核酸助沉劑

乙醇低溫沉澱是回收液體樣品中的DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉澱並不能完全回收樣品中的核酸,至少丟失30%左右的核酸。如果液體樣品中的核酸濃度很低或DNA<200bp,乙醇沉澱只能回收50%的DNA和RNA。AcrylCarrier是一種分子生物學級Acryl多聚物溶液,在乙醇沉澱時加入5-10μlAcrylCarrier即可明顯提高核酸沉澱的得率,更可使痕量DNA的回收率達到95~98%,同時可選擇性去除短引物(<22bp)片段和dNTP,用於沉澱回收標記探針,去除未標記dNTP。與生物源性的核酸沉澱助劑如糖原和tRNA相比,AcrylCarrier本身絕無核酸污染也無DNA酶和RNA酶活性,同時不影響酶切、連線、轉錄、PCR、轉化轉染等,也不影響核酸電泳和DNA-蛋白相互作用。AcrylCarrier已成為最常用的核酸助沉劑。

基本介紹

  • 中文學名:核酸助沉劑
  • :生物
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核酸助沉劑

實驗室使用,僅用於體外AcrryllCarrrier核酸助沉劑
目錄號:1117
目錄編號 包裝單位
11117011 1ml
11117022 5ml

產品儲存

室溫或者4℃保存一年,-20℃保存時間更長。

產品特點

1. 明顯提高DNA或RNA沉澱的得率。
2. 痕量DNA和RNA(20pg)回收達95~98%。
3. 不影響酶切、連線、轉錄PCR等反應。
4. 不影響電泳和DNA-蛋白相互作用。

使用方法

1. 提高DNA或RNA沉澱回收效率的使用方法:
1) 在1mlRNA或者DNA溶液中加入4-8μlAcrylCarrier ,顛倒混勻。
2) 按照標準的乙醇沉澱法來沉澱RNA或者DNA,如加入3MPH5.2醋酸鈉溶液(沉澱RNA時應該使用無RNA酶處理的溶液)到終濃度0.3摩爾(約1/10體積),然後加入2倍體積的無水乙醇,混勻後室溫或者冰櫃放置10-30分鐘,12000轉離心10分鐘,棄上清,70%乙醇漂洗一遍,去上清,晾乾沉澱,將沉澱重新溶解於適量DEPC處理水(RNA沉澱)或者其它如TE緩衝液中。
2. 提高DNA或RNA產率的使用方法:
每一毫升總RNA提取試劑TRIpure(TRIzol)或者DNA提取試劑DNAzol加入4-8μlAcrylCarrier,然後繼續按照這些產品的說明書進行後續步驟。
注意事項:
AcrylCarrier 會增加RNA或者DNA的光密度值,因此測量光密度值的時候,為了消除AcrylCarrier影響,應該按照同樣的實驗過程做一個空白對照樣品(使用同樣的試劑和AcrylCarrier ,但是不含有RNA或者DNA樣品,將最後的AcrylCarrier沉澱溶解在和樣品一樣的溶解液中)。測量樣品和空白對照在260和280nm的光密度值。將樣品的光密度值減去空白對照的光密度值,便可以得到實際的樣品的光密度值。如果定量不需要很精確,也可以估測。

核酸助沉劑選擇

AcrylCarrier進口品牌當仁不讓地選擇Invitrogen公司,該公司的TRIzol市場占有率是最高的。現在國內也開發出很多同類產品,特別是北京博凌科為公司生產的AcrylCarrier,不論從外觀還是操作,還是實驗結果都與Invitrogen公司的一致,是替代進口產品的理想選擇。

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