鈉組成的培養基和豬糞浸出液瓊脂培養基有利於該菌的營養生長。潘滄桑、鄧國平等利用糖廠、啤酒廠、木薯加工廢液進行淡紫擬青黴菌劑的生產研究，既可使廢料資源化，又可減少環境污染。儘管淡紫擬青黴能在多種培養基質上和多種生態條件下生長，但不同成份的培養基、培養條件，其產菌率與代謝物也有所不同。李芳研究了不同通氣量、不同培養基、不同基質濃度對淡紫擬青黴NH-PL-03菌株生長的影響，結果表明，碳氮源濃度為0.045g/ml，每瓶(250ml)裝液量為50ml時最適合淡紫擬青黴NH-PL-03菌株菌絲和孢子生長，而對線蟲的毒力的最佳裝液量為100ml；在孟加拉紅、PDA和察氏培養基上，菌絲量增長最為顯著，在察氏和燕麥培養基上產孢量最大，培養液濾液的毒力隨培養時間延長而升高，在察氏培養基培養毒力較高。梁照文研究了不同液體培養基對淡紫擬青黴繁殖和毒力的影響，篩選了一種高產孢量的培養基，主要成分為200g/L馬鈴薯、1%雞蛋黃、20g/L蔗糖。CayrolJC研究表明：利用麥芽培養基在靜止、透氣狀態下生產的菌液，殺線蟲活性最強，光照對菌液的毒性沒有影響。
控害效能
對植物病原線蟲
淡紫擬青黴是南方根結線蟲與白色胞囊線蟲卵的有效寄生菌，對南方根結線蟲的卵寄生率高達60%~70%。對多種線蟲都有防治效能，其寄主有根結線蟲、胞囊線蟲、金色線蟲、異皮線蟲、甚至人畜腸道蛔蟲，是防治根結線蟲最有前途的生防製劑。
淡紫擬青黴菌對根結線蟲的抑制機理是淡紫擬青黴與線蟲卵囊接觸後，在粘性基質中，生防菌菌絲包圍整個卵，菌絲末端變粗，由於外源性代謝物和真菌幾丁質酶的活動使卵殼表層破裂，隨後真菌侵入並取而代之。也能分泌毒素對線蟲起毒殺作用。
對昆蟲
據文獻資料，淡紫擬青黴可寄生半翅目的荔枝蝽蟓、稻黑蝽；同翅目的葉蟬、褐飛虱；等翅目的白蟻；鞘翅目的甘薯象鼻蟲以及鱗翅目的茶蠶、燈蛾等。
對植物病原菌
淡紫擬青黴36-1菌株對植物病原菌具有拮抗效能。在玉米小斑病、小麥赤霉病、黃瓜炭疽病菌、棉花枯萎病和水稻惡苗病上試驗，淡紫擬青黴菌株活菌體液對其菌絲生長抑制率分別為80.22%、80.50%、77.71%、75.30%和61.36%；處理柑桔果面，青、綠霉擴展抑制率為65.97%。批量處理柑桔，好果率為78.44%，比對照高54.44%。
生理功效
促進植物生長
在擬青黴的培養過程中，特別是在特殊培養基與深層發酵培養過程中，該菌能產生豐富的衍生物，其一是類似吲哚乙酸產物，它最顯著的生理功效是低濃度時促進植物根系與植株的生長，因此在植物根系施菌不僅能明顯抑制線蟲侵染，而且能促進植株營養器官的生長，同時對種子的萌發與生長也有促進作用。
產生多種功能酶
此菌能產生豐富的幾丁質酶，幾丁質酶對幾丁質有降解作用，它能促進線蟲卵的孵化，提高擬青黴菌對線蟲的寄生率，此外還能產生細胞裂解酶、葡聚糖酶與絲蛋白酶，Galvez-Mariscal研究表明：在高效菌株中蛋白酶和葡聚糖酶、澱粉酶活性高出1.2~4.2倍和20~120倍，這些酶促進細胞分裂。
降解效應
Somaseknar研究發現，淡紫擬青黴能促進難溶磷酸鹽的溶解，實驗室研究證實：擬青黴菌的增溶效果達到30%，其它線蟲拮抗菌達到20%~40%。同類研究還表明，擬青黴還能促進許多化學聚合物（如農藥，製革廢水等）的分解，這證明淡紫擬青黴具有一定的環保效應。
淡紫擬青黴菌
淡紫擬青黴菌劑是純微生物活孢子製劑，具有高效、光譜、長效、安全、無污染、無殘留等特點，可明顯刺激作物生長。試驗證明，在植物根系周圍施用淡紫擬青黴菌劑不僅能明顯抑制線蟲侵染，而且能促進植物根系及植株營養器官的生長，如播前拌種，定植時穴施，對種子的萌發與幼苗生長具有促進作用，可實現苗全、苗綠、苗壯，一般可使作物增產15%以上。
生物防治
防治根結線蟲
有機蔬菜生產中生物防治植物線蟲病的主要生物類型，淡紫擬青黴並提出了提高生物防治效果的途徑。植物線蟲病在我國局部發生、危害嚴重，幾乎每種作物上都有1~2種線蟲病，有的發生面積不斷擴大，危害越來越重，已成為農業生產上亟待解決的問題之一。淡紫擬青黴在植物根系周圍施用淡紫擬青黴菌劑不僅能明顯抑制線蟲侵染，而且能促進植物根系及植株營養器官的生長，
常規的化學防治的農藥的毒性較大，危害綠色食品的生產，所以應尋找新的技術。淡紫擬青黴生物農藥生物防治植物病原線蟲是研究的熱點，已發現可以防治線蟲病的生物有捕食線蟲的真菌、線蟲、渦蟲、線蚓、昆蟲、蟎類等；寄生線蟲的病毒、原生動物、細菌等;還可用植物的提取液，其防治效果也較好。
生物防治是病害防治中最具有套用前景的防治方法，符合環保和健康理念。但國內用於防治根結線蟲病的生防產品非常少，大多數對根結線蟲有作用的生防製劑都還處於研發階段。在登記的生防產品僅有“線蟲必克”和阿維菌素以及最近登記的淡紫擬青黴。在蔬菜根結線蟲防治上用的較多的有阿維菌素。可用0.5%阿維菌素顆粒劑15-17.5g/畝進行溝施或穴施。但作為生物農藥阿維菌素存在幾乎所有生物農藥不可避免的弱點，即田間使用效果不太穩定。
根結線蟲病主要為害蔬菜根部，側根和鬚根最易受害。受害根部產生大小不等的瘤狀物或根結，根結初為白色，柔軟，後變為淺黃褐色或深褐色，表面粗糙，有時裂開。剖開根結，可看到白色珍珠狀小顆粒，是根結線蟲的雌成蟲。蔬菜受根結線蟲侵染後生長發育緩慢，葉片小而黃。發病重時，植株矮小，不結實或結實不良，遇高溫乾旱天氣時，植株易萎蔫甚至枯死。
寄生作用
淡紫擬青黴可以寄生多種植物線蟲，包括根結線蟲、孢囊線蟲等重要經濟線蟲的卵和幼蟲，在其代謝過程中，可以產生具有殺線蟲活性的物質，抑制線蟲的孵化或直接使卵失去活性。弄清楚淡紫擬青黴如何寄生線蟲，對於正確使用該生防菌，提高防效有很大幫助。多年來，國內外學者做了大量研究。高學彪和汪軍分別採用雙溫測定法，室內測定淡紫擬青黴對南方根結線蟲和香蕉根結線蟲卵的相對寄生率為92.6%和94.3%。汪來發研究了來自不同地域的淡紫擬青黴的13個菌株，分別用其孢子液處理南方根結線蟲卵囊、孢子液處理分散卵粒、菌絲處理分散卵粒，結果表明了不同菌株對南方根結線蟲的寄生能力有很大差異，且用孢子液處理卵囊的寄生率顯著高於其他兩種處理，寄生能力最強的菌株其寄生率可達74.62%。張雯等研究了淡紫擬青黴對根結線蟲的侵染作用，結果發現，菌絲侵入線蟲卵消化了卵內容物而卵殼完整，推測幾丁質酶在侵染卵過程中起穿透卵殼幾丁質層的作用，而不以幾丁質為營養。劉國坤對淡紫擬青黴FZ-0289菌株體外寄生南方根結線蟲卵進行了研究，結果表明接種7d後，對胚胎髮育期卵的寄生率為98.2%，對含卵的寄生率為88.6%，卵囊接種14d後，卵囊內卵寄生率為94.5%。淡紫擬青黴PL050705菌株離體寄生柑橘半穿刺線蟲，對胚胎期卵的寄生率為83.33%，對卵內有幼蟲卵的寄生率為43.75%。HollandRJ等研究了淡紫擬青黴體外寄生爪哇根結線蟲卵、3齡、4齡幼蟲和雌蟲成蟲，結果表明：淡紫擬青黴侵染卵過程中，菌絲首先在卵表面膨大然後形成侵染釘，然後侵入卵，最後菌絲從卵裡面繼續生長出來或形成孢子，淡紫擬青黴也容易侵染3齡、4齡幼蟲和雌蟲成蟲。KhanA研究了淡紫擬青黴侵染爪哇根結線蟲、禾穀孢囊線蟲、香蕉穿孔線蟲這三種植物線蟲，淡紫擬青黴通過菌絲直接穿透爪哇根結線蟲體壁，從而侵染卵、幼蟲和成蟲；胚胎時期卵與含有幼蟲的卵相比，較易侵染。淡紫擬青黴也可以侵染體內含有卵的早熟孢囊和香蕉穿孔線蟲，但無法侵染成熟的褐色孢囊。
寄生機制
專家學者門通過生物化學和分子生物學手段去闡明淡紫擬青黴對植物線蟲的寄生機制，一般認為淡紫擬青黴對植物線蟲的寄生機制是菌絲機械壓力和菌絲分泌的多種酶共同作用的結果。淡紫擬青黴與線蟲的孢囊或卵接觸後，菌絲頂端變粗，形成侵染釘，隨後侵染釘分泌胞外物質(ECM)或粘性物質，在侵染釘的機械壓力和分泌物的共同作用下，侵染釘侵入線蟲卵殼。胞外物質(ECM)含有蛋白質酶P23，其蛋白水解活性引起卵殼的降解。根結線蟲和孢囊線蟲卵殼由卵黃層、幾丁質層和脂質層組成，其主要成份是幾丁質和蛋白質，因此，幾丁質酶和蛋白質酶在侵染過程中起到重要作用。
普遍認為淡紫擬青黴專門寄生不動狀態的線蟲，尤其卵，但也有報導淡紫擬青黴能夠寄生活動狀態的線蟲(幼蟲和成蟲)，尚缺少其寄生活動狀態的線蟲機制的資料。幾丁質酶不僅能能降解線蟲卵殼，還能促進線蟲的孵化，同時該酶對幼蟲有一定的致死作用。PeterJMB研究了淡紫擬青黴與北方根結線蟲卵互作，表明淡紫擬青黴在侵染卵的過程中有裂解酶的參與；且胚胎期的卵極易受蛋白酶的破壞，而含幼蟲的卵和已孵化的幼蟲則對蛋白酶表現出一定的抵抗能力。KhanA用透視電鏡研究了蛋白酶和幾丁質酶對爪哇根結線蟲孵化的影響，結果表明，蛋白酶或幾丁質酶顯著改變卵殼結構，或使幾丁質層變薄、或出現氣泡、或出現卵層分離，卵發生了形態學和生理學上的變化，失去完整性，無法進一步發育或孵化。
有效成分
淡紫擬青黴活體孢子
毒性：急性經口大鼠LD50大於5400mg/kg，急性吸入大鼠LC50大於2300mg/m3，急性經皮大鼠LD50大於2350 mg/kg，對眼睛和皮膚無刺激性，輕度致敏，對魚、鳥為低毒，對蜜蜂、家蠶是安全的。
作用機理：淡紫青擬霉孢子萌發後，所產生的菌絲可穿透線蟲的卵殼、幼蟲及雌性成蟲體壁，菌絲在其體內吸取營養，進行繁殖，破壞卵、幼蟲及雌性成蟲的正常生理代謝，從而導致植物寄生線蟲死亡。
防治對象：大豆、番茄、菸草、黃瓜、西瓜、茄子、姜等作物根結線蟲、胞囊線蟲。
使用方法
1、拌種按種子量的1%進行拌種後，堆捂2—3小時、陰乾即可播種。
2、處理苗床將淡紫擬青黴菌劑與適量基質混勻後撒入苗床，播種覆土。1公斤菌劑處理30—40平方苗床。
3、處理育苗基質將1公斤菌劑均勻拌入2—3方基質中，裝入育苗容器中。
4、穴施施在種子或種苗根系附近，畝用量0.5—1公斤。
注意事項：
1、勿與化學殺菌劑混合施用。
2、請注意安全使用，淡紫擬青黴可寄生眼角膜，如不慎進入眼睛，請立即用大量清水沖洗。
3、最佳施藥時間為早上或傍晚。勿使藥劑直接放置於強陽光下。
4、貯存於陰涼乾燥處，勿使藥劑受潮。
