《海洋資源中抗耐藥菌感染活性化合物的質譜篩選研究》是依託中國海洋大學，由許哲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：海洋資源中抗耐藥菌感染活性化合物的質譜篩選研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：許哲
- 依託單位：中國海洋大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
抗生素耐藥性是一項不斷加劇的全球衛生威脅。氨基糖苷類抗生素由於臨床耐藥菌的出現導致其使用受到限制。細菌對氨基糖苷類抗生素的耐藥主要是通過氨基糖苷類修飾酶對抗生素藥物進行修飾而使其失去活性。本課題採用質譜方法以氨基糖苷類雙功能修飾酶AAC(6’)-APH(2’’)為靶標，建立高選擇性、高靈敏度、快速的酶活測定方法，構建開發可與氨基糖苷類抗生素聯用的抗耐藥菌感染藥物的篩選模型。在新藥研發方面，它可以為新藥研發尤其對有潛力的先導化合物進行篩選提供有力的幫助，同時為設計藥物對抗細菌耐藥酶的修飾提供依據。
結題摘要
細菌對氨基糖苷類抗生素的耐藥主要通過產生氨基糖苷類修飾酶對抗生素藥物進行修飾而使其失去活性。本項目採用UHPLC Q-TOF MS方法構建了一種新穎的可同時篩選多種氨基糖苷類修飾酶抑制劑的篩選模型，可用於發現能與氨基糖苷類抗生素聯用的抗耐藥菌感染藥物。本項目僅使用一種酶AAC(6′)-APH(2″)，通過測定其乙醯轉移酶活性和磷酸轉移酶活性，實現對三種氨基糖苷類修飾酶：AAC(6′)-APH(2″)，AAC(6′)和APH(2′′)的抑制劑篩選。多靶點抑制劑的同時篩選，在藥物的早期發現階段大大提高了篩選效率。本項目最佳化了用於抑制劑篩選的酶反應條件。套用所建立的方法對兩個已知抑制劑巴龍黴素和槲皮素的抑制動力學進行了研究，測得其抑制常數Ki值分別為1.23μM 和20.27μM。本項目所建立的AAC(6′)-APH(2″)篩選模型的Z′因子為0.73，說明所建立模型穩定性好，適用於高通量篩選。我們還套用該模型對一個小型化合物庫進行了篩選，從中發現2個海洋吡啶生物鹼化合物對AAC(6′)-APH(2″)具有較好的抑制活性。進一步的研究證明，這2個海洋吡啶生物鹼化合物主要抑制AAC(6′)-APH(2″)中的乙醯轉移酶位點。
