《新型靶向納米顆粒介導CRAd治療前列腺癌的實驗研究》是依託揚州大學，由吳銀霞擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：新型靶向納米顆粒介導CRAd治療前列腺癌的實驗研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：吳銀霞
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
目前基因治療已經被認為是激素非依賴性前列腺癌治療的發展方向。具有靶向性強、轉染效率高、安全性高的基因載體是基因治療領域中的核心問題之一，最新研究發現人工合成的納米材料是理想的基因轉移載體，能夠攜帶外源基因整合到宿主基因組內。申請者前期自主合成了mPEG-PEI納米顆粒,證實其理化性質穩定，細胞毒性低，轉染效率高，適合用來作為基因治療的載體。本課題以PSCA為靶點，製備攜載PSCA單抗靶向人前列腺癌的mPEG-PEI納米顆粒。利用該納米顆粒對前列腺癌特異的尋靶能力，同時包被端粒酶逆轉錄酶(hTERT)啟動子驅動的EZH2-shRNA基因表達的條件複製型腺病毒(CRAd)，將目的基因精準轉導至前列腺癌細胞，在啟動子的驅動下EZH2基因被沉默，激素非依賴性前列腺癌細胞失去維持存活的關鍵基因，從而實現治療晚期前列腺癌的目的。這種靶向性的基因治療技術為激素非依賴性前列腺癌的治療提供了新的思路和策略。
結題摘要
目前基因治療已經被認為是激素非依賴性前列腺癌治療的發展方向。具有靶向性強、轉染效率高、安全性高的基因載體是基因治療領域中的核心問題之一，最新研究發現人工合成的納米材料是理想的基因轉移載體，能夠攜帶外源基因整合到宿主基因組內。利用前期自主合成了mPEG-PEI納米顆粒,並證實了其理化性質穩定，細胞毒性低，轉染效率高，適合用來作為基因治療的載體。本課題以PSCA為靶點，製備攜載PSCA單抗靶向人前列腺癌的mPEG-PEI納米顆粒。利用該納米顆粒對前列腺癌特異的尋靶能力，同時包被端粒酶逆轉錄酶(hTERT)啟動子驅動的EZH2-shRNA基因表達的條件複製型腺病毒(CRAd)，將目的基因精準轉導至前列腺癌細胞，在啟動子的驅動下EZH2基因被沉默，激素非依賴性前列腺癌細胞失去維持存活的關鍵基因，從而實現治療晚期前列腺癌的目的。針對人EZH2基因序列，設計合成了EZH2-shRNA質粒。構建帶有端粒酶逆轉錄酶（hTERT）腫瘤特異性啟動子CRAd載體，並攜帶EZH2-shRNA（CRAdhTERT-EZH2-shRNA）。成功製備了mPEG-PEI納米材料攜帶PSCA單克隆抗體的mPEG-PEI (mAb-mPEG-PEI, MPP)。將帶有PSCA單克隆抗體的mPEG-PEI納米顆粒包裹CRAdhTERT-EZH2-shRNA 合成MPP-CES複合物。體外實驗研究發現，MPP-CES與PC3，DU145前列腺癌細胞孵育培養，發現PC3，DU145細胞增殖，侵襲能力下降。建立裸鼠原位前列腺癌移植瘤模型。經尾靜脈注射MPP-CES納米重組腺病毒複合物後活體動物顯像觀察腫瘤的生長情況，結果發現裸鼠注射MPP-CES納米重組腺病毒複合物後原發灶腫瘤明顯縮小。製備識別激素非依賴性前列腺癌特異表達的抗原PSCA的新型納米載體（mPEG-PEI），構建人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)啟動子調控EZH2-shRNA基因的CRAd，將納米材料包被CRAd，組成納米材料CRAd複合物，這種複合物具有尋靶作用，能將目的基因特異性的轉導至前列腺癌中。通過靶向作用進入激素非依賴性前列腺癌細胞中，實現安全，高效，穩定治療激素非依賴性前列腺癌的目的，並為晚期前列腺癌的基因靶向治療提供了一種新的思路。
