接頭蛋白SLAT在類風濕關節炎Th17細胞分化中的作用及機制

《接頭蛋白SLAT在類風濕關節炎Th17細胞分化中的作用及機制》是依託四川大學，由林輝擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：接頭蛋白SLAT在類風濕關節炎Th17細胞分化中的作用及機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：林輝
• 依託單位：四川大學

項目摘要

類風濕關節炎（RA）是一種常見的慢性炎症性疾病，輔助性CD4+T細胞（Th）的異常活化是RA發病的中心環節。Th17細胞是新近發現的一種能特異性產生IL-17 的Th細胞亞群，其分化調控異常介導的過度炎症反應在RA發病中起關鍵作用。本項目從探討調節Th17細胞分化的分子機制出發，以研究接頭蛋白SLAT對RA患者Th17細胞分化的作用及機制為目標，在體外培養CD4+T細胞，構建SLAT基因過表達和RNA干擾系統，通過觀察 ⑴ SLAT對RA患者Th17細胞分化的影響；⑵ 修飾SLAT對RA 患者Th17細胞分化的影響和機制；⑶ SLAT影響RA患者Th17細胞分化的信號通路，從而闡明SLAT在RA 患者Th17細胞分化中的作用和機制，為發現調控Th17細胞分化的分子靶點及其對RA潛在的治療作用提供理論和實驗的依據。

結題摘要

本項目從探討類風濕關節炎（RA）患者Th17細胞分化的分子機制出發，以研究接頭蛋白SLAT對RA患者Th17細胞分化的作用及機制為目標，在體外培養CD4+T細胞和PBMC，構建CD30 aptamer-SLAT-shRNA 嵌合體，干擾SLAT，觀察到： ① 活動期RA患者關節液中Th17細胞較外周血明顯增多，且關節液Th17細胞比例與全身炎症指標相關； ② 活動期RA患者外周血Treg細胞變化不明顯，但ACPA陰性組較陽性組增多，關節液中Treg細胞較外周血明顯增多； ③ 採用免疫螢光、流式細胞術、實時定量聚合酶鏈反應（Real-time PCR）發現SLAT表達於CD4+T細胞的胞膜和胞質，其蛋白水平在活動期RA患者外周血和關節液中增加，基因水平差別不明顯，但也呈增多趨勢，與Th17細胞變化趨勢相似； ④ CD30 aptamer-SLAT-shRNA嵌合體能轉染活化T細胞，有效沉默SLAT； ⑤ 體外給予anti-CD3/anti-CD28和Th17細胞分化細胞因子刺激PBMC，CD4+T細胞SLAT表達增多； ⑥ CD30 aptamer-SLAT-shRNA 嵌合體能抑制CD4+T細胞向Th17細胞分化，減少細胞因子IL-17和TNF-α的分泌，降低CD4+RORγt+T細胞、CD4+IL-17+T細胞、CD4+TNF-α+T細胞比率。結果提示，SLAT在RA關節炎症中發揮一定作用，參與了RA患者Th17細胞分化，其機制是通過調控關鍵轉錄因子RORγt調節Th17細胞分化，為下一步動物實驗或臨床套用提供了理論和實驗依據。