標籤隨機引物-PCR

標籤隨機引物-PCR是一種全基因擴增技術。T-PCR引物3端為9〜15個鹼 的隨機序列,5端為17個鹼基的標記序列。 反應分兩步進行:第一步進行5個循環,第一個循環引物的3隨機序列與模板DNA在 30〜40°C隨機退火,在Taq聚合酶的引導下延伸,使5端帶上標記序列;第2〜5個循環以新合成鏈為模板,使其兩端均帶有標記序列; 第二步加入與標記序列互補的引物,特異性擴 增第一步的擴增產物,共進行60個循環。

TPCR的擴增效率和產物特異性均較高,但擴增產物對基因組DNA的覆蓋率偏低,一般情況下僅37%,因此作為全基因組擴增的實際套用受到限制。(侯一平)

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