涎腺腺樣囊性癌中Jab1調控Runx3蛋白的分子機制研究

《涎腺腺樣囊性癌中Jab1調控Runx3蛋白的分子機制研究》是依託浙江大學，由何劍鋒擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：涎腺腺樣囊性癌中Jab1調控Runx3蛋白的分子機制研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：何劍鋒
• 項目類別：青年科學基金項目

項目摘要

Runx3蛋白細胞漿異位和降解與涎腺腺樣囊性癌的發生、遠處轉移和預後密切相關，其亞細胞分布和降解機制尚未闡明，本研究運用細胞培養、質粒轉染、IP及Western蛋白印跡、siRNA干擾、免疫螢光化學和免疫組織化學等方法檢測Jab1、JNK/磷酸化JNK、RUNX3、P27、Smad4在腺樣囊性癌細胞株中的表達水平，明確致癌蛋白Jab1對Runx3亞細胞分布及表達的影響，分析組蛋白脫乙醯基酶HDAC-1和KAP-1轉錄中介因子在Jab1介導的Runx3表達的影響中可能的作用機制，為深入探討Jab1的功能奠定理論基礎，對揭示闡明Runx3蛋白失活導致的TGF-β信號通路異常引起腫瘤發生機制有重要意義，同時運用Kaplan-Meier生存曲線和Cox回歸模型進行預後分析，為臨床上腫瘤的診斷和治療提供新的思路。

結題摘要

本研究通過基因轉染檢測腺樣囊性癌細胞株SACC-83中Jab1與Runx3的表達相關性，並通過qRT-PCR、Western blot、免疫組織化學檢測涎腺腺樣囊性癌(SACC)中Jab1、Runx3、 P27kip1和磷酸化P27kip1 的表達水平及相關性，同時分析其表達水平與臨床病理因素的相關性，並分析影響預後的可能相關因子。結果表明：(1)、在SACC-83中存在Jab1的表達，而Jab1 siRNA轉染SACC-83細胞株後顯著抑制Jab1的表達，而Runx3、P27kip1和Smad4的表達則顯著提高，而抑制Cyclin D的表達，說明在SACC-83細胞株中Runx3的表達受到Jab1的調控，其調控機制可能與細胞周期相關因子有關；(2)、qRT-PCR結果表明，SACC中Jab1表達增高，而Runx3和P27kip1表達明顯降低，由於Jab1調控P27kip1的表達，從一定程度上說明SACC中Jab1調控Runx3的表達；(3)、Western Blot結果表明SACC中Jab1的表達量顯著高於正常涎腺的表達，而SACC中Runx3、P27kip1和磷酸化P27kip1的表達量顯著低於正常涎腺中的表達量，同樣提示SACC中Jab1調控Runx3、P27kip1和磷酸化P27kip1的表達；(4)、免疫組織化學結果表明在正常涎腺細胞核中Jab1呈弱表達，而Runx3、P27kip1 和磷酸化P27kip1均呈強陽性表達；而在SACC中Jab1呈強表達，Runx3、P27kip1 和磷酸化P27kip1均顯著抑制，Jab1高表達與Runx3低表達呈顯著相關(P=0.001)，揭示了SACC中Jab1調控Runx3的表達。同時也驗證了Jab1是細胞周期相關因子P27kip1 和磷酸化P27kip1的調控因子；(5)臨床病理因素與Jab1和Runx3表達相關性分析表明Jab1高表達與腫瘤病理類型和遠處轉移存在顯著相關性，而Runx3低表達與腫瘤的病理類型、淋巴結轉移、遠處轉移和臨床T分期存在顯著相關性，說明Jab1高表達和Runx3低表達在腫瘤的進展及遠處轉移方面具有重要的調控作用；(6)、生存模型分析表明，淋巴結轉移陽性、遠處轉移、及Jab1高表達和Runx3低表達與患者的預後存在顯著相關性。