有機溶劑沉澱法

利用與水互溶的有機溶劑(如甲醇、乙醇、丙酮等)能使蛋白質在水中的溶解度顯著降低而沉澱的方法，稱為有機溶劑沉澱。

基本介紹

• 中文名：有機溶劑沉澱法
• 外文名：Organic solvent precipitation method
• 拼音：youjirongjichendianfa
• 原理：溶解度
• 影響因素：有機溶劑的選擇等
• 目的：提純方法

原因

有機溶劑引起蛋白質沉澱的主要原因是加入有機溶劑使水溶液的介電常數降低，因而增加了兩個相反電荷基團之間的吸引力，促進了蛋白質分子的聚集和沉澱。有機溶劑引起蛋白質沉澱的另一種解釋認為與鹽析相似，有機溶劑與蛋白質爭奪水化水，致使蛋白質脫除水化膜，而易於聚集形成沉澱。

影響因素

(一)有機溶劑的選擇 在實際生產中，常用的有機溶劑有乙醇、丙酮、異丙醇、氯仿等。丙酮的介電常數小，沉澱能力強；而乙醇無毒，廣泛套用於藥品生產中。

(二)溫度的控制 有機溶劑沉澱時，溫度是重要的控制指標。根據沉澱對象不同，採用的溫度不同，為防止生物大分子在較高溫度時發生變性，一般要求在低溫下進行，同時還要考慮有機溶劑與水混合時的放熱現象。

(三)pH值 等電點時，蛋白質的溶解度最低。在有機溶劑沉澱時，應選擇pH值在等電點附近，但是pH值的控制還必須考慮目的藥物的穩定性條件，一般生產中常用緩衝液來控制溶液的pH值。

(四)離子強度 在有機溶劑和水的混合液中離子強度是一個特別重要的因素。因為鹽在一定的濃度範圍內能增加蛋白質或酶在有機溶劑中的溶解度，使有機溶劑沉澱收率降低，因此當採用鹽析沉澱法得到蛋白質或酶後，如需進一步用有機溶劑沉澱法純化，一定要先透析除鹽。