《新型膜分子CMTM7在B細胞中的表達、功能和疾病相關性研究》是依託北京大學，由韓文玲擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：新型膜分子CMTM7在B細胞中的表達、功能和疾病相關性研究
- 項目負責人：韓文玲
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
CMTM是我室在國際上首次報導的新基因家族，CMTM7是其成員之一，定位於抑癌基因富集區3p22.3。甲基化修飾和LOH共同導致其在食管癌中表達下調；恢復CMTM7的表達可上調p27引起G1期阻滯，抑制細胞生長。CMTM7有膜定位形式，能促進EGFR內化，抑制Akt磷酸化。上述研究已投稿Cancer Res.，正在修稿中。CMTM7在免疫細胞中高表達，在ALL和AML患者的骨髓中表達下調；小鼠細胞中Cmtm7與Blnk相互作用，調控BCR內化。BLNK是BCR通路中的接頭蛋白，在B細胞發育分化中起重要作用，並具有與CMTM7功能相似的抑癌基因特性。本項目將研究CMTM7在不同種類、不同發育階段B細胞中的表達譜；分析其在B細胞增殖、活化中的功能和機制；明確CMTM7與BLNK的相互作用位點和功能關係；利用Cmtm7敲除小鼠研究CMTM7的生理功能及其與B細胞淋巴瘤、白血病的相關性。
結題摘要
CMTM是我室在國際上首次報導的新基因家族，CMTM7是其成員之一，在免疫系統高表達。小鼠CMTM7在IgM交聯後能夠與BLNK相互作用，促進其磷酸化。為研究CMTM7在免疫系統中的功能，我們構建了Cmtm7條件敲除小鼠（購買的ES 細胞，針對Cmtm7 外顯子2-3），發現F1代Cmtm7 flox/+小鼠出生不久便死亡，利用過繼轉移實驗，將14.5天的胎肝細胞轉移至照射後的Rag1-/-小鼠體內，發現Cmtm7 flox/+小鼠B、T細胞發育正常，B2細胞的體外存活、增殖和Ig基因類別轉換未受影響，但血清IgM下降，腹腔中B-1a細胞的比例和絕對數均顯著下降，在LPS刺激下的增殖能力降低。之後我們重新製備了針對Cmtm7 外顯子2-4的條件性基因敲除小鼠，已獲得全身敲除小鼠（EIIa-Cre）和在B細胞中特異性敲除Cmtm7的純合子小鼠（CD19-Cre），發現全身敲除Cmtm7不影響重要臟器及T、B細胞的發育，但腹腔中B-1a細胞的比例和絕對數明顯下降，血清IgM明顯下降，IgG無變化；在B細胞中特異性敲除Cmtm7也不影響B細胞發育，但腹腔中B-1a細胞和血清IgM明顯下降，IgG無變化，與Cmtm7全身敲除小鼠、Cmtm7flox/+雜合子小鼠的表型一致。此外，CMTM7在慢性B細胞白血病中的表達顯著下調，在Ramos細胞中穩定敲減CMTM7顯著促進細胞增殖和存活，抑制細胞凋亡，細胞總IgM及膜表面IgM水平明顯降低，但CD79B及CD19的表達沒有變化。CMTM7調節BCR、EGFR等受體的表達和轉運，但作用機制不清。目前對於EGFR轉運的研究模型和通路相對成熟，因此，我們首先研究了CMTM7對EGFR轉運及信號通路的影響，以便為BCR研究提供線索。我們通過系列實驗發現CMTM7通過增強Rab5活性和早期內體融合，促進EGFR內化、降解，降低EGFR-Akt信號，證明CMTM7是一個新的Rab5活性調節分子。Rab5不僅參與EGFR轉運，而且在BCR等免疫受體的運輸和信號轉導過程中也發揮重要作用，相關結果為深入研究CMTM7在B細胞中的作用機制奠定了基礎。綜上所述，CMTM7具有重要的免疫調節功能，在調控B-1a細胞的生存、BCR表達和B細胞腫瘤的發生髮展中具有重要作用。
