探討分化良好的脂肪肉瘤向去分化脂肪肉瘤轉化的機制

《探討分化良好的脂肪肉瘤向去分化脂肪肉瘤轉化的機制》是依託四川大學，由張紅英擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：探討分化良好的脂肪肉瘤向去分化脂肪肉瘤轉化的機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張紅英
• 依託單位：四川大學

項目摘要

非典型脂肪瘤性腫瘤/分化良好的脂肪肉瘤(atypical lipomatous tumor/well-differentiated liposarcoma,ALT/WDL)可進展為去分化脂肪肉瘤(dedifferentiated liposarcoma,DDL)，失去脂肪分化。本研究目的在於探討引起這一轉化的分子機制。用人DDL細胞5系、人ALT/WDL細胞系3系、小鼠前脂肪細胞系1系作為研究對象。將ASK1或JUN基因轉染入ALT/WDL細胞觀察ASK1或JUN表達增加是否能抑制脂肪分化；通過RNAi技術建立ASK1及JUN缺失的DDL細胞模型並建立裸鼠移植模型等實驗觀察抑制ASK1與JUN是否能促進脂肪分化；觀察DDL細胞植入ASK1或JUN基因敲除小鼠後移植瘤的脂肪分化情況；將小鼠前脂肪細胞植入裸鼠體內模擬脂肪肉瘤在體內的自然篩選及演進過程。

結題摘要

非典型脂肪瘤性腫瘤/高分化脂肪肉瘤(atypical lipomatous tumor/well-differentiated liposarcoma,ALT/WDL) ，可進展為預後差的去分化脂肪肉瘤(dedifferentiated liposarcoma,DDL)，失去脂肪分化。本研究目的在於探討引起這一轉化的分子機制。主要結果：①對24例DDL及23例ALT/WDL進行CGH array研究 ，發現24例DDL中20例除了有12q13-15區域的擴增以外，還有11例含有1p32區的擴增、9例有6q23區的擴增； 23例ALT/WDL中均無1p32或6q23區的擴增；②對9例 DDL進行SNP/CNV microarray研究發現所有病例（9/9）均有ASK1基因擴增，而無6q23擴增的腫瘤未能檢測出該基因的擴增；③用螢光原位雜雜交（fluorescence in situ hybridization, FISH）證實了ASK1在有6q23擴增的DDL（臨床樣本）的DDL區域（9/9，100%）及ALT/WDL 區域（6/6，100%）和DDL細胞系（DDL6Q）均有高水平擴增；而在單純的ALT/WDL病例（包括臨床樣本和細胞系）、缺乏6q23的DDL臨床組織樣本以及DDL細胞系中ASK1拷貝數正常；④用Real-time PCR、Western Blot和免疫組織化學等方法對腫瘤臨床樣本和細胞系均進行了檢測，結果顯示6q23擴增的腫瘤中ASK1存在高水平表達，進一步支持ASK1為6q23區擴增的靶基因並可能為導致脂肪肉瘤失去分化的重要原因；⑤用ASK1抑制劑thioredoxin (TRX)處理DDL細胞，結果顯示TRX處理7天后，細胞形態出現了顯著改變，細胞內脂質進行性聚集；⑥對100例ALT/WDL及97例DDL進行了FRS2的FISH檢測，結果顯示ALT/WDL及DDL中共有172例（172/197, 87.3%）出現基因擴增，包括ALT/WDL83例（83/100, 83.0%）和DDL89例（89/97, 91.8%）。本課題的數據提示DDL有向脂肪細胞分化的傾向但最終被阻斷，而這一過程很可能與6q23上的ASK1基因的擴增和過度表達有關，因此有深入研究的必要。