《新型靶向雙功能抗體及其對類風濕關節炎的治療》是依託湖北大學，由劉夢元擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：新型靶向雙功能抗體及其對類風濕關節炎的治療
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉夢元
- 依託單位：湖北大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
類風濕關節炎（RA）是一種以關節滑膜的慢性炎症為特徵的自身免疫性疾病，其病理生理特徵決定了免疫抑制劑在其治療上的主導地位，但系統給藥對免疫系統的抑制作用增加了患者感染和腫瘤發生的幾率，導致嚴重不良後果.設計組織特異性(選擇性)強的藥物，消除藥物對正常組織的免疫抑制作用，對該病的防治具有非常重要的意義。本研究旨在設計一種新型的RA生物治療劑並對這種治療模式的可行性進行探討，即利用基因工程方法構建抗TNF-α×抗ED-B雙功能抗體,以ED-B抗原在RA炎症關節滑膜中特異性高表達的特性來達到靶向治療和提高藥物的組織特異性的目的,並在RA的實驗動物模型上對這種新的治療模式的可行性進行研究。如果這種治療模式達到了預期目的，不僅可以得到有關這種治療模式的第一手研究資料，而且可為RA的治療提供新的藥物設計思路，為開發我國自主研製的RA生物治療劑提供理論依據和基礎，具有一定的經濟效益和社會效益。
結題摘要
類風濕關節炎(RA)是一種以關節慢性滑膜炎為特徵的自身免疫性疾病，其有效的防治是當今醫學面臨的巨大挑戰。目前上市的RA生物治療劑主要是TNF-α單抗，但單克隆抗體由於受到自身結構的影響，具有較差的藥動學特徵，主要表現在半衰期長、組織穿透能力差、炎症關節分布量低，正常組織分布量過高等特徵。長期系統給藥，容易造成患者發生微生物感染和腫瘤的風險。在本研究中，我們採用構建小分子抗體如單鏈抗體片段（scFv）的方法來避免上述單抗在藥動學上的不足，因為小分子抗體片段具有分子量小，組織穿透能力強，半衰期短等優點，可有效的避免上述單抗存在的問題，但較短的半衰期同時有成為小分子抗體的不利因素，由於快速的從血漿中清除，雖然極大降低了對正常組織的毒性，但同時也降低了其在炎症關節中的分布，往往使小分子的抗體的絕對分布量低於單抗。為了有效解決上述的矛盾，我們提出抗體靶向治療RA的觀點，即利用基因工程的方法構建抗TNF-α/抗ED-B的雙功能單鏈抗體，以ED-B抗原在RA炎症關節滑膜中特異性高表達的特性來達到靶向治療的目的。在本項目中，我們完成了項目任務書中的全部研究內容，主要有以下幾點： 1. 克隆和分析了抗ED-B單克隆抗體的VH和VL基因； 2. 構建了抗ED-B的scFv，對其生物學活性進行了研究，結果表明scFv能夠特異性結合ED-B分子，表明構建成功； 3. 在前期抗TNF-α scFv研究的基礎上，構建了抗TNF-α/抗ED-B的雙功能單鏈抗體；實現了雙功能抗體在大腸桿菌中的高效表達，對表達產物進行分離純化製備，進行生物學活性分析，結果表明雙功能抗體能夠同時與TNF-α和ED-B特異性結合，有效中和TNF-α的生理效應，表明雙功能抗體構建成功； 4. 完成了雙功能抗體的藥動學研究，結果表明與臨床上使用的抗TNF-α的單克隆抗體相比，雙功能抗體具有短的半衰期、低分布於正常組織、高分布於炎症關節，較高的靶血比和靶組比等特點，其藥動學特徵明顯由於TNF-α的單抗。 5. 在RA實驗模型上對雙功能抗體的治療效果進行了研究，發現10mg/kg/day的雙功能抗體能夠有效抑制膠原誘導的小鼠關節炎的進展。 以上結果表明，我們構建的雙功能抗體有效的克服了TNF-α的單抗在藥動學上的不足，在RA的治療上具有較好的套用前景。我們發表了與本項目相關的2篇科研論文，還有一些工作將陸續發表.
