《水稻紅蓮型細胞質雄性不育育性恢復蛋白複合體的研究》是依託武漢大學，由胡駿擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：水稻紅蓮型細胞質雄性不育育性恢復蛋白複合體的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：胡駿
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
由線粒體基因造成的細胞質雄性不育和由細胞核編碼的恢復基因這一系統在雜種優勢的利用上得到廣泛套用。課題組在克隆紅蓮型恢復基因Rf5的基礎上，發現恢復基因分子複合體(Restoration of Fertility Complex, RFC)，首次鑑定出恢復通路中的重要基因GRP162，然而其他互作因子仍不清晰，尤其是切割因子尚未鑑定。本項目是對前期獲得重要互作因子進行深入研究，通過亞細胞定位、螢光定量PCR、pulldown、SPR、EMSA、酵母雙雜交、RNAi等方法闡釋複合體中各個候選基因的生物學功能，解析各個蛋白之間的互作關係，為構建恢復基因複合體的模型及組裝提供理論基礎。同時設計含不同標籤的恢復基因進行轉基因，通過BN-PAGE、免疫共沉澱等方法分離純化該複合體並進行質譜鑑定，為獲得切割因子等新的互作因子奠定基礎。同時為闡明細胞質雄性不育與育性恢復及雜種優勢的形成機理提供理論基礎。
結題摘要
線粒體基因造成的細胞質雄性不育和由細胞核編碼的恢復基因這一系統在雜種優勢的利用上得到廣泛套用。課題組在克隆紅蓮型恢復基因Rf5的基礎上，發現恢復基因分子複合體(Restoration of Fertility Complex, RFC)，首次鑑定出恢復通路中除Rf5外的重要基因GRP162，然而其他互作因子仍不清晰，尤其是切割因子尚未鑑定。本項目是對前期獲得重要互作因子（WD40、GI、Vatpase）進行深入研究，通過亞細胞定位、螢光定量PCR、pulldown、SPR、EMSA、酵母雙雜交、RNAi等方法闡釋複合體中各個候選基因的生物學功能，解析了各個蛋白之間的互作關係，為構建恢復基因複合體的模型及組裝提供理論基礎。同時設計含不同標籤的恢復基因進行轉基因，通過BN-PAGE、免疫共沉澱等方法分離純化該複合體並進行質譜鑑定，獲得了切割因子等新的互作因子。為闡明細胞質雄性不育與育性恢復及雜種優勢的形成機理提供理論基礎。
