《欖香烯靜脈乳劑及其製備方法》是謝恬於2002年4月17日申請的發明專利，該專利的申請號為2008101264162，公布號為CN101306182，公布日為2008年11月19日，發明人是李德山、謝恬。
《欖香烯靜脈乳劑及其製備方法》所述欖香烯靜脈乳劑含有通過填料式精餾裝置精餾或分子蒸餾儀製備含欖香烯異構體的提取物、大豆磷脂、膽固醇和注射用水經高壓均質化處理，獲得分散相平均粒徑≤1微米的穩定水性分散體為止，獲得總欖香烯異構體的最終濃度為1－10毫克/毫升的欖香烯靜脈乳劑。該發明的欖香烯靜脈乳劑顯著提高了藥物製劑的藥效，並且減少了在靜脈注射套用中的刺激性，提高了穩定性。
2014年11月6日，《欖香烯靜脈乳劑及其製備方法》獲得第十六屆中國專利優秀獎。
（概述圖為《欖香烯靜脈乳劑及其製備方法》摘要附圖）
基本介紹
- 中文名：欖香烯靜脈乳劑及其製備方法
- 公布號：CN101306182
- 公布日：2008年11月19日
- 申請號：2008101264162
- 申請日：2002年4月17日
- 申請人：謝恬
- 地址：浙江省杭州市求是路36號綠園銀杏苑3－1902
- 發明人：李德山、謝恬
- 分類號：A61K36/9066（2006.01）、A61K36/899（2006.01）、A61K9/107（2006.01）、A61K31/015（2006.01）、A61K47/24（2006.01）等
- 代理機構：北京恆久聯達智慧財產權代理有限公司
- 類別：發明專利
- 代理人：徐明山
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,附圖說明,權利要求,實施方式,術語解釋,實施方案,實施案例,榮譽表彰,
專利背景
2002年4月前，在抗癌天然藥物研究領域中的許多研究人員都致力於研究紫杉醇、欖香烯各種異構體、薑黃提取物、溫鬱金提取物等的抗癌活性和這些藥物的各種製劑形式。
欖香烯是存在於某些植物中的一種倍半萜類化合物，拉丁名為Elemenum，英文名為Elemene，化學名是1-甲基-1-乙烯基-2，4-二異丙烯基環己烷，分子式C15H24。欖香烯有多種異構體，這些異構體中β-欖香烯，δ-欖香烯，γ-欖香烯已被證實有抗癌活性。欖香烯是可以從植物溫鬱金（Curcuma Wenyujin Y.H.Chen et C.ling）的根莖（俗稱溫莪術）的揮髮油中提取的化合物，或是從植物香茅（Cymbopoqon citratus（DC.）Stapt）的油中提取的化合物，例如從香茅油中除掉檸檬醛、香茅醇之後餘下的混合油狀物，提取的化合物實際上是包含β-欖香烯的欖香烯異構體混合物。
上述植物溫鬱金與另外兩種可作為天然藥物使用的植物莪術和薑黃同屬於姜科植物類群，產於中國的廣東、四川、福建、廣西、浙江等省。包含欖香烯的植物有溫鬱金、香茅、水菖蒲、土木香、人參等50多種，其中香茅是在中國分布廣、資源充足的植物。2002年4月前，欖香烯類化合物主要從溫鬱金油和香茅油中提取。
有許多文獻涉及直接採用天然藥物製備防治癌症的草藥製劑，例如中國專利公開CN1216256A公開了治療肝癌的草藥製劑，它包括含有白花蛇舌草、薑黃，虎杖和山豆根的提取物作為主要天然藥物的可注射組合物（A）和含有白花蛇舌草、重樓、虎杖、山豆根、龍膽草、大黃、連翹、赤芍、薑黃和石菖蒲的提取物作為主要天然藥物的口服組合物（B）。
在中國專利公開CN1302559中公開了薑黃素製劑，它是通過製備在水可混合的有機溶劑中或水和水可混合的有機溶劑的混合物中的薑黃素分子分散體，然後向該溶液添加保護膠體水溶液，薑黃素的疏水相形成毫微分散相。最終的製劑形式主要是水性分散體或乾粉，在優選的情況下粒徑小於10微米。
在CN1200266A中公開了通過二次分餾從香茅油中提取β-欖香烯的方法。
在中國專利公開CN1247756A中公開了用於治療惡性腫瘤的姜郁注射液，其中薑黃與鬱金的重量比為50-60:50-40，該注射液是一種簡單的混合物。
中國專利公開CN1076613A涉及欖香烯乳注射液及其製備方法，該注射液是一種乳狀液，平均粒徑一般不超過15微米，特別不超過2微米。
中國專利公開CN1244389A涉及欖香烯注射液及其製備方法，該注射液是一種簡單混合物，不是脂質體。
中國專利公開CN1110134A涉及脂質體製備工藝及製劑，其中特別描述了欖香烯脂質體注射液製備方法和由該方法獲得的欖香烯脂質體注射液，欖香烯的包封率達85％以上，但沒有給出有關脂質體的平均粒徑的數據。從製備方法可以判斷該脂質體具有較大的平均粒徑。
中國專利公開CN1221607A涉及利用CO2的臨界或超臨界方法來製備脂溶性藥物脂質體的工藝和所製備的欖香烯脂質體注射液，雖然欖香烯的脂質體的包封率很高，但脂質體的平均粒徑同樣太大。
以上這些文獻所公開的製劑在貯存穩定性和抗癌活性上都存在著不足。
另外，在一些專利文獻中還公開了欖香烯的各種衍生物和欖香烯金屬絡合物。例如，在CN11531158A中公開了一種欖香烯金屬絡合物和它作為抗癌藥物的使用。CN1153167A涉及欖香烯含氮衍生物及其作為抗癌藥物的用途。CN1153168A涉及欖香烯羥基類衍生物及其作為抗癌藥物的用途。
發明內容
專利目的
《欖香烯靜脈乳劑及其製備方法》的目的是提供欖香烯靜脈乳劑。該發明的另一個目的是提供欖香烯靜脈乳劑的製備方法。
技術方案
該發明提供這些藥物的新劑型。以欖香烯、β-欖香烯為原料分別製備成靜脈乳劑型該劑型的平均粒徑一般小於或等於1微米，甚至小於或等於100納米。
2002年4月前已有技術領域中已經知道欖香烯某些異構體、薑黃提取物、溫鬱金提取物具備抑制腫瘤的作用，一些文獻公開了這些天然藥物的各種製劑形式（或劑型），例如脂質體、乳劑、脂肪乳等製劑。但是，由於這些劑型的平均粒徑普遍較大，注射到人或動物體內後會引起人或動物體內的各種反應，例如刺激性大，有時候發生溶血現象。
該發明發明人經過多年的研究工作，發現將倍半萜烯類化合物或從植物中提取的含倍半萜烯類的提取物製成平均粒徑≤1微米或≤100納米的各種注射劑型，其中包括脂質體劑型，納米脂質體劑型，前體脂質體劑型，長循環脂質體劑型，長循環納米脂質體劑型，納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米微球劑型，脂肪乳劑型等，可以克服2002年4月前已有技術的注射製劑中的諸多問題，尤其該發明的這些劑型在靜脈注射套用中減少了刺激性，它們的穩定性得到進一步提高。該發明的新劑型顯著提高了藥物製劑的藥效，但這些劑型的抑制癌細胞的機理2002年4月前還不是十分清楚。該發明人根據大量的試驗結果作出以下推測：由於該發明製劑具有小的平均粒徑並且具有特殊的表面性質（例如親水/親脂平衡，表面電荷等），使得這些製劑中的藥物（或活性成分）對癌細胞有較強的親和力，能夠充分附著於癌細胞上，讓活性成分直接作用於癌細胞，達到抑制或殺滅癌細胞的效果。另外，發現，納米粒度的製劑起效快，防止癌細胞轉移方面有一定效果。
同時，儘管該發明製劑具有小的平均粒徑，但是所獲得的各種劑型的製劑同時具有高的穩定性，它們在長時間的貯存中不會發生凝聚問題，使得可以較長時間進行貯存而不降低穩定性。
該發明提供欖香烯靜脈乳劑，它含有：從植物中經填料式真空精餾裝置精餾或分子蒸餾儀提取的具有總欖香烯異構體含量≥70wt％的提取物、大豆磷脂、膽固醇和餘量的注射用水，所述欖香烯靜脈乳劑是一種水性分散體，分散相的平均粒徑≤1微米，提取物與大豆磷脂、膽固醇的重量比為0.5-1.5:2.5-4.0:1.0-2.0，欖香烯靜脈乳劑中總欖香烯異構體的最終濃度為1-10毫克/毫升。
該發明提供欖香烯靜脈乳劑的製備方法，它包括下述步驟：
（1）通過填料式精餾裝置精餾或分子蒸餾儀製備含欖香烯異構體的提取物，所述提取物中總欖香烯異構體含量≥70wt％；
（2）將步驟（1）獲得的提取物按照提取物與大豆磷脂、膽固醇的重量比為0.5-1.5:2.5-4.0:1.0-2.0混合，添加注射用水，高壓均質化處理，直到獲得分散相平均粒徑≤1微米的穩定水性分散體為止，獲得總欖香烯異構體的最終濃度為1-10毫克/毫升的欖香烯靜脈乳劑。
能夠在該發明中用來製成新劑型的從植物中提取的倍半萜烯類（在這裡有時候稱作活性成分）基本上包括全部倍半萜烯類化合物（C15H24），倍半萜烯類化合物的混合物或從植物中提取的倍半萜烯類提取物，對於這些提取產物要求倍半萜烯類化合物的純度在70％以上，優選在75％以上，更優選在85％以上，特別優選在90％以上，甚至特別優選在95％以上。
需要指出的是，在該發明中用於製備各種劑型的製劑的原料可以使用商購的產品如欖香烯產品（提取物）、β-欖香烯產品（提取物）、薑黃提取物或溫鬱金提取物，以及樹蘭花、香椿子、海風藤、丁香、沒藥、黃花杜鵑、葛縷子、百里香、歐芹、廣藿香、茅蒼朮、蛇床子、啤酒花、檀香木、香檸檬、防風根、柏木、松節油、香茅、人參等的提取物產品。如果在該申請中需要自己製備這些提取物，用於製備這些提取物的各種揮髮油可以使用商購產品，也可以使用通過普通的水蒸汽蒸餾法或分子蒸餾法從植物中獲得的揮髮油。
倍半萜烯類包括欖香烯（elemene），薑黃烯（curcumene），姜烯（zingiberene），波旁烯（bourbonene），蛇麻烯（humulene），金合歡花烯（farnesene），杜松烯（cadinene），芹子烯（selinene），馬阿里烯（maaliene），檀香烯（santalene），廣藿香烯（patchonlene），石竹烯（也稱作丁香烯，caryophyllene），吉馬烯（大香葉烯，germacrene），畢澄茄油烯（cubebene），柏木烯（cedrene），長葉烯（longifolene），防風根烯（或紅沒藥烯，bisabolene），香檸檬烯（bergamotene），古芸烯（gurjunene），愈瘡木烯（guaiene），衣蘭烯（ylangene），異石竹烯（isocaryophyllene），長蒎烯（longipinene），白菖烯（calarene），木羅烯（muurolene），菖蒲二烯（acoradiene），倍半水芹烯（β-sesquiphellandrene）等。
原則上，從植物中提取的含有60wt％以上倍半萜烯類的所有提取物都可用於製備該發明的新劑型，倍半萜烯類是所有劑型的活性成分。含有70wt％以上倍半萜烯類的提取物是理想的，含有75wt％以上倍半萜烯的提取物是優選的，含有85wt％以上倍半萜烯的提取物是更優選的，含有90wt％以上或甚至含有95wt％以上倍半萜烯類的提取物是特別優選的。
從天然植物中提取的含欖香烯的提取物通常含有α-欖香烯，β-欖香烯，δ-欖香烯，γ-欖香烯，波旁烯等。在該申請中作為特定的實施方案，以溫鬱金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling揮髮油、香茅油Cymbopoqon citratus（DC.）Stapt次要成分（從香茅油分餾除掉檸檬醛、香茅醇之後餘下的混合油狀物）為原料，經填料式真空精餾裝置或分子蒸餾儀精製出欖香烯。其中用於製備該發明欖香烯原料的該溫鬱金揮髮油和所述次要成分可以使用商購產品，也可以通過普通的水蒸汽蒸餾法或分子蒸餾法從植物中獲得。
另外，每一種欖香烯異構體如α-欖香烯，β-欖香烯，δ-欖香烯或γ-欖香烯只要純度在85wt％以上也能夠用於製成該發明的新劑型。
2002年4月前根據中國國內欖香烯質量標準（參見2000年的國家藥品監督管理局頒發的國家藥品標準WS1-（X-094）-2000Z），若分離出的產物（提取物）用氣相色譜法（聚乙二醇20摩爾/升為固定相，白色硅藻土擔體60～80目，柱溫為135～140℃，理論板數按β-欖香烯計算應不低於1000）檢測總欖香烯異構體純度達到≥85％則該產物稱作欖香烯，若檢測出β-欖香烯純度達到≥95％則產物為β-欖香烯，實際上這是不準確的，因為使用靈敏度更高的色譜儀器例如30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀來檢測該≥95％純度的β-欖香烯樣品，會發現它仍然含有至少6％的波旁烯（在低靈敏度色譜儀的色譜圖，β-欖香烯的峰與波旁烯的峰重疊成一個峰），欖香烯樣品是多種倍半萜烯的混合物，即含有β-欖香烯，δ-欖香烯，γ-欖香烯，波旁烯，丁香烯、吉馬烯等。
薑黃Rhizoma Curcuma Longa L.提取物是從薑黃植物獲取的揮髮油中提取的產物。在該發明中作為特定的實施方案，薑黃提取物指薑黃揮髮油經填料式真空精餾裝置或分子蒸餾儀精製出的提取物，經GC-MS檢測，薑黃提取物通常含有≥70wt％，優選≥75wt％，更優選≥80wt％，特別優選≥85wt％，甚至更優選≥90wt％的倍半萜烯類如薑黃烯、姜烯等和少量（相當於全部倍半萜烯類總重量的約1/25～1/5）的薑黃素。
溫鬱金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling提取物包括從溫鬱金植物中獲取的揮髮油中提取的產物。在該發明中作為特定的實施方案，溫鬱金提取物指溫鬱金揮髮油經真空填料式精餾裝置精餾出的組分或經分子蒸餾儀精製出的產物，經GC-MS檢測，薑黃提取物通常含有≥70wt％，優選≥75wt％，更優選≥80wt％，特別優選≥85wt％，甚至更優選≥90wt％的倍半萜烯類如各種欖香烯異構體、吉馬烯、丁香烯等和較少量（相當於全部倍半萜烯類總重量的約1/50～1/10）的薑黃素。
附圖說明
圖1是實施例1的1A製劑的透射電鏡照片。
權利要求
1、欖香烯靜脈乳劑，它含有：從植物中經填料式真空精餾裝置精餾或分子蒸餾儀提取的具有總欖香烯異構體含量≥70wt％的提取物、大豆磷脂、膽固醇和餘量的注射用水，其特徵在於：所述欖香烯靜脈乳劑是一種水性分散體，分散相的平均粒徑≤1微米，提取物與大豆磷脂、膽固醇的重量比為0.5-1.5:2.5-4.0:1.0-2.0，欖香烯靜脈乳劑中總欖香烯異構體的最終濃度為1-10毫克/毫升。
2、根據權利要求1所述的欖香烯靜脈乳劑，其特徵在於：所述提取物與大豆磷脂、膽固醇的重量比為0.8-1.2:2.8-3.6:1.2-1.8。
3、根據權利要求1所述的欖香烯靜脈乳劑，其特徵在於：所述欖香烯靜脈乳劑中總欖香烯異構體的濃度為2～7.5毫克/毫升。
4、根據權利要求2所述的欖香烯靜脈乳劑，其特徵在於：所述欖香烯靜脈乳劑中總欖香烯異構體的濃度為2～7.5毫克/毫升。
5、權利要求1-4中任一權利要求所述的欖香烯靜脈乳劑，其特徵在於：提取物中β-欖香烯異構體的含量≥85wt％。
6、權利要求1所述的欖香烯靜脈乳劑的製備方法，它包括下述步驟：
（1）通過填料式精餾裝置精餾或分子蒸餾儀製備含欖香烯異構體的提取物，所述提取物中總欖香烯異構體含量≥70wt％；
（2）將步驟（1）獲得的提取物按照提取物與大豆磷脂、膽固醇的重量比為0.5-1.5:2.5-4.0:1.0-2.0混合，添加注射用水，高壓均質化處理，直到獲得分散相平均粒徑≤1微米的穩定水性分散體為止，獲得總欖香烯異構體的最終濃度為1-10毫克/毫升的欖香烯靜脈乳劑。
7、根據權利要求6所述的製備方法，其特徵在於：所述提取物與大豆磷脂、膽固醇的重量比為0.8-1.2:2.8-3.6:1.2-1.8。
8、根據權利要求6或7所述的製備方法，其特徵在於：所述欖香烯靜脈乳劑中總欖香烯異構體的濃度為2～7.5毫克/毫升。
9、根據權利要求6或7所述的製備方法，其特徵在於：提取物中β-欖香烯異構體的含量≥85wt％。
實施方式
術語解釋
在《欖香烯靜脈乳劑及其製備方法》中所述的粒徑或粒度是指分散相的粒徑或粒度。
在該申請中，如果用30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀檢測提取物含有≥70wt％欖香烯（包括各種欖香烯異構體的混合物）而且含有＜85wt％β-欖香烯，則該提取物簡稱欖香烯，如果提取物含有≥85wt％β-欖香烯，則該提取物簡稱β-欖香烯。
如果在劑型前加“納米”修飾，則指該劑型的平均粒徑≤150納米，在理想的情況下平均粒徑≤100納米。注射劑和注射製劑可互換使用。
脂質體劑型，在該發明中是指分散或懸浮在含水介質中的由磷脂和膽固醇等組成的脂雙層結構，該脂雙層結構類似於細胞膜結構。
納米脂質體劑型，在該發明中是指平均粒徑低於或等於150納米的脂質體。
前體脂質體劑型，在該發明中是指在脂質體的配方基礎上再添加賦形劑，通過真空冷凍乾燥（真空凍乾）方法所製備的凍乾粉。該凍乾粉在臨床套用之前通過添加注射用水，經過振搖或振盪，使之恢復成脂質體形態。
長循環脂質體劑型，簡單地說，在該發明中是指在脂質體的配方基礎上再增加聚乙二醇磷脂醯乙醇胺所製備的脂質體。它注射到體內後比普通的脂質體在體內發揮效用的時間更長，或在體內消除緩慢。
納米微乳劑型，指平均粒徑≤150納米，在理想情況下≤100納米的乳劑。
靜脈乳劑型，在該發明中指平均粒徑≤1微米的注射乳。
脂質納米微球劑型，在該發明中是指平均粒徑≤150納米的脂肪乳。
脂肪乳劑型，在該發明中要求它的平均粒徑≤1微米；另外在中國國家藥典中也規定平均粒徑≤1微米。
nm是指納米，μ是指微米。在該申請中純度是指按重量計的百分純度，除非另有說明。
在該申請中所使用的功效成分（或活性成分）是欖香烯，2002年4月前知道自然界中主要有四種異構體，即α--欖香烯，β-欖香烯，δ-欖香烯，γ-欖香烯。該發明可以將欖香烯異構體混合物製成各種劑型，也可以將經過提純獲得的每一種異構體例如α-欖香烯，β-欖香烯，δ-欖香烯，γ-欖香烯或這些異構體中的任何兩種或多種的混合物製成各種劑型。為了簡單起見，使用30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀（色譜儀：Bio-RadFTS-65A，HP5890II，色譜柱：BP-5）檢測提取物，含有≥85wt％α-欖香烯的提取物（其中一般還含有其它欖香烯異構體）稱作α-欖香烯，類似地，含有≥85wt％β-欖香烯的提取物稱作β-欖香烯，含有≥85wt％δ-欖香烯的提取物稱作δ-欖香烯，含有≥85wt％γ-欖香烯的提取物稱作γ-欖香烯。因此，該發明所使用的欖香烯不一定是單純一種異構體，它甚至可以是各種異構體的按任何比例的各種混合物。
該申請中所使用的欖香烯可以通過商業途徑以提取物（各種異構體混合物）或純異構體（要求純度高於85wt％）產物形式購買獲得，也可以根據需要自己製備，對於欖香烯的製備方法參見製備例1，和對於β-欖香烯的製備方法參見製備例2。
該申請中所使用的欖香烯原料、試劑沒有特別的限制，只要該欖香烯原料是從天然植物中提取並且總欖香烯異構體純度≥70wt％就可在該發明中使用，更理想的是，該純度≥75wt％，更理想≥85wt％。β-欖香烯、δ-欖香烯、γ-欖香烯和α-欖香烯原料則是從天然植物中提取並且每一種異構體純度≥85wt％的提取物，更理想的是純度≥90wt％。
除非另有說明，否則在該發明中使用的其它成分如膽固醇、大豆磷脂、卵磷脂、甘油、亞油酸、聚乙二醇磷脂醯乙醇胺、脂族胺、大豆油等一般要求符合國家藥用標準，溶劑也應該符合國家藥用標準，這些主要出於健康方面的考慮；類似地，對於一些原料用“精製”修飾，表明該原料必須符合國家藥用標準，例如精製大豆磷脂是注射劑可用的產品，精製大豆油是注射劑可用的產品。
除非另有說明，否則在該申請中所使用的氣相色譜儀是：Bio-RadFTS-65A，HP5890II，色譜柱是：BP-5。
該發明的各種劑型能夠以靜脈注射、局部給藥方式用於治療目的。
實施方案
在下列的實施方案中作為原料主要使用提取物“欖香烯”、提取物“β-欖香烯”、薑黃提取物或溫鬱金提取物，還可以使用樹蘭花、香椿子、海風藤、丁香、沒藥、黃花杜鵑、葛縷子、百里香、歐芹、廣藿香、茅蒼朮、蛇床子、啤酒花、檀香木、香檸檬、防風根、柏木、松節油以及香茅、人參等的提取物。顯然，其中某一種倍半萜烯異構體的純度較高（例如≥85wt％）的產品都能夠作為該發明的原料，而且利用化學方法合成的各種倍半萜烯類及其衍生物都能夠用於該發明中。
該發明提供了脂質體或納米脂質體的製備方法，它包括：將提取物與大豆磷脂、膽固醇以重量比0.5-1.5:2.5-4.0:1.0-2.0，優選0.8-1.2:2.8-3.6:1.2-1.8，更優選0.9-1.1:3.0-3.4:1.4-1.6，特別優選1:3.2:1.5進行混合；添加溶劑（如乙醚或丙酮或氯仿），添加量足以使混合物充分溶解，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，添加餘量的注射用水（根據所要配製的最終濃度來計算該餘量），然後置入常規的超音波細胞粉碎機中進行超音波處理；取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀、電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑例如≤1微米（脂質體），或≤100納米（納米脂質體）後，調節pH，使pH值為4.5～6.5，經0.8微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，利用色譜儀（氣相或液相）測得活性成分的最終濃度（倍半萜烯類活性成分的重量（毫克）/總製劑體積（毫升））為1～10毫克/毫升，優選為2～7.5毫克/毫升，更通常為5～7.5毫克/毫升。
納米脂質體的包封率檢測：用分子篩法檢測，即，利用SephadexG25層析系統，將提取物納米脂質體製劑分成兩個流份，即提取物納米脂質體流份和游離的提取物流份，經氣相色譜儀檢測兩個流份中含有的提取物含量。包封率計算公式＝提取物納米脂質體流份的提取物含量÷（提取物納米脂質體流份的提取物含量+游離的提取物含量）。顯微鏡或透射電鏡驗證是否為脂質體。
該發明提供前體脂質體的製備方法：將提取物與精製大豆磷脂、膽固醇以重量比0.5-1.5:2.5-4.0:1.0-2.0，優選0.8-1.2:2.8-3.6:1.2-1.8，更優選0.9-1.1:3.0-3.4:1.4-1.6，特別優選1:3.2:1.5進行混合，添加溶劑（如乙醚或丙酮或氯仿），添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，添加餘量的注射用水（根據所要配製的最終濃度來計算該餘量），然後置入超音波細胞粉碎機進行超聲處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡或Coulter儀來檢驗平均粒徑，當平均粒徑≤1微米後，調節pH，使pH值為4.5～6.5，經0.8微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，加入占總製劑量的1-2wt％的賦形劑（例如乳糖或平均分子量Mw為約4000-40000的低分子右旋糖苷），100℃蒸汽流滅菌，無菌條件下冷凍乾燥、灌封。在使用之前添加注射水以達到最終活性成分濃度（倍半萜烯類活性成分的重量（毫克）/製劑體積（毫升））為1～10毫克/毫升，優選為2～8毫克/毫升，更優選為2～7.5毫克/毫升，更通常為5～7.5毫克/毫升。
包封率的檢測：用分子篩法檢測方法，即：根據所要配製的最終製劑濃度（毫克/毫升），將一定量的提取物前體脂質體製劑先添加餘量體積的水振搖均勻，此時又變成了脂質體，利用SephadexG25層析系統分成兩個流份，即提取物脂質體流份和游離的提取物流份，經氣相色譜儀檢測兩個流份中含有的提取物量。包封率計算公式＝提取物脂質體流份的提取物含量÷（提取物脂質體流份的提取物含量+游離的提取物量）。顯微鏡或透射電鏡證實是否為前體脂質體。
該發明提供長循環提取物納米脂質體的製備方法，該方法包括：將提取物與精製大豆磷脂、聚乙二醇（2000）磷脂醯乙醇胺、膽固醇以重量比0.5-1.5:1.5-3.5:0.3-1.2:0.8-2.0，優選以重量比0.8-1.2:1.8-3.0:0.4-1.0:1.2-1.8，更優選以重量比0.9-1.1:2.4-2.8:0.6-1.0:1.2-1.6，特別優選以重量比1:2.6-2.7:0.7-0.9:1.3-1.5進行混合，添加溶劑（如乙醚或丙酮或氯仿），添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，添加餘量的注射用水（根據所要配製的最終濃度來計算該餘量），然後置入常規的超音波細胞粉碎機進行超音波處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑（例如≤100納米）後，調節pH，使pH值為4.5～6.5，經0.8微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，（氣相或液相）色譜法測得活性成分的最終濃度（倍半萜烯類活性成分的重量（毫克）/總製劑體積（毫升））為1～10毫克/毫升，優選為2～7.5毫克/毫升，更優選為2～8毫克/毫升，更通常為5～7.5毫克/毫升。對於聚乙二醇（2000）磷脂醯乙醇胺，其中“2000”指聚乙二醇鏈段的平均分子量（道爾頓）。
該注射劑的包封率的檢測與前面的脂質體注射劑的包封率檢測方法相同。
該發明提供帶負電荷及帶正電荷的提取物納米微乳的製備方法：
製備方法1：帶負電荷的納米微乳的製備
將提取物與精製大豆磷脂、膽固醇以重量比0.5-1.5:2.5-4.0:1.0-2.0，優選0.8-1.2:2.8-3.6:1.2-1.8，更優選0.9-1.1:3.0-3.4:1.4-1.6，特別優選1:3.2:1.5進行混合，添加溶劑（如乙醚或丙酮或氯仿），添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，添加餘量的注射用水（根據所要配製的最終濃度來計算該餘量），然後置入常規的超音波細胞粉碎機進行超音波處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑（例如≤100納米）後，調節pH，使pH值為4.5～6.5，經0.8微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，活性成分的最終濃度（倍半萜烯類活性成分的重量（毫克）/總製劑體積（毫升））為1～10毫克/毫升，優選為2～7.5毫克/毫升，更通常為5～7.5毫克/毫升。顯微鏡、透射電鏡檢測，證實是否是納米微乳。
製備方法2：帶正電荷的納米微乳的製備
將提取物、精製卵磷脂、C14-C22直鏈或支鏈脂族胺、膽固醇以重量比0.5-1.5:2.5-3.5:0.2-0.6:1.0-2.0，優選0.8-1.2:2.5-3.0:0.3-0.5:1.2-1.8，更優選0.9-1.1:2.7-2.9:0.3-0.5:1.4-1.6，特別優選1:2.8:0.4:1.5進行混合，添加溶劑（如乙醚或丙酮或氯仿），添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，然後添加餘量的注射用水（根據所要配製的濃度計算出該餘量），然後置入常規的超音波細胞粉碎機進行超聲處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑（例如≤100納米）後，調節pH，使pH值為7.5～9.0，經0.8微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，倍半萜烯類活性成分的最終濃度為1～10毫克/毫升，優選為2～7.5毫克/毫升，更通常為5～7.5毫克/毫升。顯微鏡、透射電鏡檢測，證實是否為納米微乳。
該發明還提供提取物脂質納米球的製備方法，該方法包括：取提取物與大豆磷脂一起加入大豆油中，升溫控制成油相（保持為油相），將該油相加入到含甘油的水溶液中。其具體重量比例為：提取物占最終配製劑總量的0.08～0.8wt％，大豆磷脂0.8～2.5wt％，大豆油8-12wt％，甘油1.8-2.8wt％，注射用水加至5000毫升；優選的重量比例為：提取物占最終配製劑總量的0.1wt％～0.5wt％，大豆磷脂1.2wt％～2.0wt％，大豆油10wt％，甘油2.25～2.5wt％，注射用水加至5000毫升。然後高速攪拌，調節pH為4.5～6.5，再經過普通的高壓均質機（例如M110-E/H型（日本MIZUHO產））處理，然後進行前面所述的超音波處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在其脂質球的平均粒徑達到規定值例如≤100納米之後，再經0.8微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，100℃～120℃滅菌。（氣相或液相）色譜法測得倍半萜烯類活性成分的最終濃度為1～10毫克/毫升，優選為2～7.5毫克/毫升，更通常為2～5毫克/毫升，更理想為2.0～3.0毫克/毫升。根據需要可以在該最終製劑中加入適量膽固醇、亞油酸等。
該發明提供提取物靜脈注射乳的製備方法，該方法包括：將提取物、精製大豆磷脂、膽固醇以重量比0.5-1.5:2.5-4.0:1.0-2.0，優選0.8-1.2:2.8-3.6:1.2-1.8，更優選0.9-1.1:3.0-3.4:1.4-1.6，特別優選1:3.2:1.5，與餘量的注射用水（根據所要配製的最終濃度來計算該餘量）進行混合，用常規的高壓均質機（例如M110-E/H型（日本MIZUHO產））乳化，取樣利用帶標尺的顯微鏡或Coulter儀來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑例如≤1微米後，調節pH，使pH值為4.5～6.5，經1.2微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，經100℃～120℃滅菌，得到提取物靜脈乳，（氣相或液相）色譜法測得倍半萜烯類活性成分的最終濃度為1～10毫克/毫升，優選為2～7.5毫克/毫升，更通常為5～7.5毫克/毫升。
該發明提供提取物脂肪乳的製備方法，該方法包括：取提取物與大豆磷脂加入大豆油中，升溫控制成油相（保持為油相），將該油相加入到含甘油的水溶液中。其具體重量比為：提取物占最終配製劑總量的0.08～0.8wt％，大豆磷脂0.8～2.5wt％，大豆油8-12wt％，甘油1.8-2.8wt％，注射用水加至5000毫升；優選的重量比例為：提取物占最終配製劑總量的0.1wt％～0.5wt％，大豆磷脂1.2wt％～2.0wt％，大豆油10wt％，甘油2.25～2.5wt％，注射用水加至5000毫升。然後高速攪拌，調節pH為4.5～6.5，再經過普通的高壓均質機（例如M110-E/H型（日本MIZUHO產））處理，使其粒徑小於1微米，再經1.2微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，100℃～120℃滅菌。倍半萜烯類活性成分的最終濃度為1～10毫克/毫升，優選為2～7.5毫克/毫升，更理想為2.0～3.0毫克/毫升或為5～7.5毫克/毫升。根據需要可以在該最終製劑中加入適量膽固醇、亞油酸等。
根據需要，該發明的製劑可以用不同尺寸例如1.2微米、1.0微米、0.9微米、0.8微米、0.7微米、0.6微米、0.5微米等的微孔濾膜進行過濾，可以截取平均粒徑≤0.8微米、≤0.7微米、≤0.6微米、≤0.5微米、≤0.45微米、≤0.4微米、≤0.3微米等的分散相。
實施案例
製備例1：欖香烯的製備
以溫鬱金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling揮髮油或香茅Cymbopoqon citratus（DC.）Stapt次要成分（香茅油除掉檸檬醛、香茅醇之後餘下的混合油狀物）為原料，經廣州漢維機電公司MD-S80型分子蒸餾儀分餾欖香烯，其工藝條件：蒸餾溫度30～45℃，蒸餾壓力70～90帕，刮膜速度300～320轉/分，冷凝面溫度20～25℃，系統保溫20～25℃，物料流速15～30毫升/小時，僅收集餾余物，將餾余物進行分子蒸餾。蒸餾溫度為40～60℃，蒸餾壓力20～70帕，刮膜速度300～320轉/分，冷凝溫度20～25℃，系統保溫20～25℃，物料流速15～30毫升/小時，分別收集餾出物與餾余物，將餾余物繼續進行分子蒸餾。蒸餾溫度為30～70℃，蒸餾壓力10～50帕，刮膜速度300～320轉/分，冷凝溫度20～25℃，系統溫度20～25℃，物料流速15～30毫升/小時，收集餾出物，放掉餾余物，將得到的二次餾出物混合，繼續蒸餾，一直到利用30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀氣相色譜儀（色譜儀：Bio-RadFTS-65A，HP5890II，色譜柱：BP-5）檢測總欖香烯異構體純度達到≥75％為止。
製備例2：β-欖香烯的製備
以溫鬱金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling揮髮油或香茅Cymbopoqon citratus（DC.）Stapt次要成分（香茅油除掉檸檬醛、香茅醇之後餘下的混合油狀物）為原料，經廣州漢維機電公司MD-S80型分子蒸餾儀分餾β-欖香烯，其工藝條件：蒸餾溫度30～45℃，蒸餾壓力70～100帕，刮膜速度300～320轉/分，冷凝面溫度20～25℃，系統保溫20～25℃，物料流速7～10毫升/小時，僅收集餾余物，將餾余物進行分子蒸餾。蒸餾溫度為40～60℃，蒸餾壓力20～70帕，刮膜速度300～320轉/分，冷凝溫度20～25℃，系統保溫20～25℃，物料流速7～10毫升/小時，分別收集餾出物與餾余物，將餾余物繼續進行分子蒸餾。蒸餾溫度為30～70℃，蒸餾壓力10～50帕，刮膜速度300～320轉/分，冷凝溫度20～25℃，系統溫度20～25℃，物料流速7～10毫升/小時，收集餾出物，放掉餾余物，將得到的二次餾出物混合，繼續蒸餾，一直到用30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀（色譜儀：Bio-RadFTS-65A，HP5890II，色譜柱：BP-5）檢測產物的β-欖香烯純度達到≥85％為止。
實施例1：欖香烯或β-欖香烯的納米脂質體注射劑的製備
程式1A：將製備例1的欖香烯產品與精製大豆磷脂、膽固醇以重量比1:3.2:1.5混合，添加乙醚，添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除乙醚成膜，添加餘量的注射用水（根據所要配製的最終濃度即5毫克/毫升來計算該餘量），然後置入山東濟寧超聲電子儀器廠出產的超音波細胞粉碎機（型號JCS-204）超聲處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，當平均粒徑≤100納米後，用1摩爾/升磷酸二氫鈉水溶液調節pH，使pH值為4.5～6.5，經0.8微米微孔濾膜（上海新亞淨化器件廠生產，規格0.8微米）過濾和然後裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，所獲得的注射劑產品簡稱1A。取樣用氣相色譜法測得活性成分（總總欖香烯異構體的重量（毫克）/製劑體積（毫升））的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。
用分子篩法檢測包封率，即，利用SephadexG25層析系統將欖香烯（指提取物產品）納米脂質體製劑分成兩個流份，即欖香烯納米脂質體流份和游離的欖香烯流份，經氣相色譜儀檢測兩個流份中含有的提取物含量。包封率超過85％。包封率計算公式＝欖香烯納米脂質體流份的提取物含量÷[欖香烯納米脂質體流份的提取物含量+游離的提取物量]。顯微鏡、透射電鏡檢測，證實是納米脂質體，在附圖1中給出該注射劑的透射電鏡照片（標尺50納米）。
程式1B：重複上述1A程式，只是用製備例2的β-欖香烯產品代替製備例1的欖香烯產品。顯微鏡、透射電鏡檢測，證實製劑是納米脂質體。製劑中總欖香烯異構體的濃度為約5±0.10毫克/毫升。包封率高於85％。該注射劑簡稱1B。
實施例2：欖香烯或β-欖香烯的前體脂質體的製備
2A：按照與實施例1的1A程式中相同的方法和原料配比，重複進行實施例1的1A程式，只是超音波處理後要求分散相的粒徑≤1微米以及在過濾之後和在裝瓶之前，加入占總製劑重量的1-2％的乳糖，然後利用100℃蒸汽流滅菌，無菌條件下冷凍乾燥、灌封（分裝）。用Coulter儀檢測證實製劑是前體脂質體。該注射劑產品簡稱2A。該製劑在注射套用之前添加注射水以達到最終活性成分濃度（總欖香烯異構體的重量（毫克）/製劑體積（毫升））為5±0.10毫克/毫升。包封率高於85％。
2B：重複上述2A，只是用製備例2的β-欖香烯代替製備例1的欖香烯，用平均分子量Mw為約40000的低分子右旋糖苷代替乳糖。該注射劑簡稱2B。用Coulter儀檢測證實製劑是前體脂質體。包封率高於85％。該製劑在注射套用之前添加注射水以達到最終活性成分濃度（總欖香烯異構體的重量（毫克）/製劑體積（毫升））為5±0.10毫克/毫升。
實施例3：欖香烯或β-欖香烯的長循環納米脂質體的製備
3A：按照與實施例1的1A程式中相同的方法，重複進行實施例1的1A程式，只是原料和它們的重量配比是：欖香烯（製備例1）:大豆磷脂:聚乙二醇（2000）磷脂醯乙醇胺:膽固醇＝1:2.6:0.8:1.4。該注射劑簡稱3A。取樣檢驗平均粒徑≤100納米。製劑中總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。包封率高於85％。
3B：重複上述3A，只是用製備例2的β-欖香烯代替製備例1的欖香烯。所獲得的注射劑簡稱3B。平均粒徑≤100納米。製劑中總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。包封率高於85％。
實施例4：帶負電荷及帶正電荷的欖香烯或β-欖香烯的納米微乳的製備
4A-1：帶負電荷的納米微乳的製備
重複實施例1的1A程式，只是不測定包封率。取樣測得總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。用Coulter儀證實是納米微乳。該注射劑產品簡稱4A-1。
4A-2：帶正電荷的納米微乳的製備
重複實施例1的1A程式，只是原料和它們的重量配比是：製備例1的欖香烯:卵磷脂:正十八烷基胺:膽固醇＝1:2.8:0.4:1.5，不測定包封率。取樣測得總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。用Coulter儀證實是納米微乳。該注射劑簡稱4A-2。
4B-1：帶負電荷的納米微乳的製備
重複上述4A-1，只是用製備例2的β-欖香烯代替製備例1的欖香烯。取樣測得總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。用Coulter儀證實是納米微乳。所獲得的注射劑簡稱4B-1。
4B-2：帶正電荷的納米微乳的製備
重複上述4A-2，只是用製備例2的β-欖香烯代替製備例1的欖香烯。取樣測得總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。用Coulter儀證實是納米微乳。所獲得的注射劑簡稱4B-2。
實施例5：欖香烯或β-欖香烯的脂質納米球製劑的製備
5A：取製備例1的欖香烯與大豆磷脂一起加入大豆油中，升溫控制成油相（即保持為油相），將該油相加入到含甘油的水溶液中。其具體重量比為：欖香烯占總製劑重量的0.2％，大豆磷脂1.6％，大豆油10％，甘油2.5％，餘量為注射用水，然後高速攪拌，用1摩爾/升磷酸二氫鈉水溶液調節pH為4.5～6.5，再經M110-E/H型（日本MIZUHO產）高壓均質機處理，然後按照實施例3中相同方法進行超音波處理，使其脂質球的粒徑≤200納米和平均粒徑≤100納米，再經0.8微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，100℃～120℃滅菌。取樣測得總欖香烯異構體的最終濃度為2±0.04毫克/毫升。所獲得的注射劑簡稱5A。根據需要可以在原料中包括適量的膽固醇、亞油酸等。
5B：重複上述5A程式，只是用製備例2的β-欖香烯代替製備例1的欖香烯。脂質球的粒徑≤200納米和平均粒徑≤100納米。色譜法測得總欖香烯異構體的最終濃度為2±0.04毫克/毫升。所獲得的注射劑簡稱5B。
實施例6：欖香烯或β-欖香烯的靜脈注射乳的製備
6A：將製備例1的欖香烯、精製大豆磷脂、膽固醇以重量比1:3.2:1.5與餘量的注射用水（根據所需最終的濃度即5毫克/毫升來計算該餘量）混合，用M110-E/H型（日本MIZUHO產）高壓均質機乳化，一直用Coulter儀檢驗粒徑小於1微米為止。然後，用1摩爾/升磷酸二氫鈉水溶液調節pH，使pH值為4.5～6.5，經1.2微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，經100℃～120℃滅菌，得到欖香烯靜脈乳，取樣測得總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。該注射劑簡稱6A。
6B：重複以上6A，只是用製備例2的β-欖香烯代替製備例1的欖香烯。用Coulter儀檢驗粒徑小於1微米。製劑中總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。所獲得的注射劑簡稱6B。
實施例7：欖香烯脂肪乳的製備
7A：取製備例1的欖香烯與大豆磷脂加入大豆油中，升溫控制成油相，將該油相加入到含甘油的水溶液中。其具體重量比為：欖香烯占總製劑重量的0.2％，大豆磷脂1.2％，大豆油10％，甘油2.5％，餘量為注射用水。然後高速攪拌，用1摩爾/升磷酸二氫鈉水溶液調節pH為4.5～6.5，再經M110-E/H型（日本MIZUHO產）高壓均質機處理，一直到用Coulter儀檢驗粒徑≤1微米為止，再經1.2微米微孔濾膜過濾和然後裝瓶，100℃～120℃滅菌。測得總欖香烯異構體的最終濃度為2±0.04毫克/毫升。所獲得的注射劑簡稱7A。根據需要可以在原料中包括適量膽固醇、亞油酸等。
7B：重複上述7A，只是用製備例2的β-欖香烯代替製備例1的欖香烯。測得在製劑中總欖香烯異構體的最終濃度為2±0.04毫克/毫升。所獲得的注射劑簡稱7B。
實施例8：CO2超臨界法製備脂質體
8A：將占膽固醇重量的10wt％的三氯甲烷加入膽固醇中使之浸潤，將大豆磷脂和製備例1的欖香烯產品加入其中進行混合（欖香烯:大豆磷脂:膽固醇＝重量比1.2:3.2:1.5），將所獲得的混合物放入CO2超臨界提取儀（廣州漢維機電公司生產，型號SFE100毫升）的萃取器中，通入CO2（壓力50-80千克），體系溫度50℃，進行臨界或超臨界分散，使混合物均勻混合，然後緩慢減壓釋放CO2，讓CO2將三氯甲烷帶出，取出萃取器，在萃取器中加入餘量的注射用水（根據注射劑的最終濃度計算該餘量），用攪拌器攪拌，將所形成的分散體用超音波處理，一直到脂質體的分散相粒徑≤100納米為止（稱為納米脂質體）。然後將納米脂質體用1摩爾/升磷酸二氫鈉水溶液調節pH，使pH值為4.5～6.5，經0.8微米微孔濾膜（上海新亞淨化器件廠生產，規格0.8微米）過濾和然後裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，所獲得的注射劑產品簡稱8A。取樣用氣相色譜法測得總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。包封率高於88％。
8B：重複上述8A，只是用製備例2的β-欖香烯代替製備例1的欖香烯，製得脂質體。測得在製劑中總欖香烯異構體的最終濃度為5±0.10毫克/毫升。所獲得的注射劑簡稱8B。包封率高於88％。
藥效學試驗
藥物製劑的體內抗腫瘤效果的評價方法已在以上列舉的某些專利文獻中有描述（例如參見CN1153168A）。
在該發明中，各種劑型的製劑對皮下接種的人體腫瘤異種移植模型QGY肝癌、MKN-45胃癌的療效，可以通過以80毫克（欖香烯或β-欖香烯）/千克（體重）、40毫克/千克和20毫克/千克的劑量，每天尾靜脈給藥1次，連續給藥10天的治療方案來確認，其中沒有給藥的作為對照組。具體的操作過程和腫瘤抑制率（抑瘤率）的計算按照2002年4月前（指該申請的申請日以前）的國家藥品監督管理局的相關規定“抗腫瘤藥物的藥效評價辦法”來實施。
抑瘤率％＝[（沒有給藥的模型的腫瘤重量-給藥的模型的腫瘤重量）/沒有給藥的模型的腫瘤重量]×100％。
注射劑 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 |
1A | 20 | 30.2% | 40 | 39.3% | 80 | 45.2% |
1B | 20 | 30.0% | 40 | 39.1% | 80 | 45.0% |
2A | 20 | 30.1% | 40 | 37.5% | 80 | 44.0% |
2B | 20 | 30.0% | 40 | 38.5% | 80 | 43.6% |
3A | 20 | 29.6% | 40 | 39.6% | 80 | 44.5% |
3B | 20 | 29.8% | 40 | 38.6% | 80 | 44.4% |
4A-1 | 20 | 30.4% | 40 | 38.5% | 80 | 46.0% |
4A-2 | 20 | 31.6% | 40 | 37.9% | 80 | 46.2% |
4B-1 | 20 | 30.2% | 40 | 37.4% | 80 | 45.3% |
4B-2 | 20 | 29.4% | 40 | 38.6% | 80 | 44.9% |
5A | 20 | 29.3% | 40 | 38.7% | 80 | 44.3% |
5B | 20 | 29.5% | 40 | 38.6% | 80 | 44.5% |
6A | 20 | 29.8% | 40 | 37.8% | 80 | 43.2% |
6B | 20 | 29.4% | 40 | 37.9% | 80 | 43.5% |
7A | 20 | 29.2% | 40 | 37.4% | 80 | 44.0% |
7B | 20 | 29.6% | 40 | 37.2% | 80 | 43.2% |
8A | 20 | 29.4% | 40 | 37.4% | 80 | 44.0% |
8B | 20 | 29.2% | 40 | 37.2% | 80 | 43.2% |
注射劑 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 |
1A | 20 | 28.9% | 40 | 39.3% | 80 | 45.2% |
1B | 20 | 29.1% | 40 | 39.1% | 80 | 45.0% |
2A | 20 | 29.3% | 40 | 37.5% | 80 | 44.0% |
2B | 20 | 28.4% | 40 | 38.5% | 80 | 43.6% |
3A | 20 | 29.1% | 40 | 39.6% | 80 | 44.5% |
3B | 20 | 29.0% | 40 | 38.6% | 80 | 44.4% |
4A-1 | 20 | 29.4% | 40 | 38.5% | 80 | 46.0% |
4A-2 | 20 | 29.5% | 40 | 37.9% | 80 | 46.2% |
4B-1 | 20 | 28.8% | 40 | 37.4% | 80 | 45.3% |
4B-2 | 20 | 28.3% | 40 | 38.6% | 80 | 44.9% |
注射劑 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 |
1A | 20 | 47.6% | 40 | 59.5% | 80 | 68.2% |
1B | 20 | 46.8% | 40 | 59.2% | 80 | 68.5% |
2A | 20 | 47.2% | 40 | 57.6% | 80 | 64.0% |
2B | 20 | 48.2% | 40 | 56.3% | 80 | 63.6% |
3A | 20 | 49.5% | 40 | 59.6% | 80 | 67.5% |
3B | 20 | 48.4% | 40 | 58.3% | 80 | 66.4% |
4A-1 | 20 | 49.3% | 40 | 58.4% | 80 | 67.0% |
4A-2 | 20 | 49.4% | 40 | 57.7% | 80 | 67.2% |
4B-1 | 20 | 48.6% | 40 | 57.2% | 80 | 66.3% |
4B-2 | 20 | 49.3% | 40 | 58.4% | 80 | 67.9% |
5A | 20 | 49.8% | 40 | 58.7% | 80 | 68.3% |
5B | 20 | 47.8% | 40 | 58.3% | 80 | 65.5% |
6A | 20 | 47.6% | 40 | 56.8% | 80 | 63.2% |
6B | 20 | 46.9% | 40 | 56.9% | 80 | 63.5% |
7A | 20 | 48.2% | 40 | 56.4% | 80 | 66.0% |
7B | 20 | 46.8% | 40 | 56.2% | 80 | 63.2% |
注射劑 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 | 劑量（毫克/千克） | 抑瘤率 |
1A | 20 | 23.1% | 40 | 29.8% | 80 | 35.4% |
1B | 20 | 23.0% | 40 | 29.6% | 80 | 35.2% |
2A | 20 | 22.8% | 40 | 27.8% | 80 | 34.0% |
2B | 20 | 22.8% | 40 | 28.5% | 80 | 33.3% |
3A | 20 | 22.9% | 40 | 29.8% | 80 | 34.2% |
3B | 20 | 23.0% | 40 | 28.7% | 80 | 34.8% |
4A-1 | 20 | 24.2% | 40 | 28.1% | 80 | 36.2% |
4A-2 | 20 | 24.4% | 40 | 27.9% | 80 | 36.2% |
4B-1 | 20 | 23.6% | 40 | 27.8% | 80 | 35.2% |
4B-2 | 20 | 23.2% | 40 | 28.7% | 80 | 34.4% |
5A | 20 | 23.4% | 40 | 28.7% | 80 | 34.8% |
5B | 20 | 24.1% | 40 | 28.6% | 80 | 34.5% |
6A | 20 | 22.4% | 40 | 27.9% | 80 | 33.2% |
6B | 20 | 22.6% | 40 | 27.8% | 80 | 33.4% |
7A | 20 | 22.4% | 40 | 27.5% | 80 | 34.1% |
7B | 20 | 22.2% | 40 | 27.3% | 80 | 33.6% |
另外，各種劑型的注射劑對荷Lewis肺癌的小鼠NK細胞與對照組比活性提高21％～23％。
各種劑型的注射劑對荷Lewis肺癌的小鼠淋巴細胞增殖活性影響、刺激指標提高了1.4～1.55。
總之，從上述表中數據可以看出，各種製劑經QGY肝癌、MKN-45胃癌、小鼠腦瘤G422模型藥理學試驗有效。對免疫功能影響試驗，荷Lewis肺癌的小鼠NK細胞與對照組比提高21％～23％。淋巴細胞增值活性影響、刺激指標提高了1.4～1.55。
所以，欖香烯注射劑能夠用於抑制和/或治療腫瘤。另外，經過試驗，該製劑還能夠用於抑制癌細胞轉移，用於緩解腫瘤疼痛，用於預防或治療缺血性中風。
榮譽表彰
2014年11月6日，《欖香烯靜脈乳劑及其製備方法》獲得第十六屆中國專利優秀獎。
