隨著氟喹諾酮類藥物在食品動物中的廣泛套用，其殘留問題已引起廣泛的關注。FQS殘留除了其毒副作用對人類的直接危害，更為嚴重的是動物性食品中殘留較低濃度的藥物容易誘導人類致病菌產生耐藥性，從而不利於該類藥物對人類疾病的治療，因此必須十分重視FQS在動物性食品中的殘留問題。 |
一、檢測原理
本試劑盒是利用競爭ELISA方法，在酶標板微孔上預包被抗 氟喹諾酮抗原。檢測時，加入標準品或樣品溶液，氟喹諾酮抗體及酶標記物，包被抗原和加入樣本中的氟喹諾酮競爭性地與氟喹諾酮抗體結合後，再與酶標記物形成抗原抗體複合物，用TMB底物顯色；加入反應終止液，在450nm波長酶標儀下進行檢測，樣品中的氟喹諾酮濃度與吸收光強度成反比。
二、檢測範圍
本試劑盒是套用ELISA技術研發的藥物殘留檢測產品,與儀器分析技術比較，能經濟、快速地檢測出肌肉、肝臟及蜂蜜等中的氟喹諾酮。
三、交叉反應率
與類似物的交叉反應率：
恩諾沙星…………………100%
環丙沙星…………………98.7%
諾氟沙星…………………88.2%
培氟沙星…………………108.6%
氧氟沙星…………………128.6%
洛美沙星…………………72.6%
沙拉沙星…………………12.5%
氟喹酸（FLU）………… 96.73%
四、試劑盒組成
酶標板1塊，96孔/板
標準液6瓶（1ml/瓶）：
0 ppb、1ppb、3ppb、9ppb、27ppb、81ppb
抗體工作液 ………………………7ml
酶標記物 …………………………7ml
底物液A …………………………7ml
底物液B …………………………7ml
終止液 …………………………7ml
20X濃縮洗滌液 ………………40 ml
2X濃縮復溶液 ………………50 ml
說明書 ……………………………1份
五、 需要但試劑盒中不提供的器材和試劑
（1）設備
……微孔板酶標儀(450nm)
……振盪器、離心機
……微量移液器：20μl～200μl,100μl~1000μl
……容量瓶：100ml，500ml，1000ml
（2）試劑
……二氯甲烷、乙腈、NaOH、Na2HPO4.12H2O、NaH2PO4.2H2O、正己烷
六、溶液的配製
樣本前處理需配製：
配液1：pH7.2 0.05M PB緩衝液
稱取12.9gNa2HPO4·12H2O，2.175gNaH2PO4·2H2O
去離子水1L溶解。
配液2：乙腈-0.1MHCL溶液
V乙腈：VHCL= 84：16
配液3：正己烷-二氯甲烷混合溶液
V正己烷：V二氯甲烷 =2：8
配液4：復溶液1×
2×復溶液在使用前請按1：1稀釋
（1份濃縮復溶液+1份去離子水）
配液5：洗滌液
將40ml濃縮洗滌液（20倍濃縮）用蒸餾水稀釋
（可按需配置）
七、樣本前處理方法
樣本處理前須知
處理任何樣本時，都須注意：
（1）實驗中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
（2）實驗之前須檢查各種實驗器具是否乾淨，必須使用潔淨實驗器具，以避免污染干擾實驗結果。
樣本處理步驟：
(A)魚、蝦和雞肉（樣本稀釋倍數2）
（1）稱2.0±0.05g 均質過的組織樣本於50ml離心管中；
（2）加入乙腈-0.1M HCL溶液4ml，充分振盪5分鐘，再加入正己烷-二氯甲烷混合溶液4ml，振盪5分鐘，室溫4000轉/分，離心10分鐘；
（3）取2ml清澈上層有機相至乾燥溶器中，50℃水浴氮氣吹乾；
（4）用1ml復溶工作液溶解乾燥的殘留物，加入正己烷1ml混合30秒，室溫4000轉/分以上，離心5分鐘；
（5）去除上層取下層50µl液體用於分析
(B)蜂蜜（樣本稀釋倍數2）
。。。
十、試劑盒靈敏度、準確度、精密度
試劑盒靈敏度：1ppb
樣本最低檢測限：
魚、蝦：
恩諾沙星……………………2.0ppb
環丙沙星……………………2.0ppb
諾氟沙星……………………2.0ppb
培氟沙星……………………2.0ppb
氧氟沙星……………………2.0ppb
洛美沙星……………………2.0ppb
回收率：
魚、蝦、雞肉等………………… 90±15%
蜂蜜 ……………………80±15%
精密度：
試劑盒的變異係數均小於10%
