基本介紹
- 中文名：氯苯肟唑
- 化學式：C14H13Cl2N3O
- 分子量：309.04
- 研發代碼：SPRI-WM-005
簡介,產品信息,分析方法,試劑和溶劑,儀器設備,HPLC色譜條件,溶液配置,測定,結果與討論,毒理學研究,田間藥效,順反異構體及其殺菌活性,
簡介
氯苯肟唑(研發代碼：SPRI-WM-005)是由上海市農藥研究所自行設計與合成的、新穎苯基乙酮肟類殺菌劑，該藥劑經室內殺菌譜測定證實對白粉病、灰霉病、菌核病、早疫病、炭疽病等多種植物病害具有顯著的生物活性。該產品對目前某些已產生較高抗性的植物病害（如三唑酮白粉病抗性菌系等）也具有很高的生物活性，有望解決目前農業生產中日益嚴重的抗性問題。
產品信息
中文名：氯苯肟唑
英文名：待定
中文化學名：1-（2，4-二氯苯基）-2-（1-咪唑基）-O-丙烯基乙酮肟
英文化學名：1-(2,4-Dichloro-phenyl)-2-imidazol-1-yl-ethanone-O-allyl-oxime
結構式：
理化性質：該化合物常溫下呈液體，溶於丙酮、乙醇、甲醇、二氯甲烷、氯仿、乙腈、苯、甲苯、DMF、DMSO，不溶於水；折光率n21D為1.5732；沸點(bp)為220。C(分解)；比重(d20)為1．26699/ml；pH=6．88。
已開發的製劑類型： 20%EW水乳劑
分析方法
試劑和溶劑
標樣：Z-氯苯肟唑(≥98.0%)，E-氯苯肟唑(≥98.0%)，自製；
溶劑：乙腈，HPLC；水：二次重蒸水。
儀器設備
高壓輸液泵；
島津LC–20A T；
紫外檢測器；
島津SPD–20A；
數據處理機：浙大N2000工作站。
HPLC色譜條件
色譜柱：4.6mm(id)×250mm不鏽鋼柱，內填Gemini－C18 (5μ)，填充（phenomenex ODS）；
流動相：乙腈：水=50:50 （v/v）；
檢測波長：220nm；
靈敏度：0.03；
流速：1.0 ml/min
溶液配置
（1）標準溶液的配製：稱取Z-氯苯肟唑、E-氯苯肟唑標樣各約0.03g（精確至0.0002g）於100ml容量瓶中，以流動相定容，搖勻後備用。
（2）樣品溶液配製：稱取氯苯肟唑樣品約0.06g（精確至0.0002g）於100ml量瓶中，以流動相定容，搖勻後備用。
測定
在上述操作條件下，待儀器穩定後，連續注入數針標樣溶液，計算各針相對回響值的重複性，待相鄰兩針的相對回響值變化小於1.0%時，按照下列順序進樣分析：標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液，按峰面積計算氯苯肟唑樣品的含量。
結果與討論
色譜條件的選擇
（1）波長：雖然氯苯肟唑的最大吸收波長在205nm左右，但由於此波長是氘燈的末端發射波長，其能量相對較弱，而且基線噪音也較大，相同的進樣量在220nm時得到更大的吸收峰面積，有利於提高定量的準確度。
（2）流動相：在方法的建立過程中，探索了多種流動相的組成及比例，在乙腈與水的體系中氯苯肟唑呈雙峰形態，正好與氯苯肟唑的分子結構式中有順反異構體相對應，又經多次實驗證明，Z-氯苯肟唑、E-氯苯肟唑在220nm時的吸收係數不一樣，從定量的準確性出發，最後確定以乙腈:水=5:5的溶液為流動相為最佳。
（3）色譜柱：查閱了多家生產廠商的色譜柱性能，最終選擇了pH適用範圍為1-12的Gemini–C18(5μ)柱子。此柱子能滿足在此工作條件下的pH需求，性能穩定，重複性好。
毒理學研究
按農藥的急性毒性分級標準進行判定，氯苯肟唑(SPRI—WM一005)急性經口毒性試驗，雄性、雌性大鼠LD50。分別為1165mg/kg和2150mg/kg，屬低等毒性農藥。急性經皮毒性試驗，雄性、雌性大鼠LD50均大於5000mg/kg，屬微毒類農藥。對家兔眼刺激和皮膚刺激試驗中，均表現為無刺激性。豚鼠致敏試驗中，不引起豚鼠皮膚的改變，屬弱致敏物。Ames實驗，當樣品組的回變菌落數超過陰性對照的二倍或以上，25 μ g/皿，50μ g/皿，250μ g/皿，500μ g/皿。各劑量組有劑量反應關係和標準差不超過均數的20%時，即可判為陽性。本試驗結果表明，氯苯肟唑(SPRI-WM-005)Ames測試結果為陰性。因此我們認為該產品有望取代一些高毒、高抗性及對環境影響大的傳統殺菌劑。
田間藥效
對新化合物氯苯肟唑(SPRI—WM一005)作為農用殺菌劑的效果進行了田間藥效評價。分別採用孢子萌發法、含毒介質法、離體葉片法和盆栽試驗法，測試了氯苯肟唑對不同蔬菜病原真菌的抑制作用；此外，還進行了20%氯苯肟唑水乳劑防治黃瓜白粉病和黑星病的田間藥效試驗。對照試劑是：12.5%睛菌唑乳油(myclobutalil 12.5%EC）；40%菌核淨可濕性粉劑(dimetachlone 40%WP）；72%霜脈·錳鋅可濕性粉劑(mancozeb·cymoxanil WP）；50%多菌靈(carbendazim 50%WP)，40%嘧霉胺懸浮劑(pyrimethanil 40%SC)。
室內毒力剛定結果顯示，氯苯肟唑對供試的幾種病原菌均具有較高的殺菌活性，其中500mg/L的劑量處理對番茄枯姜病菌、辣椒疫病菌、黃瓜黑星病菌的活性與對照藥劑相當，對菜豆菌核病菌、黃瓜灰霉病菌和黃瓜白粉病菌的抑制率雖然低於對照藥劑，但抑菌效果均在50%以上。田間試驗中20%氯苯肟唑水乳劑40mg/L藥液對黃瓜白粉病和黃瓜黑星病的防效可分別達80%和84%。室內生物活性測定結果與田間試驗結果一致。
氯苯肟唑在蔬菜上套用目前尚屬新藥，其抗藥性問題需要密切監測，其抗藥性風險評估、抗藥性機理將是今後研究的重點，同時也可以進行氯苯肟唑與其他殺菌劑的復配研究以減緩抗藥性問題。
順反異構體及其殺菌活性
氯苯肟唑結構式通過該化合物的結構可以看出，由於存在碳氮雙鍵,因此該化合物含有順反(Z、E)兩個異構體。為了進一步證實這兩個異構體在生物活性上是否存在差異，對兩個異構體進行了分離，並做了黃瓜白粉病的室內生物活性測定，進而確定了生物活性的比較。結果表明，當處理劑量為50mg/L是，氯苯肟唑（Z、E混合物）、Z-氯苯肟唑、E-氯苯肟唑的防效分別為95%、 100%和97%，三者活性基本相當，所以在實際中無需將兩個異構體分離，混合體可直接套用。
