《沉默Bcl2基因提高溶瘤腺病毒抗腫瘤作用的機制研究》是依託上海交通大學，由錢關祥擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：沉默Bcl2基因提高溶瘤腺病毒抗腫瘤作用的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：錢關祥
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
重組人5型腺病毒（H101）注射液已被批准套用於臨床。但單獨使用H101的臨床療效有限，前期研究中我們利用Bcl2 自身具有的抗凋亡特性及其與p53之間的相互協調關係提出了以Bcl2與P53為雙靶點、溶瘤腺病毒與小干擾Bcl2聯合，同一載體給藥的腫瘤基因治療模式，明顯增強了H101的抗宮頸癌的療效。本項目擬在前期研究基礎上，探討干擾Bcl2作用後，增強腺病毒抗腫瘤作用的機理，包括促進腫瘤細胞凋亡、荷瘤鼠瘤體縮小、生存期延長等。並分析干擾Bcl2後，腫瘤細胞表面受體CAR變化；腺病毒基因在腫瘤細胞內複製、轉錄、翻譯情況及其對腫瘤細胞的吸附和增殖能力的影響；以及其它一些與腺病毒溶瘤、致死相關基因（如E1A13S、ADP等）的表達變化。該課題有望闡明Bcl2基因被干擾後，腺病毒抗癌療效提高的內在機理，為將H101等溶瘤腺病毒藥物更好地套用於臨床提供理論基礎。
結題摘要
p53 基因是研究最早、最多的抑癌基因，是影響癌症發生的關鍵調控基因之一。絕大多數腫瘤細胞都存在 p53 基因異常或 p53 基因相關通路的異常。腫瘤發生時常伴隨有多個遺傳位點的變異，開展靶向多基因的腫瘤基因治療研究最基本前提是選擇合適的靶點。如上所述，p53基因是目前腫瘤基因治療的首選理想靶點，因此再選擇一個既可協同 p53 基因又最好具有單獨療效的第二治療靶點是開展多靶點腫瘤基因治療的關鍵。線粒體在凋亡過程中扮演著十分重要的角色， Bcl-2 家族的抗凋亡蛋白通過阻止線粒體融合，可強烈抑制凋亡。Bcl2 基因在正常細胞中不表達或低表達，而在大多數腫瘤細胞中過表達。p53 能通過直接干擾Bcl2/ Bax 複合物的形成，與存在於線粒體表面的 Bcl2 結合併形成凋亡複合物，促進 Bax 等促凋亡基因發揮功能。 在尋找第二靶點時，我們發現Hedgehog信號通路在UM中是高度激活的，Hedgehog信號通路與胚胎髮育，幹細胞分化與維持，創傷癒合，EMT，細胞增殖、分化、凋亡、自噬、遷移等密切相關，聯合抑制Hedgehog信號通路關鍵節點Smo顯著降低UM細胞增值和遷移。另外，發現CXCR4和ART3可促進UM發生遠處轉移，聯合靶向CXCR和ART3對腫瘤細胞具有明顯的殺傷作用。轉錄組深度測序結果表明，除了蛋白編碼基因，一些既往被我們忽視的非編碼基因，如長非編碼RNA，microRNA，同樣對腫瘤發生髮展起著重要作用。長非編碼RNA的表達具有時空特異性，在染色體修飾、轉錄、轉錄後多個層次都有調控作用。體外和體內實驗表明，靶向長非編碼RNA RHPNA-AS1, ANRIL,CANT1以及微小RNA miR-181b的基因治療都能取得積極的抗腫瘤效果。綜上所述，以p53為第一靶點的聯合靶向蛋白編碼基因及非編碼RNA的基因治療可有效增強對腫瘤細胞殺傷效果，為臨床靶向藥物研發提供可能。 從事與本研究項目相關的畢業博士2名、碩士2名；標註課題資助號的已經發表的論文13篇，其中SCI收錄12篇（其中一篇接受），總影響因子45.986,影響因子大於5分的有3篇。
