放射免疫分析的質量控制

放射免疫分析的質量控制，是為了的對每批測定結果準確性進行科學的分析，判斷此批樣品檢測值的有效性，以此為依據決定測定值的取捨，從而保證實驗室不發出錯誤的結果。

操作名稱

放射免疫分析的質量控制

方法及內容

放射免疫分析技術質量控制(quality control，QC)的目的是對每批測定結果準確性進行科學的分析，判斷此批樣品檢測值的有效性，以此為依據決定測定值的取捨，從而保證實驗室不發出錯誤的結果，為臨床診療及科學研究提供有價值的實驗數據。當一批檢測(或此批中的個別)樣品測定結果與臨床不符，或在科研中同批一組的個別檢測結果異常，要認真進行核對，並進行複測。

內質量控制

內質量控制是保證檢測結果準確性的最主要的手段，同時也是對試劑盒的質量的鑑定。在測量儀穩定及加樣器經矯正的前題下，也能對實驗操作者技術熟練程度進行評估。內質量控制以下列技術參數為依據。

1．精密度每批樣品的檢測 以試劑盒中控制樣品高、中、低(QC、H、M、L)所得值和廠家評定值之值間的偏差；如QC、H、M、L 值均漂移至超出所標定的濃度範圍，應視為本批所測得的樣品值不可靠，從質控圖上跟蹤試劑盒的質量。

2．本實驗室的QC參考樣品 為加強內質量控制，除套用試劑盒中QC、H、M、L外，每個實驗室收集正常和異常血清混合，同時測定10管，計算平均值和標準差，以±3SD作為範圍，分裝，放-20℃保存。每次進行樣品檢測時，同時檢測本室QC參考樣品，所得值應在允許範圍內，則確認該批樣品測定值可靠。

3．試劑盒的質量 試劑盒的質量不同廠家或同一廠家不同批號之間均存在一定差異，因此，對試劑的質量有嚴格的要求。檢測人員在試劑盒的有效期內，觀察不同時間檢測時標準曲線有關技術參數。判斷試劑盒的質量指標依據下列數據。

(1)非特異結合(NSB)以複合第二抗體作分離劑(PR法)時應<2.5%。

(2)要標準管(S0)結合率，常規檢測試劑盒應>35%。

(3)標準曲線的斜率(A)，截距(B)和相關係數(R)，觀察標準曲線各不同濃度點某一濃度的離線度。

(4)標準曲線(B/B0)ED25、ED50和ED75 三點相對應標準品濃度，觀察標準曲線的漂移。

外質量控制

外質量控制是評價不同廠家試劑盒不同實驗室同一組樣品測定值的比較。國際上比較通用，在我國尚未建立。外質量控制應由國家權威法制機構組織實施，由不同地區實驗室參加，建立質控網。由質控中心評定QC濃度作為真值，以未知樣品濃度下發至各地實驗室進行檢測。收集各實驗室測定值，對結果進行統計學處理，以此結果來評估各實驗室與真值的符合程度，分析造成誤差的原因，並以檔案形式對外發布。

因素

試劑盒中的主要組分為生物製劑，自身存在著不穩定性，又加之125I標記物中核素衰變及輻射自分解，此外，由於製備工藝或保存條件不當，都可影響試劑盒的質量，而在檢測時出現異常結果，又因各操作者的技術熟練程度，測量儀器的不穩定，也可造成出現偏差的因素。在這些因素中操作者的業務素質，可通過培訓及完善實驗室規章制度完全可以避免，加樣器和自動γ計數器按要求定期進行標定不難解決。因此，異常結果的發生，主要是試劑盒的不穩定性所致。試劑盒的不穩定性及標本採集不符合要求的原因綜合分析如下。

1．NSB結合率升高 ①125I標記物聚合。②DCC吸附分離劑加入量不足。③PEG分離法加入的PEG濃度過高。④試驗緩衝液中蛋白質濃度太低或無蛋白作保護劑。

2．零標準管結合率降低 ①抗體部分失活。②溫育時間短，免疫反應未達到平衡。③標記化合物部分失活或脫碘。④分離劑的量不足，加入後放置時間太短，或離心力未達到要求。

3．零標準管結合率升高 ①加入抗體量濃度過高。②125I標記抗原比活度過高，相對標記抗原量減少。

4．標準曲線右移 ①標準品部分失活。②抗體濃度過高。

5．標準曲線左移 ①標準品濃度高於所標濃度。②抗體部分失活。

6．待測樣品值假性升高 ①標準品部分失活，低於所標濃度。②採集某些樣品時未加合成阻斷劑(如檢測血漿中花生四烯酸代謝產物預先加環氧化酶抑制劑，阻斷體外合成)，或血液和阻斷劑未均勻混合。③脂血症血清含有大量中性脂肪，干擾抗原和抗體的結合。

7．待測樣品假性降低 ①標準品濃度高於標定值。②有些樣品在採集時未加足夠量的降解阻斷劑，如測定血漿環核苷酸(CAMP、CGMP)採血時須加磷酸二酯酶抑制劑EDTA、NAZ。③樣品保存條件不當，或保存時間過長。④有的待測物和血漿中的蛋白質為疏鬆結合形式，應按試劑盒說明書處理。

8．樣品管的結合率S0管 ①有的血漿中會有一種可以結合抗原的特異性蛋白。遇此種情況可採用酸性乙醇提取法去除樣品中的蛋白質加以排除。②新鮮組織樣品會有某些受體，可將製備的組織漿即刻放沸水中煮3min以破壞受體。