《 流式細胞術基本原理與實用技術》是華中科技大學出版社 出版的圖書。
基本介紹
內容簡介,目錄,
內容簡介
《流式細胞術基本原理與實用技術》按照細胞生物學、免疫學、腫瘤學、血液學、細胞遺傳學、生物化學等學科的套用領域進行歸類，全面而詳盡地介紹流式細胞術的套用範圍，涉及細胞表面分子、細胞內或細胞核內抗原、細胞凋亡、DNA含量與細胞周期、細胞增殖、細胞毒作用、可溶性蛋白質分子、報告基因等的檢測和分析，並介紹了流式細胞術的其他用途。
目錄
第1章 流式細胞儀基本結構與原理
1.1 流式細胞儀基本結構與功能
1.1.1 流式細胞儀基本結構
1.1.2 流式細胞儀的基本功能與套用
1.2 流式細胞術的重要術語
1.2.1 前向散射與側向散射
1.2.2 Coulter效應與電子體積
1.2.3 螢光信號及其面積與寬度
1.2.4 光譜重疊與螢光補償
1.2.5 細胞基礎螢光域值與陰性對照置信區間
1.3 流式細胞術基本原理
1.3.1 流式細胞術分析的基本原理
1.3.2 流式細胞術分選的基本原理
1.3.3 流式細胞儀螢光補償設定
1.4 流式細胞術的樣本設定
1.4.1 常用對照
1.4.2 一套完整的流式細胞術檢測樣本設定
1.5 流式細胞術的數據分析
1.5.1 數據顯示與分析
1.5.2 設門
1.5.3 數據分析中幾種常見圖形及分析原則
第2章 抗原抗體反應基本特點與流式抗體及螢光染料的選擇
2.1 抗原抗體反應基本特點
2.1.1 抗原抗體結合具有特異性
2.1.2 抗原與抗體的結合是可逆的化學反應
2.2 抗原抗體反應影響因素
2.2.1 電解質
2.2.2 反應溫度與時間
2.2.3 pH值
2.3 流式抗體的選擇
2.3.1 儘量使用直標抗體
2.3.2 注意流式抗體的套用級別
2.3.3 抗體滴度或標記量的選擇
2.3.4 根據流式細胞儀的類型及螢光素的螢光光譜選擇螢光抗體
2.3.5 根據檢測物（抗原）表達量選擇螢光染料
2.4 螢光染料特性及其套用
2.4.1 抗體標記螢光染料特性及其套用
2.4.2 核酸螢光染料的特性及其套用
2.4.3 細胞膜及其他螢光探針的特性及其套用
第3章 細胞表面分子的檢測與分析
3.1 流式細胞術在細胞表面分子的檢測與分析中的套用
3.1.1 免疫細胞及其亞群的檢測與功能分析
3.1.2 血液系統細胞表面標誌的研究
3.1.3 細胞群體及細胞表面標誌變化的監測
3.1.4 細胞表面標誌構成性質的分析
3.2 標本製備
3.2.1 血液或骨髓標本的製備
3.2.2 體液、灌洗液或懸浮培養細胞的製備
3.2.3 貼壁細胞的製備
3.2.4 組織標本的製備
3.3 細胞表面分子免疫標記方法
3.3.1 直接免疫螢光法
3.3.2 間接免疫螢光法
3.3.3 全血直接標記法
3.3.4 直接與間接免疫螢光混合染色法
3.4 常用的免疫細胞表面標誌的檢測與分析
3.4.1 T淋巴細胞及其亞類檢測
3.4.2 B淋巴細胞及其亞類檢測
3.4.3 NK細胞與NKT細胞檢測
第4章 細胞內或細胞核內抗原檢測與分析
4.1 流式細胞術分析細胞內或細胞核內抗原基本步驟
4.1.1 細胞固定劑和穿膜劑的選擇
4.1.2 最佳抗體濃度的選擇
4.1.3 細胞膜內外FCR的封閉
4.2 胞內抗原的檢測與分析——胞內細胞因子的檢測與分析
4.3 核內抗原的檢測與分析——調節性T細胞（Treg，CD4+CD25+Foxp3+）的檢測與分析
第5章 細胞凋亡的檢測與分析
5.1 樣品來源與收集
5.2 PI單染法——亞“G1”峰檢測法
5.3 Annexin-V-PI復染法
5.4 末端轉移酶標記技術（TUNEL）
5.5 細胞周期特異性細胞凋亡的檢測（PI-Annexin-V，PA法）
第6章 DNA含量檢測與細胞周期的分析
6.1 常用DNA和RNA染料
6.2 DNA倍體分析在腫瘤診斷和治療中的意義
6.2.1 DNA倍體分析的判定標準
6.2.2 DNA倍體分析在腫瘤診斷和治療中的意義
6.3 細胞DNA檢測的內參考標準
6.3.1 雞紅細胞
6.3.2 人淋巴細胞
6.3.3 鱉紅細胞
6.4 DNA樣品的製備和檢測
6.4.1 DNA樣品的製備和檢測的影響因素與注意事項
6.4.2 培養細胞或懸浮樣品的DNA含量檢測
6.4.3 新鮮組織細胞核的DNA含量檢測
6.4.4 石蠟包埋組織塊切片的DNA含量檢測
6.4.5 FCM在腫瘤脫落細胞學檢查的套用
6.5 數據採集後的軟體分析
6.5.1 運用ModFit LT進行自動分析
6.5.2 運用ModFit LT進行手動分析
6.5.3 運用ModFit進行同步化分析
6.5.4 運用ModFit LT進行增殖分析
6.6 藥物對細胞周期的影響
6.7 流式細胞核型分析
6.8 FCM-DNA檢測的質量控制
6.8.1 標本採集和固定方法的質控
6.8.2 單細胞懸液製備的質控制備
6.8.3 石蠟包埋組織單細胞懸液製備的質控
6.8.4 脫落細胞樣品的採集
6.8.5 細胞懸液螢光染色的質控
6.8.6 流式細胞儀器操作技術質控
6.8.7 流式細胞分析資料處理的質控
6.8.8 定量螢光細胞染色技術的評價標準
第7章 細胞增殖的檢測與分析
7.1 以檢測細胞增殖抗原標誌物為基礎的分析法
7.1.1 BrdU/DNA雙參數法
7.1.2 Ki-67檢測與分析
7.1.3 PCNA/DNA雙參數法
7.1.4 Cyclins/DNA雙參數法
7.2 以檢測細胞分裂情況為基礎的分析法
7.2.1 檢測細胞增殖的常用螢光染料及其分析原理
7.2.2 以檢測細胞分裂情況為基礎的分析法的套用
第8章 細胞毒的檢測與分析
8.1 體外細胞毒檢測方法
8.1.1 CFSE/PI或PKH-67/PI檢測法
8.1.2 GFP/PI檢測法——以NK殺傷活性為例
8.2 體內CTL細胞毒檢測方法——CFSE標記法
第9章 可溶性蛋白質分子的檢測與分析
9.1 可溶性蛋白質分子的定性、定量檢測與分析
9.2 可溶性蛋白質分子的定量檢測與分析——液相晶片技術（LabMAPTM和CBA技術）
9.2.1 液相晶片技術的基本原理
9.2.2 液相晶片的技術優勢
9.2.3 液相晶片的主要實驗步驟
9.2.4 LabMAPTM技術
9.2.5 BD微球陣列分析技術（CBA技術）
第10章 報告基因的檢測和分析
10.1 報告基因GFP及其突變體
10.2 報告基因GFP及其突變體在生物學中的套用
10.2.1 篩選新的藥物
10.2.2 發育分子機理研究
10.2.3 細胞篩選或分選標記物
10.2.4 基因產物功能及基因定位研究
10.2.5 細胞功能活動的動態觀察
10.2.6 細胞、分子之間的相互作用研究
10.2.7 體內示蹤與套用
10.2.8 在RNA干擾與核酶體研究中的套用
10.2.9 免疫反應示蹤標誌物
10.2.10 在細胞凋亡相關基因研究中的套用
10.3 報告基因（GFP）的檢測與分析
10.3.1 報告基因轉染效率和（或）GFP融合蛋白表達的檢測與分析
10.3.2 GFP融合基因的細胞周期檢測與分析——GFP/PI雙標記法
10.3.3 在細胞凋亡相關基因研究中的套用一GFP/Annexin-V/PI三色標記法
第11章 其他流式細胞術套用技術
11.1 胞內活性氧水平的檢測與分析
11.1.1 DCFH-DA單染色法
11.1.2 DCFH/PI染色法
11.1.3 雙氫羅丹明（Rhodamine）123染色法
11.2 細胞膜電位的檢測與分析
11.2.1 檢測細胞膜電位的染料及其檢測原理
11.2.2 Cyanine（花青苷）染色法
11.2.3 羅丹明123染色法
11.2.4 JC-1染色法
11.3 細胞內鈣離子濃度的檢測與分析
11.3.1 檢測細胞內鈣離子濃度的螢光探針與檢測原理
11.3.2 細胞內鈣離子濃度的檢測與分析——Fluo-3/AM染色法
11.4 螢光共振能量轉移技術及套用
11.5 幹細胞（SP）的檢測——Hoechst33342法
第12章 流式細胞儀的發展和商品化儀器
12.1 流式細胞儀的發展歷史和趨勢
12.1.1 專業化的流式細胞儀紛紛面世
12.1.2 儀器全面自動化
12.1.3 多色多參數分析迅速發展
12.2 流式細胞儀商品儀器概述
12.2.1 激發光源及其螢光染料
12.2.2 液流系統
12.2.3 信號檢測和光電轉換
12.2.4 分選系統
12.2.5 數據處理與分析
12.2.6 流式微球晶片
12.2.7 圖像流式細胞儀
12.3 流式細胞儀的主要技術指標
12.3.1 螢光解析度
12.3.2 螢光靈敏度
12.3.3 前向角散射光靈敏度
12.3.4 前向角散射光解析度
12.3.5 分析速度
12.3.6 分選指標
附錄1 常見流式細胞術及螢光顯微鏡螢光染料激發波長與發射波長快查表
附錄2
2.1 常用溶液的配製
2.2 Hanks液的配製
2.3 磷酸鹽緩衝液（PB）的配製
參考文獻
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