《新型配體靶向抗腫瘤藥物hlFⅦ-LDM重組強化融合蛋白的研製》是宋旭於2013年12月12日編制的科技報告。
基本介紹
- 中文名：新型配體靶向抗腫瘤藥物hlFⅦ-LDM重組強化融合蛋白的研製
- 作者： 宋旭
- 編制時間：2013年12月12日
- 報告類型：最終報告
內容摘要
現代腫瘤治療研究的一個重要目的是研製能夠特異性攻擊腫瘤及其相關組織而儘可能降低對正常組織毒副作用的靶向抗腫瘤藥物。靶點（受體）、靶向分子及效應分子的選擇是設計靶向抗腫瘤藥物的關鍵。組織因子（tissue factor，TF）是一種在人肺癌NCI-H292、人乳腺癌MDA-MB-231等惡性腫瘤細胞高表達的細胞表面受體。凝血因子Ⅶ（factor Ⅶ，FⅦ）是TF的天然配體，與TF的結合具有高親和性、高特異性的特點。力達黴素（LDM）是一種烯二炔類的抗腫瘤抗生素，其分子由一個烯二炔發色團(AE)和一個輔基蛋白(LDP)兩部分構成。二者通過非共價鍵結合，在體外能夠被拆分和重建，重建的分子具有和天然LDM相近的生物學活性。本研究構建一種以TF為靶點，以人凝血因子Ⅶ輕鏈（the light chain of human FⅦ，hlFⅦ）為靶向結構域，以LDM為效應結構域的配體靶向抗腫瘤藥物hlFⅦ-LDM。利用PCR和DNA克隆技術構建重組蛋白hlFⅦ-LDP、hlFⅦ-LDP-mCherry和mCherry的表達質粒，並轉化E.coli感受態細胞進行蛋白表達；通過ELISA檢測融合蛋白hlFⅦ-LDP與重組人TF（rhTF）的結合活性，並通過免疫共沉澱實驗檢測其與腫瘤細胞表面TF的結合活性；用帶mChenry標籤的融合蛋白hlFⅦ-LDP-mCherry檢測其與腫瘤細胞表面TF結合後的內吞情況。在體外將AE與hlFⅦ-LDP組裝得到強化融合蛋白hlFⅦ-LDM，並其靶向性、抗腫瘤活性及作用機制。結果顯示強化融合蛋白hlFⅦ-LDM能夠有效抑制體外及體內腫瘤細胞的生長，且具有良好的靶向性及安全性；hlFⅦ-LDM是一種具有臨床套用前景和開發價值的新型配體靶向抗腫瘤藥物。
