核苷酸切除修復因子XPD通過靶向HBx阻遏HBV整合

《核苷酸切除修復因子XPD通過靶向HBx阻遏HBV整合》是依託南昌大學，由鄭劍鋒擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：核苷酸切除修復因子XPD通過靶向HBx阻遏HBV整合
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：鄭劍鋒
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

HBV整合與肝細胞癌（HCC）的發生、發展密切相關，有關HBV整合的確切機制尚未完全明了。研究發現，抑制DNA損傷修復能促進HBV整合，而HBV的表達產物HBx能抑制肝細胞DNA損傷修復，提示HBx具有促進HBV整合的作用。本課題組前期研究發現，著色性乾皮病基因D（XPD）能下調HBx的表達。據此，我們提出XPD通過下調HBx的表達，解除HBx的DNA損傷修復抑制作用，從而抑制HBV整合的假說。為證實這一假說，我們將在前期工作基礎上，採用基因共轉染技術在肝癌細胞系、正常肝細胞中研究XPD對DNA損傷修復的促進作用及對HBV整合的抑制作用，並探討其機制。研究HBx在HBV整合的作用將豐富HBV的致癌機制理論，XPD通過下調HBx的表達阻遏HBV整合將為干預B肝病毒整合、預防HBV-DNA整合引發的基因組不穩定及HCC的發生提供一種全新的策略，從而為臨床提供新的干預靶點。

結題摘要

肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，）的發病機制複雜多變，B肝病毒（hepatitis B virus，HBV）整合與的發生密切相關，HBV致癌機制有待進一步闡明。為了探討HBV的致癌機制及可能的干預措施，本課題通過基因共轉染、Southern-blot、Western-blot 等細胞分子學技術，研究了著色性乾皮病基因D（xeroderma pigmentosum D，XPD）對HBV-DNA整合的阻遏作用，並探討了其分子機制。在肝癌細胞株HepG2.2.15中，通過對X基因、XPD的敲低/入，研究了HBx蛋白在HBV-DNA整合中的促進作用及XPD對HBx蛋白的抑制作用；在正常肝細胞LO2中，通過XPD和X基因的敲入，研究了XPD在HBV-DNA整合中的抑制作用，證實XPD通過下調HBx的表達，影響了ATM-Chk2-P53信號通路介導的DNA損傷修復過程，進而抑制HBV-DNA整合。通過本研究，我們證實1.HBV能整合到細胞基因組，其可能的機制是通過HBx介導；2.XPD通過ATM-Chk2-P53信號途徑影響HBx進而阻遏HBV的整合。同時還發現，HBV整合過程中HBx能影響很多腫瘤相關信號通路的改變（如mTOR通路，NF-κB通路），XPD能通過影響細胞自噬發揮抑制肝癌發生的作用。綜合上述結果，本研究為探討HBx在肝癌發生過程中的作用及XPD抑制HBV整合作用的機制提供了理論基礎，同時對於B肝相關性肝癌的發病機制提供了線索。項目資助發表SCI論文3篇，待發表兩篇。項目投入經費50萬元，支出44.3375萬元，各項支出基本與預算相符。剩餘經費5.6625萬元，剩餘經費計畫用於本項目研究後續支出。